水母毒素的研究进展科技论文检索作业

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1、水母毒素的研究进展14食工李如平146410090摘耍:概述水母毒素的心血管毒性、神经毒性、皮肤与肌肉毒性、细胞毒性、抗氧化活性及多种酶活性等。该毒素成分复杂、不耐热、易氧化，在分离、纯化及生物学活性研究等方面受到限制，因此制备高纯度、高活性水母毒素的新方法有待于探索开发。关键词:水母毒索;生物学活性水母是一类低等的浮游动物，包括刺胞动物门（腔肠动物门）钵水母纲的全部和水螅虫纲的部分种类。水母的种类很多，全世界已知约冇250种，直径10〜100cm,广泛分布于温带、亚热带及热带海域，属海洋杂食性生物。水母的基

2、木结构由伞部、U腕、触手、附器等组成，生活史为水螅世代（无性世代）和水母世代（冇性世代）的交替。冇性世代的水母通过触手上的刺丝囊发射刺丝注入毒液來捕食轮虫、枝角类、桡足类、小鱼和蝌蚪等。肽类毒素是刺丝囊毒液的主耍活性成分，相对分子质景10〜600kDa［1］,毒性大，是目前所知最毒的毒素之一。我W食用水母已有一千余年，是世界上最早利用水母的W家，水母在我W乃至整个东南亚地区具有重要的经济和药用价值。是部分水母含奋剧毒，蜇伤后可出现皮肤划痕、红肿，腹痛，痉挛，麻痹，心脏及呼吸衰竭甚至死亡等严重症状，每年因水母皙

3、伤致死者屡屡出现，研究水母毒素中毒机理与防护措施具有重耍意义。1.分离与纯化水母毒素主要由一组多肽类物质组成，不耐热、易氣化，因此其分离、纯化都需在低温、还原条件下进行。此外，水母毒索极易黏附于各种玻璃器皿上［2］，导致毒素分离、纯化难度加大，制备高纯度、高活性的水母毒素成为A前水母毒素研究的瓶颈，因此水母毒素在生物学活性与屮毒机理方而的研究滞后于其它有毒生物的毒素研究。收集含有大量刺丝囊的水母触手，通过匀浆、过滤和离心可以分离出完好的纯刺丝囊，用于下_步的粗毒提取。值得注意的是除主要分布于触手和口周的刺丝囊

4、外，其他部位（如中胶M、无刺丝囊的触手提取物等）也含宥一定量的毒性成分，并可产生相关的生物学效应。因此，必须将刺丝囊与其他组织有效分离开来，得到的刺丝囊纯度越高，保存越完整，越有利于飢毒及纯毒的制备和活性的保持，以及后续毒理和药理等方面的进一步研究。将刺丝囊在粗毒提取缓冲液（NEB）屮重新配制成悬液，经超速离心、超声处理，再离心得到的上清液即粗毐。为了使毒素蛋白保持稳定性和活性，常在提取缓冲液中加入抗氧化剂（维生素C、安息香酸），巯基保护剂（DTT，卄油，蔗糖），螯合剂（EDTA，EGTA）以及酶抑制剂（PM

5、SF，DFP）等［3］。检测粗毒活性之后，即可根据不同的目的进一步分离。常用方法是采用色谱技术结合SDS-PAGE等实验，分离到一条或数条电泳带确申一蛋白组分，然后进行毒索蛋白的活性或序列研究。John等［4］利用阴离子交换色谱法成功分离到42kDa的溶血毒素CA111，并测定其N末段序列XAADA-XSTD1DD/GUG。Sanchez-Rodriguez等［5］利用低压液相色谱法对C.marsupiali毒液进行分离，成功地提取出一种神经毒素和三种溶细胞毒素,相对分子质量分别是120,220,139,36

6、kDa。Carrette等［7］应用一种小的玻璃珠搅拌器，从刺丝囊中迅速提取出毒液，且不会出现其他方法带来的过度加热等问题。2007年，Brinkman和Burnell［6］利用C.fleckri毒素的多克隆抗体进行免疫印迹实验，对毒素蛋白表达量最大的蛋白条带进行序列测定和结构分析，成功地分离到了W种c.fleckri毒素的溶血蛋

7、TJ，这也是一种可行的提取方法，但就口前水母毒素研究而言，仅有澳大利亚在C.fleckri水母制备有多克隆抗体，给该法的推广带來了一定的困难。1.水母毒索的生物活性水母毒素成分复杂

8、，不同种间相差很大，毒性亦宥差别，其生物学活性往往是以一种成分为主，多种成分综合作用的结果。目前研究发现的有心血管毒性、神经毒性、皮肤与肌肉毒性、多种酶活性以及抗氧化活性等。2.1心血管毒性水母毒素的心血管毒性是0前研究最多、也是最为致命的，主要包括心脏、血管和溶血活性。家兔静脉注射立方水母(Boxjellyfish)毒素迅速出现高血压和心动过缓，大剂量(彡2mg/kg)时出现低血压和循环衰竭,最终导致死亡。死亡动物伴冇粉红色泡沫样痰，尸检可见双肺明显充血，表明死亡主耍是因为左心室衰竭所致，而小剂量(彡lmg

9、/kg)则不会出现上述症状［8，9］。毒液的心血管毒性易受钙通道附滞剂的影响，尼卡地平、维拉帕米等可明显减弱毒液的心血管毒性并降低实验动物的死亡率。推测水母毒素可以激活细胞膜上的L型钙通道，使其开放,细胞内钙堉加，最终形成钙超载导致心肌细胞溶解坏死［10］。但最近研究发现P.physalis和C.fleckeri毒素可以在细胞表面形成非特异性通透二价阳离子的孔道复合物(pore-formingcom