针药结合对四氯化碳致大鼠肝纤维化的影响

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1、针药结合对四氯化碳致大鼠肝纤维化的影响【】R285.5【】A【】1672－3783(2011)11－0003－01　　　　【】目的：本研究以四氯化碳诱导形成肝纤维化模型，首次将针刺的治疗方法与药物姜黄素结合用于肝纤维化的治疗，探讨二者之间是否具有协同作用，其成果将为临床提供更加有效治疗策略，也将为临床肝纤维化的治疗提供新的思路和切入点.方法：采用CCl4造模方法制作大鼠肝纤维化模型，通过使用针刺太冲、期门、肝枢，以及电针足三里，联合姜黄素给药的方法进行联合治疗，同时设空白对照组、模型组、单用针刺组、非穴位对照组、单用姜黄素给药

2、组作用对照分别进行干预。造模干预结束后使用生化仪法检测各组大鼠血清中ALP、ALT、AST含量，并使用ELISA方法检测大鼠血清中HA、LN、PCⅢ的含量。并且通过大鼠病理组织切片，观察针药结合对大鼠肝纤维化的抑制作用。结果：针刺组、姜黄组、针药结合组均能有效的降低大鼠的肝纤维化指标，而相比单用针刺和单用姜黄素组，针药结合体现了明显的治疗优势。　　【关键词】肝纤维化；姜黄素；针药结合；四氯化碳　　　　1材料与方法　　1.1主要药物与试剂:清洁级SD大鼠，上海斯莱克公司(许可证号：SCXK(沪)2007-0005)　　姜黄素，分

3、析纯，上海国药集团化学试剂有限公司（批号：F20050102）　　CCl4，橄榄油，天津市北宏试剂厂　　G6805-A型电针治疗仪，上海医疗仪器厂　　半自动生化仪，北京中生北控生物科技股份有限公司　　ELISA试剂盒，上海朗顿生物技术中心　　1.2动物分组与造模:清洁级SD大鼠70只，雄性，体重（200±20）g，给与标准的光照周期（14小时光照、10小时黑夜），室内温度（25℃）湿度(50±10)%,标准饲料,高压灭菌垫料和饮水,适应性饲养1星期。随机分为6组:正常组10只、模型组12只、穴位针刺组12只、非穴位针刺组12只

4、、姜黄素治疗组12只、穴位针刺联合姜黄素治疗组12只。　　将CCl4制成50%橄榄油剂，按lml/kg体重在每只大鼠腹腔注射，第一周三次，第二周后每周二次，同时喂以10%的酒精饮料，共六周。除正常组（腹腔注射相同体积生理盐水）外，余组均同步予以造模。　　1.3治疗方法:穴位针刺组：前三周每周三次，后三周每周两次。固定大鼠，取双侧肝俞、太冲、期门、足三里穴(根据中国针灸学会实验针灸研究会制定的“动物针灸穴位图谱”)，以36号1寸美容针刺入约0.5寸，每穴行捻转补法1分钟，然后双足三里穴接通G一6805电针仪，采用连续波，强度以大

5、鼠双后肢足趾轻微颤动为度，但能使动物不挣扎嘶叫，保持安静为度，通电刺激时间为10分钟。　　非穴位针刺对照组：上述各穴向左侧平移0.5cm处，按穴位针刺组类似方式处理。　　姜黄素治疗组：每日治疗1次，一周6日，灌胃给药姜黄素200mg/kg，共6周。　　针药结合组：按上述方式同时给予针刺和姜黄素处理。　　模型组：每日1次，一周6日，灌胃按姜黄素给药体积的生理盐水，共6周。以上各组治疗均与造模同步进行。　　1.4指标检测:治疗与造模结束后，将所有的大鼠通过颈总动脉取血，离心后分离血清，使用半自动生化仪检测大鼠谷草转氨酶（ALP）、

6、谷丙转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（AST）含量,使用ELISA试剂盒检测大鼠血清透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、三型前胶原（PCⅢ）的含量。　　2结果　　2.1大鼠肝纤维化动物模型建立情况:与正常组大鼠比较，造模大鼠活动力较差，运动不积极，毛色欠光滑。正常对照组老鼠10只，存活率为100％；模型组12只，存活率100％；针刺组12只，死亡3只，存活率75％；非穴位针刺组12只，死亡1只，存活率92％；姜黄素治疗组12只，死亡1只，存活率92％；穴位针刺联合姜黄素治疗组12只，死亡2只，存活率83％。　　肝脏肉眼观呈褐绿色

7、或棕色，表面略呈细颗粒状。组织病理学，在实验早期，大鼠肝脏肝血窦扩张充血，炎细胞浸润伴肝细胞灶性坏死，中期时肝细胞肿胀变性，空泡样改变，汇管区纤维组织增生，造模6周肝细胞大量变性坏死，间质纤维组织增生，纤维间隔形成，假小叶形成，胶原纤维沉积明显增加,肝实质结构紊乱.　　2.2针药结合对大鼠肝指数的影响:治疗与造模结束后，分离大鼠的肝组织并称重。结果显示：模型组肝指数较正常组都有明显的增加（P0.05），但从均数来看，针药结合组比其他各组均低。结果提示针刺、姜黄素、针药结合均对大鼠肝指数有一定的改善作用，其中针药结合组优于单纯给

8、予针刺、姜黄素组。　　3讨论　　肝纤维化是各种慢性肝病病理学的共同基础,而肝纤维化动物模型的复制是研究肝纤维化的前提之一,既可以深入研究其发病机理,又可以为临床筛选防治肝纤维化药物，对肝纤维化进行早期诊断和治疗。本次实验采用CCL4造模，成功率较高，经济型较好。　　据以往的研