中药对骨质疏松大鼠骨骼肌形态学的影响论文

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1、中药对骨质疏松大鼠骨骼肌形态学的影响论文【摘要】目的:研究中药对骨质疏松大鼠骨骼肌形态学指标的影响。方法:SD雌性大鼠去势后,分为正常对照组(SHAM)、去卵巢手术组(OVX)、雌激素组(OVX+ES)、中药组(OVX+TCD),SHAM组、OVX组予蒸馏水,OVX+TCD予骨康灌胃给药,OVX+ES组给予尼尔雌醇灌胃,正常对照组给予蒸馏水灌胃。治疗3个月后取左侧骨直肌检测。结果:各指标中,去卵巢对照组与正常组比较均有显著差异(P0.01),表明骨质疏松大鼠模型的骨骼肌存在着较明显的退变。激素组能明显增粗骨骼肌纤维(P0.01).freelL,

2、由广州中医药大学附属骨伤科医院制剂室提供;尼尔雌醇片由上海华联制药有限公司生产,批号:060702。1.2动物及分组选用6月龄健康雌性Sprague-DaL/100g腹腔注射麻醉,俯卧位固定,在背部中1/3处剪毛,自腰椎背部中线向下作纵行切口长2~3cm,沿肩胛线分别于两侧肋下剪开腰肌,可见位于肾脏外下方的卵巢及与其相连的子宫角,对10只抽检大鼠和OVX组、OVX+ES组、OVX+TCD组的大鼠均行手术结扎并切断子宫角,完整切除双侧卵巢,切口缝合,完成手术造模;SHAM组大鼠行假手术,采用同样的麻醉和手术入路,找到卵巢后,切除卵巢附近的部分脂肪

3、后即关闭。切除的组织交专人检查以确保组织的完整性,并通过组织学检测确实组织的正确性。术后所有大鼠按1.6万U/100g肌肉注射青霉素,每天1次,连续3d,防止术后感染。手术前、术后3月对抽检大鼠分别采用DXA进行全身骨密度测定,用于证实本次实验大鼠在切除卵巢术后3个月出现了骨质疏松的改变,造模成功。1.4治疗方法手术后正常饲养3月后开始治疗,治疗时间为3个月。SHAM组、OVX组以蒸馏水10mL/kg灌胃,1次/d;OVX+TCD组按4.8g/kg骨康(相当于临床剂量的10倍),灌胃给药,每天1次;OVX+ES组给予尼尔雌醇1mg/kg灌胃,使

4、用前配成混悬液(浓度为0.167mg/mL),1次/周,正常对照组每天给予蒸馏水10mL/kg灌胃。1.5取材方法实验过程中SHAM组12号、OVX+TCD组8号在进行活体骨密度检查时因麻醉过深死亡。剩余动物采用断头处死的方法,在治疗后3个月后全部处死。处死后取左侧股直肌称量湿重后,分别放入10%中性福尔马林磷酸缓冲液中固定待行组织学检测。1.6实验指标测试方法断头处死大鼠,取出左侧股直肌分别用电子天平称量湿重后,再放入10%中性福尔马林磷酸缓冲液中固定24h,用70%~100%各级酒精脱水,二甲苯透明两次,浸蜡,石蜡包埋、切片(片厚约5m)、

5、HE染色,封固好的切片置于20×20倍镜下观察骨骼肌组织形态变化2,3并照取图像,经由ImageProPlus5.0软件测量骨骼肌纤维平均直径、平均面积、周长及单位面积下骨骼肌纤维数量(由于均采用了400×图像,具备同样放大率及标尺,其数值结果即能进行比较分析,所以未进行实际单位换算)。1.7统计方法全部计量资料采用x±s表示,统计处理软件系统采用SPSS10.0。数据组间比较采用单因素方差分析(Oneassandarchitecture:objectives,mechanisms,andrelationshipechaicallyadapti

6、veprocessinbone〔J〕.Bone,1996,18:S37-S43〔3〕FrostRM.Perspectivesonourage-ralatedbonemass:insightsfromane〔J〕.JBoneMinerRes,1997,12:1539-1546〔4〕杨欣,刘忠厚.骨强度在骨质疏松诊断中的作用〔J〕.中国骨质疏松杂志,2003,.freelRNA表达的影响〔J〕.中国中医骨伤科杂志,2001,9(4):1-4〔7〕AnnaMika,Visusclestrengthinenistry,physiology,andimp

7、licationsforhumanhealthofsoyisisoflavones〔J〕.AmJClinNutr,1998,68(Suppl):1333s-1346s

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