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《贯叶金丝桃总黄酮提取工艺研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、贯叶金丝桃总黄酮提取工艺研究【摘要】目的对贯叶金丝桃中总黄酮的提取工艺进行优选。方法采用正交试验法,以总黄酮为指标,对乙醇浓度、溶剂量、提取时间及提取次数4种因素进行了研究。结果将贯叶金丝桃用8倍70%乙醇提取3次,每次2h,可以获得较高的提取率。结论此工艺有效成分提取率较高,重复性好,稳定可行。【关键词】贯叶金丝桃；总黄酮；金丝桃苷；提取工艺Abstract：ObjectiveTooptimizetheextractionprocessoftotalflavonoidsinHypericumperforatum
2、L..MethodsTheconcentrationandvolumeofalcohol,extractiontimeandfrequencyweresystematicallystudiedbythetotalflavonoidsasthemarker.ResultsThemoreeffectivewaytoextracttotalflavoneswasextractionwith8timesamountof70%alcoholunderrefluxfor3timesand2hforeachtime.Concl
3、usionThismethodobtainsmoreeffectivecomponents.Itisstableandreliable.Keywords：HypericumperforatumL.；totalflavonoids；hyperoside；extractionprocess10贯叶金丝桃为2005年版《中华人民共和国药典》(一部)新增的药材品种,是藤黄科金丝桃属植物贯叶金丝桃HypericumperforatumL.的干燥地上部分,具有舒肝解郁、清热利湿、消肿止痛等功效,用于情志不畅、气滞郁闷、关节肿
4、痛、小便不利等。有研究表明,贯叶金丝桃总黄酮具有保肝、抗乙肝病毒和利胆作用,且其中的金丝桃苷效果最好。我们在以往研究的基础上,对贯叶金丝桃总黄酮的提取工艺进行了进一步的研究,现报道如下。 1仪器与试药贯叶金丝桃HypericumperforatumL.购自亳州九方药材公司,产地为四川古蔺地区,安徽中医学院药学院中药教研室潘鲁敏副教授鉴定为藤黄科金丝桃属植物贯叶金丝桃的上枝叶。金丝桃苷对照品购于中国药品生物制品检定所(批号111521-200303)。乙醇购自合肥酒精厂,其他试剂均为分析纯,重蒸馏水自制。 2含
5、量测定 2.1金丝桃苷含量测定采用高效液相色谱法测定金丝桃苷的含量，计算金丝桃苷提取率。 2.1.1对照品溶液的制备10 精密称取干燥至恒重的金丝桃苷对照品5.2mg,置25mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,制成0.208mg/mL金丝桃苷对照品溶液。 2.1.2供试品溶液的制备 取贯叶金丝桃提取物约40mg,精密称定,加甲醇溶解后滤过,定容至50mL量瓶中,制成供试品溶液。 2.1.3标准曲线的绘制 精密吸取金丝桃苷对照品溶液0.5、1、2、3、4mL,分别用甲醇定容至10mL,制得系列对照品溶
6、液。分别进样20μL,记录峰面积值Y,以C为横坐标,Y为纵坐标,得回归方程：Y＝175233C＋9464.6,r＝0.9999,说明金丝桃苷在10.4～83.2μg/mL范围内具有良好的线性关系。 2.1.4精密度试验 取同一份对照品溶液,浓度为20.8μg/mL,进样20μL,重复6次,测定峰面积,结果RSD＝1.47%,说明精密度良好。10 2.1.5重复性试验 取同一批贯叶金丝桃药材提取物6份,制备样品溶液,分别进样20μL,测得峰面积RSD＝1.36%,表明该法重复性较好。 2.1.6稳定性试验
7、 取供试品溶液,分别在0、2、4、6、8h进样20μL,测定峰面积,RSD＝1.24%,结果表明在8h内样品溶液稳定性较好。 2.1.7加样回收率试验 精密称取已知金丝桃苷含量的贯叶金丝桃提取物40mg,精密加入金丝桃苷对照品(0.235mg/mL)5mL,依法制备供试品溶液。分别进样20μL测定峰面积,计算回收率,结果见表1。表1金丝桃苷加样回收率试验结果（略） 2.1.8样品含量测定 按供试品溶液制备方法制备样品溶液,精密吸取20μL,注入高效液相色谱仪,测定金丝桃苷含量,见图1,计算金丝桃苷的提取
8、率。10 2.2总黄酮含量测定 采用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH比色法测定贯叶金丝桃总黄酮含量,计算总黄酮提取率。 2.2.1测定波长的选择 取金丝桃苷对照品、供试品溶液,比色后,进行紫外光谱扫描,其在510nm附近有最大吸收峰,因此,选择510nm作为检测波长。 2.2.2测定方法 精密吸取甲醇、芦丁对照品溶液和供试品溶液1.0mL,分别置于25mL
