运动加中药对骨质疏松大鼠骨计量学的影响论文

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1、运动加中药对骨质疏松大鼠骨计量学的影响论文【摘要】目的观察运动与中药联合作用对骨质疏松大鼠骨组织形态计量学的影响。方法雌性SD大鼠随机分为正常对照组、去卵巢手术组、雌激素对照组、运动组、中药组、运动+中药组。正常对照组行假手术,其余各组行双侧卵巢切除术,术后3个月开始为期3个月的治疗。雌激素对照组用尼尔雌醇治疗,中药组和运动+中药组应用中药治疗,运动组和运动+中药组按要求进行运动。治疗结束后对腰椎骨作骨组织形态计量学分析。结果运动+中药组骨小梁的数目在治疗各组中最多,骨小梁分离度在各治疗组中最小,矿化沉积率在各组最高。结论运动与中药联合治疗方法对骨质疏松大鼠腰椎骨,具有促进骨

2、形成和抑制骨吸收的双重作用。【关键词】骨质疏松大鼠;骨组织形态计量学;运动;中药骨质疏松是一种多因多果全身性骨骼疾病.freela公司);甲基丙烯酸甲酯、邻苯二甲酸二丁酯(天津化学试剂一厂提供,批号分别为:040328和20030320);硫酸铬钾为汕头光华化学厂产品,批号:991001;中性树胶由上海明胶厂生产,批号10004160B。1.2主要仪器硬组织切片机(德国LeicaRM2155);慢速锯(美国BuehlerLTD.);碳化钨钢刀(德国Leica)自动图像数字化分析仪(德国Leica);计算机(中国方正电脑公司);骨形态计量学测量软件(美国OsteoMetrics

3、,Inc.)。1.3动物及分组选用6月龄健康雌性SD大鼠67只,体重260~290g,清洁级(由广州中医药大学实验动物中心提供,合格证号:2003A010)。随机分为6组,正常对照组(11只)、去卵巢手术组(12只)、雌激素对照组(12只)、运动组(11只)、中药组(11只)、运动+中药组(10只)。实验动物分笼饲养,自由进食标准饲料和饮用水。参照文献〔3〕制作去卵巢骨质疏松模型,用10%水合氯醛溶液按0.33ml/100g腹腔注射麻醉,正常对照组大鼠行假手术,其余各组大鼠双侧卵巢完整切除,进行手术造模。手术后正常饲养3个月后开始治疗,治疗时间为3个月。正常对照组、去卵巢手术

4、组和运动组以蒸馏水10ml/kg灌胃,1次/d;雌激素对照组按体重1mg/kg的标准给予浓度为0.167mg/ml的尼尔雌醇灌胃,1次/l/kg灌胃;中药组和运动+中药组按4.8g/kg骨康(相当于临床剂量的10倍),灌胃给药,每天1次;运动组和运动+中药组按要求给予跑步训练。本实验模拟田径运动中周期性耐力跑的形式,参照Bedford〔4〕的动物负荷标准,采用段氏PT98型鼠类跑台进行运动训练。训练大鼠的运动强度逐渐加大,2/min,持续20min,坡度为0°,以后隔日增加运动强度3m/min,增加运动时间10min。2/min,坡度为50,每天1h,每周连续训练5d,休息2

5、d。在动物处死前14和13d,以及处死前第3天和第4天分别于背部皮下注射25mg/kg盐酸四环素和5mg/kg钙黄绿素进行双荧光标记,以测量骨组织动态参数。1.4骨标本制备实验结束时,处死动物,取其第2腰椎椎体(L2)用低速锯切开暴露骨髓腔置于福尔马林缓冲液中固定24h后,经乙醇脱水后行不脱钙骨包埋。包埋块用硬组织切片机分别切成4μm的薄骨片和8μm的厚骨片。薄片用Goldner染色,透明后封片,用于测量骨形态计量学的静态参数。厚片直接透明后封片,用于测量骨小梁变化的动态参数。1.5观察指标测量和观察第2腰椎骨组织形态计量学静态和动态参数〔5〕。静态参数包括骨组织面积(T.A

6、r,mm2)、骨小梁面积(Tb.Ar,mm2)、骨小梁周长(Tb.Pm,mm)、破骨细胞数量(Oc.No,N)及其相应计算参数。计算参数为骨小梁面积百分数(Tb.Ar,%)、骨小梁宽度(Tb.Th,μm)、骨小梁数目(Tb.N,N/mm)、骨小梁分离度(Tb.Sp,μm)、每毫米破骨细胞数(Oc.N,N/mm)、单位骨小梁面积破骨细胞数(Oc.N/mm2,N/mm2);动态参数包括单荧光周长(sL.Pm,.freelm)、双荧光周长(dL.Pm,mm)、双荧光间距(IL.AR,μm/d)、骨形成率(BFR/BS,μm/d×100;BFR/BV,%/年;BFR/TV,%/年)。

7、1.6统计学处理所有数据以x±s表示,采用SPSS11.0统计软件,组间比较显著性测定用方差分析和t检验。2结果2.1各组大鼠第2腰椎骨组织形态计量学静态参数的变化从表1中可见,应用雌激素、运动、中药以及运动+中药4种治疗方法都能提高去势大鼠的骨小梁百分数,以运动+中药的疗效最好,但仍不能恢复到正常水平(P0.01)。4种治疗方法在对第2腰椎骨组织形态计量学静态参数的影响方面,雌激素以增加去卵巢大鼠腰椎的骨小梁周长为主,中药治疗主要体现在增加骨小梁的宽度上,而运动以及运动+中药的治疗作用主要表现在增加骨

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