番石榴叶总黄酮提取工艺研究论文

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1、番石榴叶总黄酮提取工艺研究论文【摘要】目的为充分利用番石榴叶资源，优选番石榴叶总黄酮的最佳提取工艺。方法以总黄酮含量为考察指标，采用正交设计的方法研究提取番石榴叶总黄酮的工艺条件。结果影响番石榴叶总黄酮提取效果的主次因素为：乙醇浓度回流时间提取次数溶剂用量。结论番石榴叶总黄酮最佳提取工艺为10倍量70%乙醇加热回流提取两次，2h/次。【关键词】番石榴叶；总黄酮；正交设计Abstract：ObjectiveTostudyanextractiontechnologyfortotalflavonesfromleavesofPsidiumg

2、uajavaL.MethodsTheextractionconditionsoftotalflavoneseasuringthecontentofthetotalflavonesextracted.ResultsThefactorsesandheatedtimes.ConclusionTheoptimumprocessoftheextractiontechnologyesextraction,te.KeyguajavaLeaves;Totallflavones;Orthogonaldesign番石榴叶为桃金娘科植物番石榴Psidiu

3、mguajavaL.的干燥叶及带叶嫩茎，分布于华南各地至四川西南部，含β-谷甾醇、榭皮素、番石榴苷、无色车菊素、番石榴酸等成分［1］。现代药理研究表明，番石榴叶提取出的总黄酮苷及单黄酮苷具有降血糖的作用［2］；近年来对黄酮类化合物的药理作用研究较多，发现其具有抗心脑血管病、抗氧化、镇痛、抗病毒、抗肿瘤、免疫调节等作用［3.freell圆底烧瓶中，按要求加入一定量的提取剂，加热回流提取一定时间，滤过，滤液减压回收溶剂，真空干燥，称重，得待测番石榴叶干膏。2.2总黄酮含量测定方法2.2.1测定波长的确定精密称取干燥芦丁对照品20mg，置

4、100ml容量瓶中，60%乙醇溶解，定容，得标准对照液（含无水芦丁0.2000g/L）。精密移取芦丁对照液2.0ml置25ml容量瓶中，加入50g/L亚硝酸钠溶液0.75ml，摇匀，静置6min；再加100g/L硝酸铝溶液0.75ml，摇匀，静置6min；再加40g/L氢氧化钠溶液10ml，60%乙醇稀释至刻度,摇匀，静置10min，以60%乙醇调零，从200nm至600nm进行全波长扫描，测得500nm处有最大吸收，因此以500nm为测定波长。2.2.2标准曲线绘制分别精密移取芦丁标准对照液0，1.5，2.5，3.5，4.5，5.

5、5ml置25ml容量瓶中，按“2.2.1”项下“加入50g/L亚硝酸钠溶液”起操作，以第一瓶溶液为空白调零，于500nm测各瓶溶液吸光度；以浓度（C）和吸光度（A）进行线性回归，得方程为：A=9.9754C-0.0035；r=0.9989。2.2.3精密度实验精密吸取芦丁对照液2.0ml置25ml容量瓶中，按“2.2.1”项下操作，60%乙醇调零，于500nm测溶液吸光度，结果RSD为0.85%（n=6）。2.2.4稳定性实验将同一待测番石榴叶干膏按样品总黄酮含量测定方法项下操作，分别于0，2，4，6，8h进行测定，结果RSD1.2

6、7%，表明各供试品溶液中总黄酮在测定的8h内可保持稳定。2.2.5重复性实验将同一待测番石榴叶干膏按样品总黄酮含量测定方法项下操作，平行测定6次，结果RSD为1.84%。2.2.6回收率实验采用加样回收法。精密称取已知含量的样品5份，分别加入精密称定的对照品适量，按样品总黄酮含量测定方法项下操作，测定吸光度并计算回收率，结果平均回收率为96.86%，RSD为0.82%。2.2.7番石榴叶样品总黄酮含量测定精密称取不同提取条件所得番石榴叶干膏12mg，置10ml容量瓶中，60%乙醇溶解，定容，精密移取5ml置25ml容量瓶中，按“2.

7、2.1”项操作，60%乙醇调零，于500nm测溶液吸光度，根据回归方程计算总黄酮浓度，并计算样品总黄酮含量。总黄酮量（mg）=总黄酮浓度×溶液体积×样品干膏量/6总黄酮含量（%）=（总黄酮量/干药材量）×100%2.3提取工艺研究由于乙醇作为提取溶剂具有选择性好，渗透性强，浸出率较高的优点，因此本实验选择一定浓度的乙醇溶液作为提取剂。根据预实验结果，选择溶剂浓度、溶剂用量、提取次数、回流提取时间4个因素进行正交设计，选用L9(34)正交表，因素水平表见表1。按表2所列各工艺组合制备样品，按“2.2.7”项方法测定，计算总黄酮含量。结

8、果见表2。方差分析见表3。由分析结果可知影响番石榴叶总黄酮提取的主次因素依次为乙醇浓度回流时间提取次数溶剂用量；其中乙醇浓度对提取率的影响有显著性差异（P0.05）；提取的最佳方案为A2B1C2D2，即10倍量70%乙醇加热回流提取两