水母毒素的分离提取及溶血活性研究论文

《水母毒素的分离提取及溶血活性研究论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、水母毒素的分离提取及溶血活性研究论文【摘要】目的研究水母毒素的提取及其溶血活性的影响因素。方法通过缓冲溶液浸取、超声波细胞破碎等操作从水母触手的刺丝囊中提取毒素，采用分光光度法对水母毒素的溶血活性进行测定，并研究了温度、浓度和二价金属离子等因素对毒素溶血活性的影响。结果水母毒素的溶血活性对温度敏感，随着浓度的提高而增大，并且依赖于Ca2+，Mg2+等二价金属离子的存在。结论水母毒素具有较强的溶血活性，但不稳定。【关键词】水母毒素；提取；溶血活性Abstract:ObjectiveTostudytheextractionandtheaffecti

2、ngfactorstohaemolyticactivityofjellyfishvenom.MethodsJellyfishvenomtheoralarmstochickenredbloodcellsetricmethod.Theeffectsoffactorssuchastemperature,concentration,divalentmetalcationsonthehaemolyticactivityolyticactivityperature-sensitive,andimprovedolyticactivity.Conclusion

3、Thehaemolyticactivityofjellyfishvenomisrelativelystrong,butitisunstable.Key;Extraction;Haemolyticactivity生物毒素是生物活性最高、毒性最大的一类化学物质，对探索生命运动过程和发展新药均有重要价值。药物是指对失调的机体呈现有益作用的化学物质。药物的药理活性和毒副作用主要取决于药物分子的化学结构。化学结构与药物效应之间的关系（即构效关系）是药物研究的重要依据。海洋生物毒素所特有的化学结构使其极有可能成为特异的高活性、高药效的先导化合物.freel

4、olysin)是指多由病原微生物所产生的，能导致机体红细胞及其他有核细胞裂解的毒素类物质，它存在于环节动物、节肢动物、软体动物、棘皮动物等动物的血清或体液中，可以单独作为调理因子或通过蛋白水解酶发挥作用，其活性大小通过溶解（水解）脊椎动物的血细胞表示，最终的溶解效应被称作溶血活性。目前溶血毒素研究以微生物为主，无脊椎动物溶血毒素研究报道非常少，有关水母毒素溶血性能的研究报道很少［5］。本实验通过缓冲溶液浸取、超声波细胞破碎等技术从水母触手的刺丝囊中提取水母毒素，采用分光光度法对其溶血活性进行测定，并研究温度、pH值、金属离子等理化因子对其溶血活

5、性的影响。1材料与方法1.1水母的采集水母于200607采集于江苏燕尾港附近海域的人工养殖场，扇形带刺丝囊的触手沿水母口腕人工切除分放在食品级聚乙烯塑料袋中，扎好封口后，立即于-20℃冷冻保存备用。1.2水母毒素的提取及浓度测定取一定重量的冷冻的水母触手，在冷冻状态下放入浸取剂（0.01mol/L，pH6.0的磷酸缓冲液）中，在保持温度低于4℃的条件下浸泡3h，匀浆10min后，超声波破碎，超声波功率200gCl2、ZnCl2溶液，使二价金属离子的最终浓度分别为5，10，15mmol/L，10#实验管中加入2ml鸡红细胞悬液和透析过的水母毒素

6、、11#实验管中加入2ml鸡红细胞悬液和未透析的水母毒素，对照管中加入0.1ml磷酸盐缓冲溶液作为空白对照，实验管和对照管同时在37℃处理30min，检测溶血活性。所有实验管的水母毒素蛋白的最终含量都为0.5μg/ml。2结果2.1温度、浓度对水母毒素溶血活性的影响结果见表1。由实验结果可以看出，在实验浓度范围内，随着水母毒素浓度的提高，溶血活性增大。当浓度低于0.1μg/ml，几乎没有活性；当浓度高于0.8μg/ml，活性增大不显著。表1不同浓度的水母毒素经不同温度预处理后的溶血活性浓度（略）随着预处理温度的提高，水母毒素的溶血活性降低，预处

7、理温度高于45℃时，溶血活性显著大幅度下降。预处理温度达到100℃时，毒素蛋白变性，溶血活性完全丧失。这反映水母毒素的溶血活性对热是非常不稳定的。2.2二价金属离子对溶血活性的影响金属离子对溶血活性的影响实验结果见表2。结果显示，水母毒素透析后，溶血活性显著降低；添加CaCl2，MgCl2，ZnCl2后，溶血活性增大，并且随着二价金属离子浓度的提高，活性增强。说明水母毒素的溶血活性依赖于二价金属离子的存在，与类似的文献报道一致［5］。表2不同浓度金属离子作用下的水母毒素溶血活性（略）3结论水母毒素的溶血活性对温度敏感，当预处理温度高于25℃时，

8、活性明显下降，100℃时完全失去活性。水母毒素的溶血活性随着浓度的提高而增大，但当浓度高于0.8μg/ml，活性增大不显著。水母毒素的溶血活性依赖于C