两种方法检测乙型肝炎病毒五项指标的结果对比

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1、两种方法检测乙型肝炎病毒五项指标的结果对比作者：龙青文，何建军，马家驹，何秀琳，肖金平【关键词】酶联；血清乳胶；定性分析　　［关键词］酶联；血清乳胶；定性分析　　乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗体(HBsAb)、e抗原(HBsAg)、e抗体(HBeAb)、核心抗体(HBcAb)的检测在许多方面如诊断乙肝判断愈后、筛选献血员、乙肝的流行病学调查、判断人群对乙型肝炎的免疫水平，对食品、保育及饮水管理行业人员定期进行健康体检等起着重要的作用。故选择一种特异、敏感、稳定的实验室检测方法检测乙型肝炎病毒的五项指标显得尤为重要。现将56例检测者血清同时用酶联免疫法和血清乳胶层析法对比检

2、测结果报告如下。　　１材料与方法　　1.1　标本来源　56例受检者中，男29例，女27例，最大年龄72岁，最小年龄29岁，平均年龄46岁；来自健康体检人群15例，其中13例检测具有阳性结果，2例各项指标均为阴性、另41例为门诊检查结果有阳性的患者，均系血清标本。6　　1．2　方法　酶联免疫法用乙型肝炎病毒(HBsAg，HBsAb，HBeAg、HBeAb，HBcAb)诊断试剂盒，由上海华泰生物工程实业有限公司生产，48人份，批号20040503，按说明书操作。乙肝两对半血清/血浆乳胶层析法检测试剂板由ACONLaboratories.Inc.SanDiegoCA92121USA提供，批号2

3、00407029，按说明书操作。　　1.3　质量控制　酶联免疫法每项检测项目均设阴、阳性对照各2孔，每空加入阴性对照(或阳性对照)各1滴，并设有空白对照1孔。乳胶层析法各项检删项目均设质控区(C)。　　1.4　检测结果　判定标准：酶联免疫法是根据颜色的变化，作定性分析。此法HBsAg、HBsAb、HBeAg呈黄色为阳性反应，无色为阴性反应，阳性对照为黄色，阴性对照为无色。HBeAb、HBcAb无色为阳性，黄色为阴性，阳性对照为无色，阴性对照为黄色。乳胶层析法HBsAG、HBsAb、HBeAg在测试区内(T)出现一条红色条带则是阳性结果，不出现红色条带则为阴性。HBeAb、HBcAb结果则

4、相反，强阳性标本测试区内(T)将没有红色条带，弱阳性标本测试区内(T)将有一条非常弱的红色条带，阴性标本测试区(T)将会出现明显的红色条带。无论相应的待测物质是否存在于标本中，质控区(C)都会出现红色条带。两种检测方法结果对比分析用卡方检验两两比较进行统计学处理。6　　2　结果　　根据上述的结果判定标准，用两种方法对56例检测者血清对比分析，结果见表1。　　表1　两种方法检测乙肝病毒五项指标阳性结果对比（略）　　从表1中看出，用两种方法检测的阳性结果HBeAg相同均为7例，HBsAg相差1例，HBsAb相差2例，HBeAB、HBcAb各相差3例，用四格表进行两两对比分析，其结果见表2~表

5、5。　　表2　HBsAg两种方法的结果对比（略）　　注：经χ2检验P>0.05。　　表3　HBsAb两种方法的结果对比（略）　　注：经χ2检验P>0.05。　　表4　HBeAb两种方法的结果对比（略）　　注：经χ2检验P>0.05。6　　表5　HBcAb两种方法的结果对比（略）　　注：经χ2检验P>0.05。　　表2～表5，每一项检测指标用两种方法检测，进行两两对比分析，经统计学处理，差异无显著性(P>0.05)。　　3　讨论　　3．1　关于检测结果的判定　　3.1.1　酶联免疫法试剂盒采用EIA原理，是将抗原抗体的高度特异性与酶对底物的高效催化作用有效结合

6、起来，根据酶作用底物颜色变化，作定性分析。各项检测项目的阴、阳性对照，空白对照均与实验要求相一致，如出现异常结果，在任何情况下，应重新测试。6　　3.1.2　乳胶层析法HBAg、HBsAb、HBeAg检测试纸条有用双抗体(抗原)夹心法，试纸条含有被事先固定于膜上测试区(T)的多克隆抗体(抗原)和质控区(C)的相应抗体(抗原)，如标本中含有相应的待测物质，在测试区内(T)出现一条红包条带，则是阳性结果，不出现红条第带则为阴性。HBeAb、HBcAb采用竞争抑制法，其强阳性标本测试区内(T)将没有红色条带，阴性标本测试区内(T)将会出现明显的红色条带。而质控区(C)无论相应的抗体是否存在于标

7、本中，都会出现一条红色色带，它是判断是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也做为试剂内控的标准，如果未出现红色条带，表明不正确的操作过程，或试纸条已变质损坏，在任何情况下，应重新测试。　　3．2　通过本文56例检测者血清对两种方法的结果对比，经统计学处理，检测结果差异无显著性(P>0.05)，两种方法均具有特异性强，灵敏度高，稳定性好等特点，但层析法相对操作便捷,15min可读取结果，酶联免疫法相对时间较长，需37℃水浴