紫菜中藻胆蛋白的提取及纯化

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1、2005,Vol.26,No.11食品科学※工艺研究100紫菜中藻胆蛋白的提取及纯化杨方美，李华佳，胡秋辉(南京农业大学食品科技学院，江苏南京210095)摘要：紫菜经800W功率超声波作用800s，用30倍体积的水浸提得到藻胆蛋白的粗提物，再用饱和度为45%的硫酸铵盐析沉淀及透析后，经羟基磷灰石(HA)层析柱，用不同浓度的磷酸缓冲液梯度洗脱，可分离纯化出紫菜藻胆蛋白(含藻红蛋白和藻蓝蛋白)，两种活性组分的纯度(Amaxnm/A280nm)达到4.32。藻红蛋白的最大吸收峰在558nm，藻蓝蛋白的

2、最大吸收峰在616nm。关键词：紫菜；藻胆蛋白；提取；纯化ExtractionTechnologyofPhycobiliproteinDerivedfromLaverYANGFang-mei，LIHua-jia，HUQiu-hui(CollegeofFoodScienceandTechnology,NanjingAgriculturalUniversity,Nanjing210095,China)Abstract：Laverwasbrokenbyultrasonicationat800Wfor80

3、0sandextractedwithdeioned-waterat30volumes.Thecrudephycobiliproteinincludingphycoerythrimandphycocyaninwaspurifiedbyprecipitatingwithammoniumsulphateof45%anddialyzing.Thetwoactivefractionwerereceivedbyhydroxylapatite(HA)columnchromatography.Thepuritie

4、sofphycobiliproteinwasupto4.32.Thephycoerythrimandphycocyaninexhibitedmaximumabsorbtionat558nmand616nmrespectively.Keywords：laver；phycobiliprotein；extraction；purification中图分类号：S93文献标识码A文章编号：1002-6630(2005)11-0100-04藻胆蛋白是藻类藻胆体中的捕光色素蛋白，能把捕同时还是理想的天然色素，可大

5、量用于食品工业和化妆获的光能高效的传递给叶绿素，从而使海藻的光合作用品工业等，无毒副作用，是安全的添加剂[10]。得以发生。藻胆蛋白主要包括藻蓝蛋白(Phycocyanin)、目前我国对藻类开发利用的力度和深度还很小，大藻红蛋白(Phycoerythrim)和别藻蓝蛋白(Allphycocyanin)部分仅限于简单的食用，出口产品也只限于粗制品，还三类[1]，其中藻蓝蛋白(PC)和藻红蛋白(PE)在藻体中的含未应用高科技进行深层次的加工和利用。而藻类的一些量较为丰富。藻胆蛋白在藻类中的含量可以达到

6、细胞干高科技深加工产品则主要依靠进口，作为药物使用价格重的25%～28%[2]。十分昂贵。目前藻红蛋白的生产基本由美国Sigma公司藻胆蛋白是一种非常重要的光动力药物的原料，特的垄断，国内有以红毛菜、紫球藻和螺旋藻作为原料有的光敏效应可辅助激光治癌，在病灶部位富集，吸收提取藻红蛋白的报导，但仍处于研究阶段，未有成品光后高效产生自由基和活泼态氧，从而实现对肿瘤细胞进入市场销售。的杀伤。有光毒性而没有暗毒性，在人体内代谢快[3,4]。我国海域宽广，藻类资源十分丰富，是世界上最藻胆蛋白还具有抗氧化清除自

7、由基和提高免疫力的功效[2]大的紫菜生产大国，我国养殖和加工又主要集中在江苏[5]。其制作的免疫荧光标记抗体，检测灵敏度远远高于沿海，其产量占全国的95%以上。江苏省如东县条斑传统的荧光标记物，可用于特殊分子定位和重要分子检紫菜生产量占全国总量的50%。紫菜的市场价格是红毛测，包括SARS病毒的免疫分子检测，能准确地诊断肿菜的1/10，小球藻和螺旋藻的1/3。选用紫菜提取藻胆瘤、确定病变部位和病情轻重程度等[6～8]。藻胆蛋白可蛋白，具有成本低，得率高的优点。紫菜中的藻胆蛋作为功能因子用于保健食品

8、和功能食品及特殊饲料[9]，白其大部分主要是藻红蛋白(PE)，本实验采用超声波破收稿日期：2005-09-18基金项目：江苏省高技术研究计划资助项目(BG2003318)作者简介：杨方美(1963-)，女，副教授，研究方向为食品工程。※工艺研究食品科学2005,Vol.26,No.11101碎，硫酸铵沉淀和羟基磷灰石(HA)柱层析相结合的方白初提物。量取上清液体积，计算并称量相应饱和度质 法，以期找出从紫菜中分离提纯藻胆蛋白(主要是藻红蛋量的固体硫酸铵粉末(经用研钵磨细)，边搅拌边