麻黄中总黄酮和多糖的超声提取与含量测定论文

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1、麻黄中总黄酮和多糖的超声提取与含量测定论文【关键词】超声技术;,,麻黄;,,总黄酮;,,多糖;,,提取;,,含量测定摘要:目的:从麻黄中提取总黄酮和多糖,并测定其含量。方法:运用超声技术提取麻黄总黄酮和多糖,用比色法测定总黄酮和多糖含量。结果:测得麻黄中总黄酮含量为6.64%,平均回收率为100.6%,相对标准偏差(RSD)为1.34%(n=5);多糖含量为4.83%,平均回收率为99.58%,相对标准偏差(RSD)为1.02%(n=5)。结论:运用超声技术从麻黄中联合提取总黄酮和多糖,反应速度加快.freelinationofTotalFlavonoi

2、dsandPolysaccharidesinEphedrasinicaAbstract:Objective:ToextractanddeterminetotalflavonoidsandpolysaccharidesinEphedrasinica.Methods:TotalflavonoidsandpolysaccharidesinEphedrasinicainedbycolorimetry;Results:TotalflavonoidsinEphedrasinicaination麻黄为麻黄种植物草麻黄EphedrasinicaStapf、中麻黄Ephe

3、draintermediaSchrenketC.A.Meg.或木贼麻黄EphedraequisetinaBge.的干燥草质茎,是临床常用的发汗解表药。其性温,味辛、微苦,具有发汗散寒、宣肺平喘、利水消肿之功效,主要用于风寒感冒、胸闷喘咳、风水浮肿、支气管哮喘等症[1]。据报道麻黄水溶性多糖具有清除O-2的作用[2]。超声技术的应用,近年来得到很大发展。超声具有穿透力强、选择性高等特点。超声技术可以大大加快反应速度,缩短反应时间[3]。超声技术应用于植物细胞破壁,有效地提高了收率[4]。我们运用超声技术联合提取麻黄中总黄酮和多糖,以芦丁为对照品测定麻黄中总

4、黄酮含量,加入铝离子试剂,同时控制适宜pH值,使黄酮化合物与铝盐形成配合物在可见光区能获得稳定的特征吸收峰。运用超声技术水提醇沉法制得麻黄粗多糖,并采用酚-硫酸比色法对其多糖含量进行测定[5]。反应速度加快,实验结果令人满意,为麻黄总黄酮和多糖的研究和开发利用奠定了基础。1仪器、样品及试剂UV-2401型分光光度计(日本岛津),DL-360超声波仪(35kHz,浙江宁波市象山县石浦海天电子仪器厂)。对照品芦丁购自中国药品生物制品检定所,其余试剂均为分析纯。麻黄购自石河子中药店,粉碎后备用。2方法与结果2.1样品溶液制备精密称取麻黄粉末2g置于碘量瓶中,用

5、80%乙醇超声提取两次,提取时间40min/次,提尽黄酮。另用少量80%乙醇多次洗涤麻黄,并入提取液中,定量转移入100ml容量瓶中,用80%乙醇定容至刻度,摇匀,即得测总黄酮之麻黄样品液。将提尽黄酮后的麻黄置于锥形瓶中,用80%乙醇超声提取40min,以除去单糖及一些苷类,弃提取液。麻黄挥干乙醇后,继续以水超声提取2次(40min/次),减压抽滤,各次滤液合并。水浴浓缩后,用蒸馏水定容至250ml,即为测多糖的麻黄样品液。2.2总黄酮含量的测定2.2.1标准曲线制备精密称取芦丁对照品10mg,置25ml容量瓶中,加80%乙醇溶解,定容,精密吸取0,0.

6、2,0.4,0.6,0.8,1.0ml,分置于10ml容量瓶中,加5%亚硝酸钠0.3ml,放置6min,再加10%硝酸铝0.3ml,放置6min,加4%氢氧化钠4ml,加水至刻度,摇匀。进行全波长扫描,在510nm处均有最大吸收。以510mn处测得的吸收度A对浓度C回归,得回归方程:A=11.225C+0.0027,r=0.99913,在8~40μg/ml的范围内,浓度与吸收度有良好的线性关系。2.2.2样品测定分别将测总黄酮之各样品液定量稀释5倍后,再精密吸取各稀释液适量于10ml容量瓶中,照标准曲线制定项下方法操作,测定吸收度,由回归方程求出稀释液中

7、总黄酮浓度,然后计算百分含量。结果见表1。表1麻黄中总黄酮和多糖含量(略)2.2.3稳定性实验按样品测定方法操作,测定同一供试液在不同时间吸收度。结果表明,吸收度值在24h内基本不变,因此测定应控制在24h内完成。2.2.4回收率实验取已知总黄酮含量的供试品溶液1.0ml于10ml容量瓶中,再加入0.2mg/ml的芦丁对照品溶液0.5ml,依法测定,结果平均回收率为100.6%,RSD=1.34%(n=5)。2.3多糖含量测定2.3.1标准葡萄糖溶液的配制精密称取干燥恒重的葡萄糖25.2mg,加适量水溶解,转移至250ml容量瓶中,加水至刻度,摇匀,配成

8、浓度为100.8μgml-1标准葡萄糖溶液备用。2.3.25%苯酚试剂的配制取苯

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