人乳铁蛋白对细胞增殖的影响论文

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1、人乳铁蛋白对细胞增殖的影响论文仇志琴李志沭黄玉政杨欢成勇【摘要】目的探讨人乳铁蛋白(hLF)对体外培养细胞生长特性的影响。方法MTT法评定hLF对人鼻咽癌细胞、中国仓鼠卵巢细胞、人肝脏细胞的生长抑制作用。结果乳铁蛋白对人鼻咽癌细胞系E的增殖有抑制作用并呈现剂量依赖性，对正常细胞无抑制作用。结论hLF可能是一种效果较好的新的抗肿瘤化学剂。【关键词】人乳铁蛋白;癌细胞;细胞增殖【Abstract】ObjectiveToexploretheeffectoflactoferrinonproliferationoftheculturedcell

2、sinvitro.MethodsMTTassayanner，buthadnoeffectonthenormalcells.ConclusionsLactoferrinasaneopreventiveagentcouldsignificantlyinhibitthegroacells.【Keyanlactoferrin;Carcinomacells;Cellproliferation人乳铁蛋白(HumanLactoferrin，hLF)是主要存在于人乳清中的球蛋白，乳汁中特别是初乳中含量最高，具有广谱抗菌、抗病毒、抗肿瘤等作用〔1，2

3、〕。国外有学者将其应用于肿瘤患者的治疗〔3〕.freelg/ml，-20℃储存备用)和噻唑蓝(MTT，Lot:M2128)均购自Sigma公司。RPMI1640、胎牛血清购自HyClone公司。其他试剂均为分析纯。1.2实验方法1.2.1细胞培养各细胞系均应用含10%胎牛血清和1%青链霉素的RPMI1640培养基，5%CO2，37℃培养。1.2.2MTT法检测细胞增殖设空白对照组和hLF干预组。待细胞生长至对数生长期，接种于96孔细胞培养板，接种数为5×104/孔。每组细胞设5个平行孔，各组细胞分别加入不同浓度的hLF(0，1.25×

4、10-3,2.5×10-3，5×10-3，10×10-3，20×10-3，40×10-3g/L)，每孔均为200μl。作用24h后，加入MTT(5g/L，每孔20μl)，继续培养4h，测定A570nm吸光度。1.2.3细胞形态观察细胞经hLF处理后，倾去上层悬浮死细胞并用PBS洗两遍，加入新鲜培养基。同样处理对照孔细胞，将细胞置于倒置显微镜下，观察细胞形态的变化。1.3统计学处理数据用x±s表示，组间比较用方差分析。2结果2.1重组hLF对鼻咽癌细胞E、人肝脏细胞L02、中国仓鼠细胞CHO系的增殖能力的影响对E呈现剂量依赖性的抑制作用

5、，而对正常细胞无抑制作用，见表1。表1人乳铁蛋白对各细胞体外增殖的影响与空白对照比较:1)P0.052.2细胞形态学观察显微镜镜下可见，空白对照组癌细胞密集成片生长，如铺路卵石状，细胞膜圆润，透明，颗粒较少，细胞间界限清楚，并可隐约见到细胞核。hLF处理组癌细胞形态发生明显的改变，随hLF浓度增加，细胞从正常的增殖旺盛的贴壁生长，逐渐表现为生长缓慢，黏附力降低，细胞变圆，细胞胞质粗糙，细胞内颗粒逐渐增多，且透明度降低，立体感较差，细胞形态完整性受损，而正常细胞在图1细胞镜检图hLF作用下无显著变化(见图1)。3讨论hLF多种生物学功能

6、通过免疫系统的激活与调节得以实现〔5〕。Bezaul〔6〕研究发现，乳铁蛋白能抑制鼠实体瘤的生长和转移。肿瘤内注射LF，可以明显的减小实体瘤的体积，且作用效果与LF干预天数相关。研究〔7，8〕发现，乳铁蛋白的抗头颈部肿瘤作用是通过抑制肿瘤细胞增殖实现的。〕.北京:中国轻工业出版社，2000：110.2黄玉政，成勇，柏亚军，等.人乳铁蛋白转基因小鼠杂交选育的研究〔J〕.动物医学进展，2007;28(6)：3943.3〕.北京：科学技术文献出版社，2007：3040.5CumberbatchM，DearmanRJ，UribeLun

7、aS,etal.RegulationofepidermalLangerhanscellmigrationbylactoferrin〔J〕.Immunology，2000;100(1)：218.6BezaultJ，BhimaniR，onittoCL，MinhasKM,etal.LactoferrindoiensE，ElyazidiI，MazurierJ,etal.LactoferrininhibitsG1cyclindependentkinasesduringgroanbreastcarcinoma〔J〕.JCellBiochem，

8、1999;74(3)：48698.9VaradhacharyA，otherapy〔J〕.IntJCancer，2004;111(3)：398403.10苏沛珠,黄泳.鼻咽癌转移相关分子标志物的研究进展〔J〕.中国现代