超声波提取紫苏叶中黄酮工艺的研究

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1、超声波提取紫苏叶中黄酮工艺的研究　　摘要：以干紫苏叶为原料采用超声提取法，提取紫苏叶中黄酮类化合物。通过超声时间、超声水浴温度、乙醇浓度以及料液比对提取率的影响因素进行单因素分析，择较优结果进行正交试验，确定超声波提取紫苏叶中黄酮类化合物的最优条件。结果表明：超声波提取紫苏叶中黄酮最佳提取工艺是料液比为1∶50，乙醇浓度为60%，水浴温度在40℃，超声提取时间为40min。　　关键词：紫苏叶；黄酮；超声波；提取方法　　中图分类号：G642.0文献标志码：A文章编号：1674-9324（2016）38-0066-02　　紫苏，别名：桂荏、白苏

2、、赤苏等；为唇形科一年生草本植物。在中国种植应用约有近2000年的历史，主要用于药用、油用、香料、食用等方面，其叶（苏叶）、梗（苏梗）、果（苏子）均可入药，嫩叶可生食、作汤，茎叶可腌渍。　　紫苏叶中含有蛋白质、黄酮类、挥发油、色素等化学成分。黄酮类化合物，又名生物类黄酮化合物，是一类重要的天然有机化合物，是植物在长期自然选择过程中产生的一类次生代谢产物，它具有多种生物活性和药理作用，如防癌抗癌、抗肿瘤、抗心血管疾病、抗骨质疏松、消除自由基和抗氧化活性、雌激素样与抗雌激素样作用、对酒精中毒的解毒作用和治疗酒依赖的作用等。5　　黄酮类化合物的提

3、取方法主要有：索氏提取法、有机溶剂提取法、超声波提取法、微波提取法、超临界提取法、酶辅助提取法、碱性水或碱性稀醇提取法等。本实验采用超声法提取法，分析超声波提取紫苏叶中黄酮类化合物的最优条件。　　一、材料与方法　　1.试验材料。（1）材料与试剂。紫苏叶、芦丁标准品、无水乙醇、亚硝酸钠（NaNO2）、硝酸铝（Al（NO3）3）、氢氧化钠（NaOH），以上所用试剂均为分析纯。（2）主要仪器。DMF-10A500g摇摆式高速万能粉碎机、国家标准检验筛20目、GZX-9240MBE数显鼓风干燥箱、UV--2450紫外分光光度计、电子分析天平（万分之

4、一）、HH-300E型超声波清洗器、一次性使用无菌注射器。5　　2.试验方法。（1）黄酮含量标准曲线的绘制方法。以芦丁为对照品，精密称取芦丁标准品50mg置于50mL容量瓶中，用30%乙醇定容至刻度，摇匀制得浓度为1.0mg/mL芦丁标准液。分别取标准液0、2.5、5、7.5、10.0、12.5、15.0、17.5mL于6支50mL的容量瓶中，用30%乙醇补充至15mL，加入0.75mL5%NaNO2（v/v），摇匀，放置6min后加入0.75mL10%Al（NO3）3（v/v），摇匀，放置6min后再加入5mL1mol/LNaOH，混匀，

5、用30%乙醇定容至刻度，10min后于波长370nm处测定吸光度值A，参比溶液为空白试剂。（2）超声波提取试验。精密称取1g的紫苏叶粉末于100mL锥形瓶中，加入一定量的乙醇溶液，一定温度下超声一段时间。提取结束后将锥形瓶中的溶液过滤，得单因素紫苏提取液。计算提取率，分别考察超声提取时间，超声提取温度，超声提取乙醇浓度，超声提取料液比，对黄酮提取率的影响。选择提取效率较优三组结果进行L9（34）正交试验。　　二、结果分析　　1.线性回归方程的建立。以芦丁标准品含量（C）（mg/ml）为横坐标，以光度值（A）为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程

6、A=0.05026C+0.01236（R2=0.9994）在0.141～0.889（mg/ml）成线性关系。　　2.超声提取时间对黄酮提取率影响。精密称取1.0g紫苏叶粉末于100ml容量瓶，加入浓度为50%乙醇溶液40ml，60℃超声分别提取20、30、40、50、60、70min，趁热过45μm微孔滤膜，得到各滤液。分别精密吸取0.5ml滤液至于50ml容量瓶，加入1.5mL5%NaNO2（v/v），摇匀，放置6min后加入1.5mL10%Al（NO3）3（v/v），摇匀，放置6min后再加入10mL1mol/LNaOH，混匀用30%乙

7、醇定容至刻度（即稀释100倍），15min后于波长370nm处测定吸光度值，计算提取率。由试验结果得知，提取率随提取时间的变化为先增大后减小，提取效率较高的时间为30、40、50、min，其中时间为40min时提取效率最高　　3.超声提取温度对黄酮提取率影响。精密称取1.0g紫苏叶粉末于100ml容量瓶，加入浓度为50%乙醇溶液40ml，分别至于30、40、50、60、70、80℃水中，超声处理40min，趁热过45μm微孔滤膜，分别精密吸取0.5ml滤液至于50ml容量瓶，加入1.5mL5%NaNO2（v/v），摇匀，放置6min后加入1

8、.5mL10%Al（NO3）3（v/v），摇匀，放置6min后再加入10mL1mol/LNaOH，混匀用30%乙醇定容至刻度（即稀释100倍），15min后于波长370nm处测定