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时间:2018-11-18
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1、超声波法碱水提取叶下珠黄酮的研究论文刘榕城,胡炜,邓光辉,罗兆学,黄树坚,崔连艳【摘要】目的研究超声波法碱水提取叶下珠黄酮的工艺。方法以pH、处理时间、料液比为主要考察因素,以浸取样品中总黄酮的含量为主要考察指标,确定最佳提取条件。结果最佳提取工艺为:Ca(OH)2的pH值为11.freelin,料液比为1∶50。结论与传统的乙醇提取法进行对比显示,用超声波提取法具有快速、高效等特点。【关键词】超声波;叶下珠;黄酮Abstract:ObjectiveTodeterminetotalflavoneinPhyllanthusurinari
2、aL.byVISSpectrophotometry.MethodsUsingthecontentofflavoneasindexes,theeffectsofpH,extractiontime,ents.ResultsTheoptimumconditionsin,ethodofultrasonicextractionhasahigherextractionrateandefficiencythantraditionalethanolextraction.Keyg,用乙醇溶解并稀释至250ml,作为芦丁标准液。精确量取1,2,3,4,5
3、,6ml芦丁标准液,分别置于25ml容量瓶中,各加水至6ml,加5%亚硝酸钠溶液1ml,混匀,放置6min,加10%硝酸铝溶液1ml,混匀,放置6min,加氢氧化钠试液10ml,再加水至刻度,摇匀,放置15min,以试剂空白作参比,用1cm比色皿在500nm波长处测定吸光度。所得数据经回归处理,回归方程为Y=10.231A+0.0053,r=0.9993。芦丁浓度在0.020~1.212mg/ml范围内具良好的线性关系。1.2.2叶下珠中总黄酮含量测定将干燥剪碎的叶下珠5.0g置于索氏提取器中,加入300ml乙醇索氏提取3h,将提取液
4、过滤,残渣用乙醇洗涤3次,合并滤液,定容于250ml,放置2h后,离心沉淀20min。取上层清液1ml按亚硝酸钠-硝酸铝分光光度法测定吸光度,计算叶下珠中总黄酮含量为1.32%(即每100g叶下珠中含总黄酮1.32g)。1.2.3超声波碱水提取叶下珠中黄酮的方法称取5.0g剪碎的叶下珠于400ml烧杯中,按一定的料液比加入一定pH值的碱性Ca(OH)2溶液提取剂,浸泡24h,超声波提取一定时间后过滤,残渣用相应的提取剂洗涤3次,合并滤液,定容于250ml,放置2h后,离心沉淀20min,取上层清液1ml亚硝酸钠-硝酸铝分光光度法测定吸
5、光度,计算总黄酮提取率。2结果2.1提取剂对黄酮提取率的影响常温下,料液比1/40,分别用乙醇、水、碱性水溶液(pH=11)浸泡24h,超声波处理30min,结果表明,用碱性水溶液有较高的提取率。对比了Ca(OH)2和其他碱性水溶液,因为植物中的果胶、黏液和酸性多糖等水溶性物质能与Ca(OH)2中钙离子生成难溶于水的沉淀被除去,对黄酮的提取能够收到较好的效果。所有采用碱性Ca(OH)2溶液作为提取剂。2.2pH值对黄酮提取率的影响常温下,料液比1/40,不同pH值条件下,超声波处理30min。结果见图1。从图1可知,在pH为11时,有
6、较高的提取率。pH小于7,黄酮提取率较低。pH大于13,黄酮的母体产生裂解,提取率也大幅度降低。2.3超声波处理时间对黄酮提取率的影响常温下,pH为11的碱水液,料液比1/40,搅拌条件下做不同超声波处理时间对黄酮提取率的影响实验。结果见图2。提取时间在20~40min之间提取率随时间的延长而提高,40min后逐渐趋于平衡。2.4超声波处理正交实验结果与最佳提取条件的确定为了获得以碱性Ca(OH)2溶液作为提取剂时,超声波提取叶下珠中黄酮的最佳工艺条件,利用正交法“均衡分散”的特点,以不同的pH,不同的处理时间,不同的料液比为主要考察
7、因素,以浸取样品中总黄酮的提取率为主要考察指标,确定最佳提取条件。表1正交因子水平(略)按表1的正交因子水平设计L9(34)正交实验,实验设计与结果见表2。表2正交实验方案及实验结果(略)从表2的正交实验数据及计算结果可知,极差值反映的因子影响顺序为ACB,pH对提取率影响最大,其次是料液比,超声波提取时间的影响最小。对于A因素有K3K2K1,对于B因素有K2=K3K1,对于C因素有K3K2K1,由此可确定最佳条件为A3B2C3,即pH为11,料液比为1/50,超声波作用时间40min。按A3B2C3条件进行3次平行实验。结果见表3。
8、表3A3B2C3条件时超声波作用下黄酮提取率(略)由表3知:A3B2C3条件下黄酮提取率确实高于表2中每一项实验结果,A3B2C3为最佳选择。2.5超声波提取法与常规索氏提取法的比较A3B2C3优化条件下超声波提取与传统
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