舒督丸提取工艺研究论文

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1、舒督丸提取工艺研究论文【摘要】目的优选研究舒督丸的提取溶剂和提取工艺条件。方法用小鼠醋酸扭体法比较方剂水提物、乙醇提物的镇痛作用强度，优选提取溶剂；以柚皮苷提取率和水总浸出物提取率为评价指标，对提取工艺进行正交试验，优选合理的提取工艺参数。结果以水为提取溶剂其镇痛作用最显著。最佳提取工艺条件是提取4次，每次提取时间分别为3，2，1，1h.freelethodonmiceizethereasonableextractionconditionsarkerssuchasnaringinextractionratean

2、doresignificant.Theextractionconditionsedicalmaterialeses,3，2，1，1hoursforeachtime.ConclusionTheextractionconditionsestablishedcanmaketheextractionrateofactiveponentshighandmakethetherapyandqualityoptimal.Keyl的流浸膏，密封，灭菌，备用。2.1.2药效试验取小鼠60只，雌雄各半，随机分组，灌胃给药，用醋酸扭体

3、法比较不同溶剂提取物的镇痛效果［4］。结果见表1。表1舒督丸不同溶剂提取物对小鼠疼痛的抑制作用（略）药效试验结果显示，舒督丸不同溶剂提取物均可抑制小鼠疼痛，其中以水提物镇痛效果最好。因此，确定以水为提取溶剂。2.2提取工艺因素的优选2.2.1柚皮苷的含量测定方法［5］2.2.1.1色谱条件ZOPBOXISBC18（4.6mm×200mm，5μm）色谱柱；流动相甲醇醋酸水（35∶4∶65）；检测波长283nm。2.2.1.2对照品溶液的制备精密称取柚皮苷对照品20mg，甲醇定溶于100ml量瓶中，精密量取3m

4、l，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得（每毫升含柚皮苷60μg）。2.2.1.3供试品溶液的制备与测定取含相当于骨碎补0.3g的提取液，稀硫酸调pH值3～4,水浴蒸干，加甲醇溶解并转移至10ml量瓶中至刻度，摇匀，即得供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl,注入液相色谱仪,.freel处测定并计算柚皮苷含量，计算提取率。2.2.2水总浸出物的测定方法分别精密量取水提药液各25ml，按浸出物测定法（《中国药典》2005年版Ⅰ部附录XA）操作，以25ml提取液相当于原药材量作为分母，以干燥品

5、计算供试品中水溶性浸出物的浸出率。2.2.3提取工艺因素与水平的正交实验选择加水量、提取时间和提取次数3个因素，每个因素选择3个水平，见表2。用L9（34）正交表进行正交实验设计。表2实验因素水平表（略）取复方饮片9份，每份354g，按表3正交表设计方案进行回流煎煮提取，合并提取液，滤过，吸取药液适量，测定柚皮苷含量和水总浸出物量，计算提取率，见表3。表3舒督丸提取工艺正交实验方案与结果（略）2.2.4舒督丸提取工艺因素的正交试验结果与分析结果见表3～4。表4舒督丸提取工艺正交试验结果方差分析（略）由综合评分直

6、观分析可知，上述因素中，B因素影响最明显，应取3水平；C因素次之，应取3水平；A因素应取2水平。由上表可看出，显著影响提取效率的工艺因素是B。取重要因素较高水平的组合，得到最佳工艺条件为：A2B3C3。即提取4次，每次分别为3，2，1，1h，每次加水量分别为6，4，4，2倍。2.3验证实验取复方饮片，按最佳工艺条件重复提取3次，测定柚皮苷和水总浸出物得率。结果见表5。表5验证实验结果（略）从上述试验结果可以看出:所筛选出来的工艺合理可行,稳定可靠,具有可操作性和重现性。3讨论3.1舒督丸方剂中有效成分既有水溶性

7、，也有脂溶性的，理论上既需要用亲脂性溶剂也需要用水提取，才能使有效成分充分溶出。但是复方中各药材成分间在提取时往往会发生复杂的相互作用，从而使有效成分溶解度及存在状态发生变化影响到药效。因此，采用药效学方法筛选提取溶剂,与常规的化学法相比,其筛选结果与临床用药效果更为接近。本实验以小鼠醋酸扭体法比较该方剂水和乙醇为溶剂的提取物的镇痛效果，结果表明以水为溶剂效果优于乙醇，与该药原配制用溶剂产生的疗效一致。3.2由药材成分浸出原理可知，溶剂对药材的浸润与渗透、溶解与解吸和成分扩散置换过程，在第1次提取即已经完成，后

8、续的多次提取，主要是更换溶剂，保持浓度差。所以，在本研究中，每个煎煮时间和加水量水平设计为依次递减。结果证明优化出的提取工艺参数可以使有效成分达到较高的提取率，节省了大量的工时，降低了水和能耗。3.3在柚皮苷含量测定时发现复方提取物中柚皮苷提取率很低，与其溶解性能不符。通过对方中骨碎补与其他药材两两配伍提取实验发现，是由于其与桑寄生中某成分形成了水溶性络合物，影响了柚皮苷的含量测定。实