漏芦提取物对四氯化碳致肝纤维化大鼠sod,mda

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1、漏芦提取物对四氯化碳致肝纤维化大鼠SOD,MDA【摘要】目的观察漏芦提取物对四氯化碳致肝纤维化大鼠超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)及α平滑肌肌动蛋白(αSMA)表达的影响。方法50只雄性大鼠随机分为正常组、模型组、给药组和秋水仙碱组,并以灌胃的方式给药,比色分析法测血清SOD活性和MDA含量,同步。观察漏芦提取物对四氯化碳致肝纤维化大鼠肝病理组织学的影响。结果漏芦给药组肝纤维化指标SOD活性明显高于模型组(P<0.05),血清MDA含量较模型组明显降低;αSMA表达明显低于模型组。结论漏芦提取物对四氯化碳致肝纤维化大鼠有一定的保护作用。【关键词】漏芦肝纤维化大鼠  Ef

2、fectofRadixRhaponticalExtractonSOD,MDAandαSMAinRatsaleratsal,model,RadixRhaponticalandcolchicingroup.TheactivityofSODandthecontentofMDAetricmeasurement.DegreesoffibrosisandαSMAinedbyhistopathologyundermicroscope.ResultsTheactivityofSODodelgroup.ConclusionRadixRhaponticalExtractisabletoprotectliver

3、fibrosisinducedbyCCl4inrats.  Keyl含有4g生药。  1.1.2试剂秋水仙碱,Serva公司产品;SOD,MDA试剂盒为南京建成生物工程研究所产品;α平滑肌肌动蛋白试剂盒为天津TBD生物技术有限公司产品。  1.1.3动物DA的含量,天狼猩红染色观察α平滑肌肌动蛋白的表达。取肝左叶,10%福尔马林固定,石蜡包埋,5μm连续切片,HE染色,观察组织学变化,将肝纤维化分为0~4级[1],0级:无纤维化;Ⅰ级:纤维结缔组织仅局限于汇管区或汇管区扩大有向小叶发展的趋势;Ⅱ级:纤维结缔组织增生进入肝小叶2/3并有Ⅰ级同样的改变;Ⅲ级:纤维结缔组织进入肝小叶达中央静脉

4、周围;Ⅳ级纤维结缔组织在全小叶多处弥漫性增生,假小叶形成并有Ⅲ级同样改变。  1.3统计学处理肝纤维化分级结果比较采用等级资料的秩和检验,两组比较采用t检验。  2结果  2.1一般情况模型组大鼠毛质粗糙,消瘦,厌食,精神萎靡,动作迟钝,死亡4只;漏芦给药组、秋水仙碱组大鼠体重与正常组无明显差别,毛质光滑,进食良好,活泼好动,其中漏芦给药组死亡4只,秋水仙碱组死亡3只。  2.2各组大鼠肝组织病理变化模型组肝细胞有广泛的点状坏死,伴炎症细胞浸润,肝细胞增生较为明显,汇管区结缔组织增生。秋水仙碱组、漏芦给药组变化类似。其肝细胞呈点状坏死,炎症细胞浸润轻于模型组。结果见表1。表1各组大鼠组织学变

5、化(略)  2.3各组大鼠血清SOD,MDA的变化结果见表2。模型组SOD活性下降,MDA含量升高,而漏芦给药组SOD活性升高、MDA含量下降,但秋水仙碱组无明显变化。  2.4各组大鼠肝组织α平滑肌肌动蛋白染色检测结果正常组肝实质未见阳性反应;模型组肝组织纤维增粗,汇管区胶原纤维增生较多;而秋水仙碱组、用药组大鼠肝组织仅在汇管区及纤细的纤维隔处呈少量的阳性反应,明显少于模型组。表2各组大鼠血清SOD活性、MDA含量的变化(略)  3讨论肝纤维化是慢性肝病的基本病理特征,也是进一步向肝硬化发展的主要中间环节,其特征为肝脏细胞外基质大量沉积。近年来研究认为[2],当肝脏受到物理、化学及生物因

6、素的刺激时,肝星状细胞(HSC)增殖并激活,转变为肌成纤维细胞(MFB),通过旁分泌和自分泌作用,合成大量的细胞外基质,并表达α平滑肌肌动蛋白(αSMA)。因此,αSMA被认为是激活的MFB的特征性标记物。现已知,秋水仙碱是有效的抗纤维化药物,可抑制微管蛋白的合成,体外能刺激胶原酶的合成,促进胶原分解。实验表明,漏芦给药组αSMA表达较模型组明显减轻,与秋水仙碱组相似,提示漏芦有良好的抗肝纤维化的作用,其机制可能与抑制HSC的活化有关。CCl4是目前诱导发生肝纤维化的常见化学毒物,自由基及其引发的脂质过氧化是其引起肝损伤肝纤维化的主要机制。活性氧、超氧阴离子在体内产生的自由基通过脂质

7、过氧化损伤破坏肝细胞,产生脂质过氧化物直接刺激或通过肝细胞、枯否氏细胞、内皮细胞等旁分泌刺激HSC使其活化。脂质过氧化肝脏炎症损伤是发展至肝纤维化的桥梁。SOD为高效清道夫,可抑制自由基启动的脂质过氧化,其变化可间接反应疾病情况下自由基的变化。MDA是脂质过氧化的最终产物,可严重破坏细胞膜的结构,导致细胞肿胀,坏死,其含量反映了组织过氧化的损伤程度。本次研究结果显示,漏芦给药组SOD活性与模型组比较明显升高,

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