中药对骨质疏松大鼠骨骼肌形态学的影响

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1、中药对骨质疏松大鼠骨骼肌形态学的影响【摘要】目的：研究中药对骨质疏松大鼠骨骼肌形态学指标的影响。方法：SD雌性大鼠去势后，分为正常对照组（SHAM）、去卵巢手术组（OVX）、雌激素组(OVX+ES)、中药组（OVX+TCD），SHAM组、OVX组予蒸馏水，OVX+TCD予骨康灌胃给药，OVX+ES组给予尼尔雌醇灌胃，正常对照组给予蒸馏水灌胃。治疗3个月后取左侧骨直肌检测。结果：各指标中，去卵巢对照组与正常组比较均有显著差异（P<0.01），表明骨质疏松大鼠模型的骨骼肌存在着较明显的退变。激素组能明显增粗骨骼肌纤维（P<

2、0.01），中药组次之（P<0.05），且中药组与激素组比较无显著差异；激素组能使骨骼肌横截面积及骨骼肌纤维周长明显增加（P<0.01），中药组次之（P<0.05）；且中药组与激素组均能明显减少单位面积骨骼纤维数目（P<0.01）。结论：中药骨康能够提高骨骼肌纤维横截面积、周长，但其作用较雌激素弱。【关键词】骨质疏松；中药；骨骼；肌形态学；大鼠骨折是骨质疏松症最为常见的继发疾病，骨折后对运动能力、一般健康水平、社会行为能力、精神状态等都有显著的影响，甚至危及到生命。目前关于骨质疏松性骨折的研究中，除了认为骨

3、质量降低是骨折发生的主要原因外，骨骼肌的退变也逐渐被人们所认识，在此次研究中我们观察了中药骨康对骨质疏松大鼠骨骼肌的作用，观测肌形态学相关指标，探讨中药在治疗骨质疏松症过程中的多重作用。1材料与方法1.1药物及试剂中药骨康由淫羊藿、补骨脂、丹参、黄芪等10味中药组成，其提取液含生药量1.43g/mL，由广州中医药大学附属骨伤科医院制剂室提供；尼尔雌醇片由上海华联制药有限公司生产，批号：060702。1.2动物及分组选用6月龄健康雌性Sprague-DaL/100g腹腔注射麻醉，俯卧位固定，在背部中1/3处剪毛，自腰椎背部中线向下作

4、纵行切口长2~3cm，沿肩胛线分别于两侧肋下剪开腰肌，可见位于肾脏外下方的卵巢及与其相连的子宫角，对10只抽检大鼠和OVX组、OVX+ES组、OVX+TCD组的大鼠均行手术结扎并切断子宫角，完整切除双侧卵巢，切口缝合，完成手术造模；SHAM组大鼠行假手术，采用同样的麻醉和手术入路，找到卵巢后，切除卵巢附近的部分脂肪后即关闭。切除的组织交专人检查以确保组织的完整性，并通过组织学检测确实组织的正确性。术后所有大鼠按1.6万U/100g肌肉注射青霉素，每天1次，连续3d，防止术后感染。手术前、术后3月对抽检大鼠分别采用DXA进行全身骨密

5、度测定，用于证实本次实验大鼠在切除卵巢术后3个月出现了骨质疏松的改变，造模成功。1.4治疗方法手术后正常饲养3月后开始治疗，治疗时间为3个月。SHAM组、OVX组以蒸馏水10mL/kg灌胃，1次/d；OVX+TCD组按4.8g/kg骨康（相当于临床剂量的10倍），灌胃给药，每天1次；OVX+ES组给予尼尔雌醇1mg/kg灌胃，使用前配成混悬液（浓度为0.167mg/mL），1次/周，正常对照组每天给予蒸馏水10mL/kg灌胃。1.5取材方法实验过程中SHAM组12号、OVX+TCD组8号在进行活体骨密度检查时因麻醉过深死亡。剩余动

6、物采用断头处死的方法，在治疗后3个月后全部处死。处死后取左侧股直肌称量湿重后，分别放入10%中性福尔马林磷酸缓冲液中固定待行组织学检测。1.6实验指标测试方法断头处死大鼠，取出左侧股直肌分别用电子天平称量湿重后，再放入10%中性福尔马林磷酸缓冲液中固定24h，用70%~100%各级酒精脱水，二甲苯透明两次，浸蜡，石蜡包埋、切片（片厚约5m）、HE染色，封固好的切片置于20×20倍镜下观察骨骼肌组织形态变化[2，3]并照取图像，经由ImageProPlus5.0软件测量骨骼肌纤维平均直径、平均面积、周长及单位面积下骨骼肌纤维数量（由

7、于均采用了400×图像，具备同样放大率及标尺，其数值结果即能进行比较分析，所以未进行实际单位换算）。1.7统计方法全部计量资料采用x±s表示，统计处理软件系统采用SPSS10.0。数据组间比较采用单因素方差分析（One.3讨论如果不考虑性别、年龄和身高，局部肌肉强度是决定整个骨骼强度的重要因素[4]。在日常生活中骨骼最大的载荷来自肌肉的主动收缩，研究显示肌肉强度和肌肉含量与其附着骨骼的骨量呈正相关[2]。Frost[3]认为，肌力决定骨结构和骨量。张林提出[5]肌肉强度和骨强度具有紧密相关性，二者之间的比值处于恒定值，因此，如何保

8、持肌肉强度，对控制后天的骨强度和骨量是十分重要的。童普德[6]提出：作为一个完整的运动功能单位，骨与肌肉是紧密联系在一起的，肌力、肌组织质量和BMD之间显著相关，通过肌肉的收缩对骨产生应力负荷，也是治疗骨质疏松症的有效方法。另外，肌肉强度增加的同时