超声波法碱水提取叶下珠黄酮的研究

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1、超声波法碱水提取叶下珠黄酮的研究作者：刘榕城，胡炜，邓光辉，罗兆学，黄树坚，崔连艳【摘要】　　目的研究超声波法碱水提取叶下珠黄酮的工艺。方法以pH、处理时间、料液比为主要考察因素，以浸取样品中总黄酮的含量为主要考察指标，确定最佳提取条件。结果最佳提取工艺为：Ca(OH)2的pH值为11，超声波提取时间为40min，料液比为1∶50。结论与传统的乙醇提取法进行对比显示，用超声波提取法具有快速、高效等特点。【关键词】超声波；叶下珠；黄酮Abstract：ObjectiveTodeterminetotalflavo

2、neinPhyllanthusurinariaL.byVISSpectrophotometry.MethodsUsingthecontentofflavoneasindexes,theeffectsofpH,extractiontime,w/vwereevaluatedbyorthogonalexperiments.ResultsTheoptimumconditionswereasfollows:pH=11,0min,w/v=1/40.ConclusionThemethodofultrasonicextrac

3、tionhasahigherextractionrateandefficiencythantraditionalethanolextraction.Keywords：Ultrasonicwaves;PhyllanthusurinariaL.;Flavone　　叶下珠(别名珍珠草)为大戟科叶下珠属中的一种草本植物，具有清肝明目、解毒消肿的功效，常用于治疗腹泻下痢、尿路感染、小儿疳积、肝炎、肾炎等疾病［1］。叶下珠中含有多种黄酮类化合物。黄酮类成分有降压、降血脂、增加冠脉流量、强心、抗心律不齐等药理作用［2］。目

4、前对中草药中黄酮成分的提取广泛使用的乙醇提取法，采用索氏提取器回流提取［3］。但此方法存在提取温度较高、提取时间长、得率不高等缺点。超声技术应用于提取叶下珠中黄酮的研究尚未见报道。本文在超声波条件下，采用正交实验设计考察了碱性水溶液提取叶下珠中黄酮的提取工艺。1材料与方法材料与仪器JP600型变辐杆式超声波萃取器；916型紫外-可见分光光度计，离心沉淀器，分析天平，循环水式多用真空泵。叶下珠购自广西南宁。芸香叶苷即芦丁。1.方法芦丁标准曲线的绘制采用亚硝酸钠-硝酸铝分光光度法［4］。精密称取芦丁，用乙醇溶解并

5、稀释至250ml，作为芦丁标准液。精确量取1，2，3，4，5，ml芦丁标准液，分别置于2ml容量瓶中，各加水至ml，加5%亚硝酸钠溶液1ml，混匀,放置6min，加10%硝酸铝溶液1ml，混匀，放置min，加氢氧化钠试液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置1min，以试剂空白作参比，用1cm比色皿在500nm波长处测定吸光度。所得数据经回归处理，回归方程为Y=+，r=。芦丁浓度在～/ml范围内具良好的线性关系。叶下珠中总黄酮含量测定将干燥剪碎的叶下珠g置于索氏提取器中，加入300ml乙醇索氏提取h，将提取液过滤

6、，残渣用乙醇洗涤3次，合并滤液，定容于250ml，放置h后，离心沉淀20min。取上层清液1ml按亚硝酸钠-硝酸铝分光光度法测定吸光度，计算叶下珠中总黄酮含量为%(即每100g叶下珠中含总黄酮)。超声波碱水提取叶下珠中黄酮的方法称取g剪碎的叶下珠于400ml烧杯中，按一定的料液比加入一定pH值的碱性Ca(OH)2溶液提取剂，浸泡2h，超声波提取一定时间后过滤，残渣用相应的提取剂洗涤3次，合并滤液，定容于250ml，放置h后，离心沉淀20min，取上层清液1ml亚硝酸钠-硝酸铝分光光度法测定吸光度，计算总黄酮提

7、取率。结果.1提取剂对黄酮提取率的影响常温下，料液比1/40，分别用乙醇、水、碱性水溶液浸泡2h，超声波处理30min，结果表明，用碱性水溶液有较高的提取率。对比了Ca(OH)2和其他碱性水溶液，因为植物中的果胶、黏液和酸性多糖等水溶性物质能与Ca(OH)2中钙离子生成难溶于水的沉淀被除去，对黄酮的提取能够收到较好的效果。所有采用碱性Ca(OH)2溶液作为提取剂。.pH值对黄酮提取率的影响常温下，料液比1/40，不同pH值条件下，超声波处理30min。结果见图1。从图1可知，在pH为11时，有较高的提取率。p

8、H小于7，黄酮提取率较低。pH大于13，黄酮的母体产生裂解，提取率也大幅度降低。.3超声波处理时间对黄酮提取率的影响常温下，pH为11的碱水液，料液比1/40，搅拌条件下做不同超声波处理时间对黄酮提取率的影响实验。结果见图2。提取时间在20～40min之间提取率随时间的延长而提高，40min后逐渐趋于平衡。.4超声波处理正交实验结果与最佳提取条件的确定为了获得以碱性Ca(OH)2溶液作为提取剂时，超