ves诱导口腔鳞癌tca8113细胞凋亡的实验研究论文

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1、VES诱导口腔鳞癌Tca8113细胞凋亡的实验研究论文【关键词】VES；,口腔鳞癌；,bax基因【摘要】目的明确VES对口腔鳞癌细胞Tca8113的作用，为临床应用VES防治口腔鳞癌提供科学的实验数据。方法RTPCR法检测促凋亡基因bax在mRNA水平上的表达，ethodsUsingRTPCRdetectedandquantifiedtheexpressionofbaxmRNA.I1640培养液，培养于37℃、5%CO2培养箱中，每3~4d传代1次。1．2．2反转录聚合酶链式反应（RTPCR)：选取实验组、对照组细胞，加入1mlRNAexReagent，将细胞并RNAexRea

2、gent一起移入Ep管中。室温静置5min，再加入200μl氯仿，用力颠倒Ep管混匀。静置5min后，12000r/min10min。小心将上层水相移至Ep管中，加入500μl异丙醇，振荡混匀，室温静置8min。高速离心5min，小心弃上清。加入1ml75%乙醇，振荡片刻，7500r/min5min，小心弃上清。室温静置12min使RNA沉淀恰好干燥，加入水溶解RNA。720分光光度计上测260nm、280nm的OD值，计算RNA的浓度。取等量RNA、OligdT、DEPC水共13μl。70℃加热8min，立即将微量离心管冰浴至少1min，然后加入下列试剂：5′buffer5μ

3、l，dNTPs5μl，MMLVRT1μl，Rasin1μl，轻轻混匀，放入37℃恒温水浴锅中60min。90℃，2~3min。50μl反应体系：灭菌三蒸水34μl，引物11μl，引物21μl，10′buffer(MgCl22.5mmol/L)5μl，dNTPs5μl，Taq酶1μl，cDNA3μl，混匀，7500r/min30s，石蜡油覆盖。PCR循环参数设置：预变性94℃350s，变性94℃60s，退火60℃60s，延伸72℃60s，再延伸72℃300s，共35个循环。1．2．3unozMedellinD,etal.Roleofextracellularsignalregul

4、atedkinasepathanMDAMB435breastcancercells［J］.MolCarcinog，2002,33(4):2282364.BorelP,PasquierB,ArmandM,etal.ProcessingofvitaminAandEinthehumangastrointestinaltract［Ｊ］.AmJPhysiol，GastrointestLiverPhysiol，2001,280(1):G95G1035.HartmanTJ,AlbanesD,RautalahtiM,etal.Physicalactivityandprostatecanceri

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