棉秆蛋白的提取及分离纯化

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1、河南工业大学硕士学位论文棉秆蛋白的提取及分离纯化姓名：李金霞申请学位级别：硕士专业：农产品加工及贮藏工程指导教师：卞科20060501摘要本文采用不同的提取方法提取棉秆蛋白，对影响棉秆蛋白提取率的因素进行了研究，并对棉秆蛋白进行了分离纯化，采用凝胶过滤柱层析和SDS．PAGE对棉秆蛋白分子量的组成情况进行了初步了分析。棉秆粗蛋白的提取实验主要考虑的影响因素有：pH值、提取剂种类、提取剂浓度、提取温度、提取时间、提取剂体积等。实验中采用的提取方法有Na0H提取法、NaCI提取法、H。0提取法、超声波法、纤维素酶法

2、、表面活性剂法、AUC提取法、乙酸提取法。其中对NaOH提取法、NaCl提取法、}120提取法进行了正交试验，研究备方法对棉秆蛋白提取率的影响。结果表明，以NaoH为提取剂时，Na0H浓度为0．3％，提取温度50℃，提取时间120min，提取剂体积100ml，提取2次，棉秆蛋白提取率可达72．60％；以NaCI为提取剂时，NaCI浓度为0．8％，提取温度50"C，提取剂体积80ml，提取时间60min，提取2次，棉秆蛋白提取率达到52．03％；以H20为提取剂时，提取温度60℃，提取时间90min，提取剂体积9

3、0ml，提取2次，棉秆蛋白提取率达到49．50％。本实验采用碱性H。02法对NaOH提取的棉秆蛋白进行了脱色，研究结果表明，H20。添加量12％，pH值9，脱色时间45min，脱色温度45℃，蛋白得率为94．4l％，脱色后蛋白呈乳黄色。棉秆蛋白的凝胶过滤柱层析结果表明，上述三种方法提取的棉秆蛋白中不同分子量的蛋白所占比例不同。SDS．PAGE分析结果表明，棉秆蛋白亚基分子量主要分布在20，000Da以下，40，000Ds左右，90，000Da以上的三个分子量范围内，并且以分子量在40，000Da左右的一组蛋白亚

4、基所占比例最大，90，000Da以上次之，20，000Da以下最少。关键词：棉秆蛋白提取分离纯化ABSTRACTInthepresentpaper，differentmethodsforextractingcottonstalkproteinandthefactorsaffectingproteinextractionwereinvestigated．IsolationandpurificationofCOttOnstalkproteinwerealsodiscussed．Themolecularweightd

5、istributionofcottonstalkproteinwastestedbygelpermeationchromatographyandSDS—PAGEmethods．ThefactorsaffectingtheextractionofcottonstalkproteinwerethepHvalue，thekindofproteinextractingsolution，theconcentrateofproteinextractingsolution，extractingtemperature，extr

6、actingtimeandthevolumeofextractingsolution，etc．ManysolutionsforcottonstalkproteinextractingweretestedinthisstudyincludingNaOH,NaCl，H20，surfactant，AUC，aceticacid．othermethodssuchassupersonictreatment，eellulosetreatmentwerealSOtested．Theresultsindicatedthatthe

7、optimumextractionconditionwereNaOHconcentration20．3％，extractingtemperature250℃．extractingtime=120min,thevolumeofextractingsolution=100ml，extractingtimes22，theextractionrategotto72．60％，whenNaOHwasusedforthesolutionofcottonstalkproteinextraction；UsingNaCIforth

8、esolutionofcottonstalkproteinextraction，theoptimumextractionconditionwereNaClconcentration20．8％，extractingtemperature250℃，extractingtime=60min，thevolumeofextractingsolution=80ml，extractingtimes=