egcg对舌鳞癌tca8113细胞侵袭转移的研究

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1、温州医学院硕士学位论文EGCG对舌鳞癌Tca8113细胞侵袭转移的研究姓名：许紫薇申请学位级别：硕士专业：口腔临床医学指导教师：方一鸣2012-05-19温州医学院硕士学位论文EGCG对舌鳞癌Tea8113细胞侵袭、转移的研究中文摘要舌鳞状细胞癌(tonguesquamouscellcarcinoma)是口腔颌面部最为多见的鳞状细胞癌，恶性程度高，生长快，浸润性强，转移率高，预后较差，给病人的生活生存带来了巨大威胁。舌鳞癌的病因是多因素相互作用的结果，主要涉及到全身营养不良、口腔黏膜长期异物刺激、长期吸烟饮酒等。目前临床上主要以外科手术治疗、放化疗、生物治疗

2、等综合治疗为主。没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin一3一gallate，EGCG)是绿茶儿茶素的主要成分之一，具有明显抗氧化、抗癌、抗炎、抗突变、抗衰老等生物活性，且经研究证明具有无毒或者少量毒副作用的特点。随着对EGCG研究的不断深入，其越来越得到国内外研究员的认可重视。目的：研究EGCG对舌鳞状细胞癌Tca8113细胞侵袭转移能力的影响，以及初步探讨EGCG作用舌鳞癌Tea8113细胞删P一9的分子机制。方法ll、采用细胞划痕实验观察在o、24、484,时段不同浓度EGCG(o，20，40，80ug／mL)刺激舌鳞癌Tca8113细

3、胞的体外迁移能力的影响，计算出细胞迁移率(migrationrate，MR)，MR(％)=[(S。一S。)／s。]×100％，并进行统计学分析。通过Transwell侵袭实验，分别观察在16d,时段不同浓度EGCG(0，20，40，80lag／mL)对Tca8113细胞体外侵袭能力的影响，并对细胞侵袭数目进行分析。2、采用Westernblot法检测不同时间段(24、48h)不同浓度的EGCG(0，20，40，80ug／mL)刺激Tca8113细胞后蛋白表达水平的变化，并对相关数据进行统计学分析。结果：1、细胞划痕试验结果表明：EGCG作用舌鳞癌Tca811

4、3细胞后，在同一浓度不同时间段作用下，与Od,时相比细胞迁移率变化具有统计学意义并呈时间依赖性；同一时段不同浓度，与对照组相比细胞迁移率变化具有统计学并呈浓度依赖性。但在484,时浓度20

5、lg／mL时，与对照组相比不具有统计学意义(P>O．05)。Transwell侵袭试验结果显示：不同浓度EGCG作用离体舌鳞癌Tca8113细胞16小时后，细胞侵袭能力与对照组相比均受到抑制作用并呈浓度依赖性。2、Westernblot实验显示：不同浓度EGCG同一时段作用舌鳞癌Tca8113细胞后，细胞中删P一9的表达受到明显抑制并呈浓度依赖性。结论I1、EGCG对于舌

6、鳞癌细胞的转移能力具有明显抑制作用，并呈时间浓度依赖性：EGCG对于舌鳞癌细胞的侵袭能力具有明显抑制作用，并呈浓度依赖性。2、EGCG对于删P一9的表达具有明显抑制作用，呈浓度依耐性，从而证明EGCG通过抑制蛋白删P一9的表达来抑制舌鳞癌Tca8113细胞侵袭转移。温州医学院硕士学位论文lTSCCEGCG细胞划痕试验Transwell试验westernblotMMP-9细胞侵袭转移6温州医学院硕士学位论文EffectofEGCGonhumantonguesquamouscellcarcinomTca813cellinvasionandmetastasisTo

7、nguesquamouscellcarcinoma(TSCC)isthemostcommonoralandmaxillofacialsquamouscellcarcinoma．becauseofthehighmalignancy，fastgrowth，highinvasionmetastasis，andtheprognosisispoor,itishugethreattothelivingofpatients．variousfactorsCancauseTSCC，mainlyrelatedtogeneralmalnutrition，andoralmucosa

8、haslongtimebeenstimulated，long—termsmokinganddrinking．Today，Themajorclinicaltherapeuticmethodisthecomprehensivetreatmentsuchassurgicaltreatment，chemoradiation，biologicaltherapy．Epigallocatechingallate(EGCG)，isoneofthemajorcomponentsofgreenteacatechins，withantioxidant，anticancer，ant

9、i—inflammatory，anti—mutage