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1、单细胞多重巢式PCR在多囊肾病中胚胎植入前诊断的实验研究论文朱琴徐炳森黄学锋周颖【摘要】目的建立单细胞的多重巢式荧光PCR技术，为开展常染色体显性多囊肾疾病行胚胎植入前遗传学诊断提供依据。方法用四重荧光巢式PCR和毛细管电泳对单个淋巴细胞的KG8、SM6、C6、CethodUsequadruplexnestedfluorescentPCRandcapillaryelectrophoresistoanalysisthepolymorphismtypeofKG8,SM6,C6,C荧光标记。引物由上海生工生物工程技术服务有限公司合成，具体内外引物序列
2、见表1。第一轮PCR：64个淋巴细胞均应用四重巢式PCR，同时扩增微卫星KG8、SM6、C6和C的dNTP0.5μl，5mM镁离子1.4μl，10μM的KG8正反引物各0.4μl，模板1μl，HighFidelityTaq酶0.07μl，最后用水补充至10μl；PCR循环条件96℃4min,96℃45s,58℃45s，72℃30s，共36个循环,最后72℃再延伸10min。SM6、C6扩增成功率为89.06%（57/64），C6、CIM173900,PKD1andPKD2genes,proteinproductsknoGe,2004,12(5)
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