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《嗜肺军团菌免疫原蛋白核酸疫苗诱导的小鼠免疫应答及其保护力》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、嗜肺军团菌免疫原蛋白核酸疫苗诱导的小鼠免疫应答及其保护力作者：杨志伟,陈建平，王涛,田玉【关键词】嗜肺军团菌;,免疫原蛋白;,免疫原性;,DNA疫苗 ImmuneresponseandprotectiveefficacyinBALB/cmiceinducedbyDNAvaccineencodingimmunogenicprotEinofLegionellapneumophila [Abstract]AIM:TostudytheimmuneresponseinmiceinducedbyDNAvaccineencodingimmunogenicprotEInofLgei
2、onellapneumophila(LP)andtoexamineitsprotectiveefficacyagainstLPinmice.METHODS:TheeukaryoticexpressionrebinantplasmidofLPimmunogenicproteingene(pcDNA3.1ip)munizeBALB/cfemalemiceintramuscularly,andantigenspecificantibodies,lymphocyteproliferativeresponse,IFNγproductionandcytotoxicTlymphocyt
3、eresponseoftheimmunizedmiceiceimmunizedbythepcDNA3.1iprepeatedlyberofsurvivorsineachgroupiceoralandcellularimmunityintheimmunizedmice.TheresultsindicatedthattheimmunogenicityofpcDNA3.1ipiceagainstinfectionafterLP(10LD50)challenge.CONCLUSION:TheDNAvaccineencodingimmunogenicproteinofLPcanbe
4、usedasacandidatefornovelvaccinedesign. [Keyophila;immunogenicprotein;immunogenicity;DNAvaccine [摘要]目的:研究嗜肺军团菌免疫原蛋白核酸疫苗诱导的小鼠免疫原性以及对LP感染小鼠的保护能力。方法:用嗜肺军团菌免疫原蛋白基因真核表达重组质粒pcDNA31ip作为DNA疫苗免疫BALB/c小鼠,检测免疫小鼠体内抗原特异性抗体水平、脾淋巴细胞增殖活性、IFNγ产生水平和CTL特异杀伤活性等指标,以评价疫苗的免疫原性。真核表达重组质粒pcDNA31ipDNA疫苗重复免疫BALB/c小
5、鼠2次,末次免疫2周后,用10倍LD50剂量攻击小鼠,计数小鼠的存活数及小鼠肺中的细菌数,观察感染鼠的肺部病理变化。结果:pcDNA31ip免疫小鼠后诱导产生了特异的体液免疫应答和细胞免疫应答,免疫组的免疫原性和免疫保护性均高于对照组pcDNA31(+)组（P<001）。结论:免疫原蛋白基因可作为嗜肺军团菌核酸疫苗的侯选基因。 [关键词]嗜肺军团菌;免疫原蛋白;免疫原性;DNA疫苗 军团病是近30年来新发现的传染病之一。军团病是由军团菌引起的一种以肺炎为表现的常伴多系统损害的急性细菌性传染病,病程进展快,病死率高,易爆发流行。其中引起人类疾病的主要是嗜肺军团菌（
6、Legionellapneumophila,Lp）,有15个血清型,其中以血清Ⅰ型最为重要。军团菌广泛存在于自然环境水和供水系统中,人因吸入含有军团菌的气溶胶而感染,并在肺泡上皮细胞和单核巨噬细胞内增殖。该病目前尚无有效的疫苗用于预防。军团菌的外膜蛋白与其致病密切相关。相对分子质量（Mr）为2900的外膜蛋白（29kDimmunogenicprotein,IP）为1～10血清型所共有,具有种的特异性,是机体免疫应答反应的主要免疫原,由嗜肺军团菌主要免疫原基因ip编码产生[1]。Mr2900外膜蛋白也与细菌的毒力密切相关,具有黏附作用、抗吞噬作用等。我们将已构建好的嗜肺军团
7、菌ip基因真核重组质粒pcDNA31ip作为DNA疫苗免疫BALB/c小鼠,观察其免疫原性和免疫保护性。 1材料和方法 1.1材料嗜肺军团菌菌株Lp1型标准株及军团菌兔抗血清由中国疾病预防控制中心传染病控制所惠赠,本室保存。质粒pcDNA31(+)由本室保存,重组质粒pcDNA31ip由作者在以往的研究中构建。Omega无内毒素质粒大提取试剂盒购自天泰试剂公司,BPBBiomedicals.Inc(USA)小鼠IFNγ检测试剂盒购自豪亿试剂公司,辣根过氧化物酶标记的羊抗兔抗体及其他试剂均购自博瑞克试剂公司。BALB/c小鼠
