两种方法检测人类免疫缺陷病毒抗体结果比较.doc

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1、两种方法检测人类免疫缺陷病毒抗体结果比较朱武军(贵州省贵阳市第六人民医院检验科550005)【摘要】目的比较化学发光法与酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测人类免疫缺陷病毒抗体(抗一HIV)的一致性。方法收集45份室间质评样本，分别用两种方法进行检测。结果化学发光法检测样本的吸光度／临界值比值明显高于ELISA法，两种方法对抗HIV检出率差异有统计学意义(Y2—25．002，P

2、446．61；R512．91文献标志码：B文章编号：1672—9455(2009)06—0455—02艾滋病即获得性免疫缺陷综合征，是由人类免疫缺陷病毒(HIV)引起的严重疾病，迄今仍无法有效治疗，除了行为干预等社会学手段外，阻断输血传播，及时发现HIV感染者并采取针对性措施，是目前疫情控制的重要技术手段。由于HIV进入人体后需要经过一段时间才会产生HIV抗体(抗一HIV)，这一时间医学上称为“窗口期”。艾滋病研究的重点领域之一就是尽可能缩短“窗口期”，而达到这一目的最重要的手段就是高质量的艾滋病诊断试剂盒和敏感性高的检测方法。化学发光标记方法

3、是近年来发展起来的一种新的非放射性免疫分析技术。为比较化学发光法与酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测抗一HIV的一致性，本文对同一份标本采取两种方法进行检测，现将结果报道如下。1材料与方法1．1标本来源所有标本均来自贵州省临床检验中心2006～2008年全省室间质评样本，一20℃以下保存。1．2仪器化学发光仪KPS-KM(北京科美东雅生物技术有限公司生产)；酶标仪MuhiskanMK3(芬兰)；洗板机(芬兰雷勃WwllwashPlus)。1．3试剂ELISA法检测试剂由北京万泰生物药业股份有限公司提供，批号120080101；化学发光法试剂为

4、北京科美东雅生物技术有限公司生产，批号20070920。1．4方法随机抽取室间质评10份阳性标本分别以1：5稀释作为待测标本，与另外35份标本，共计45份标本分别用两种方法进行检测，均严格按照各自的试剂盒说明书操作。1．5统计学方法用SPSSl2．0统计软件进行数据处理，数据资料比较采用Y2检验。2结果在45份标本中，化学发光法和ELISA法均为阳性29份，其样本吸光度／临界值(OD／CO)范围分别为2．379～179．100和1．633～28．375；两种方法均为阴性的标本12例，其OD／CO值范围分别为0．077～0．525和0．053～0

5、．617；在化学发光法为阳性而ELISA法为阴性的3例标本中，ELISA法的样本OD／CO值范围为0．607～0．849，而化学发光法的OD／CO值范围为1．230～1．787。结果见表1。表1两种方法对45份样本抗一HIV检测结果(”)由表1可以看出，化学发光法的敏感性高于ELISA法，两种方法抗HIV检出率差异有统计学意义(Y2—25．002，P<0．01)。3讨论艾滋病是由HIV感染所引起的一种获得性免疫缺陷性疾病，可通过性传播、血液传播和母婴传播途径感染人类，检出抗一HIV是艾滋病诊断的重要条件，而诊断HIV感染是艾滋病预防控制工作的重

6、要组成部分。因此，建立敏感、实用的检测方法，对于监测、诊断或血液筛查以及控制艾滋病的流行显得尤为重要。目前艾滋病诊断技术主要包括病毒检测和病毒特异性抗体检测等。由于HIV病毒分离、病毒载量测定、病毒核酸测定以及病毒抗原检测等方法难度大、费用高，因而抗体检测是常规检测方法，包括ELISA、聚丙烯酰胺凝胶电泳、间接免疫荧光试验和斑点印迹在内的检测技术用于筛选实验，免疫印迹试验用于确认实验。由此可见，提高敏感性、特异性，缩短窗El期和方法简便、快速，是HIV检测试剂未来发展的主要趋势。白1985年第1代抗HIV检测试剂问世至今，HIV血清学检测试剂已

7、经发展到第4代。但使用第4代试剂对艾滋病病毒抗体进行检测，仍然有2～3周的窗口期。此外，由于把抗宣石曲瓞一荟士浊包的击田休全原和抗体同时包被在反应板上存在着相互干扰的可能，影响了免疫反应的特异性。另外，从方法学上来讲，这种基于ELISA的分析方法，灵敏度终归是有限的[1]。本实验结果表明，化学发光法检测样本的OD／CO比值明显高于ELISA法，对于抗体效价较低的弱阳性血清样本，化学发光法具有明显优势，可以大大缩短“窗V1期”，最大可能地避免漏检，降低窗El期导致医院感染的风险，早期发现疾病，对防治艾滋病等传染病有着更大的技术优势。而且该技术与国

8、外普遍采用的管式发光法不同，首创板式发光法，具有高通量的特点，更加适合我国国情。目前，该方法的不足之处是试剂成本比较贵，但随着该技术逐步实现产业化，试