二精丸提取工艺的实验研究

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1、二精丸提取工艺的实验研究作者：喇孝瑾，白素芬，刘倩，喇万英【摘要】　　目的优选二精丸的提取工艺。方法采用水提醇沉法，以浸膏得率和多糖含量为指标，用正交实验法优选工艺条件。结果最佳条件为：药材脱脂后，加10倍量水于80℃水浴中温浸3次，每次2h，离心(3000r·min-1)20min，合并上清液。加入乙醇使含醇量为80%。结论优选工艺稳定，安全，简便易行。【关键词】二精丸；正交实验；提取工艺；水提醇沉　　Abstract：ObjectiveToestablishtheoptimalextractiontechnologyofErjingPill.Meth

2、odsOrthogonaltestdesignwasadoptedaccordingtotheextractiverateandcontentofPolysaccharides.ResultsTheoptimalextractionprocesswasasfollows:10foldofwatermarinated0.5h,immersed3timesand2heachtimeinwaterbathat80℃.Precipitatingconcentrationofalcoholwas80%.ConclusionTheoptimaltechnologyo

3、fErjingPillissimple,stableandeffective.　　Keywords：ErjingPill；Orthogonaltest；Extraction7technology；Waterextractionandalcoholprecipitation　　二精丸出自《奇效良方卷之二十一·诸虚门》，由黄精，枸杞子组成，又名枸杞丸（《奇效良方卷之三十四·遗精白浊门》），补精气。“常服助气益精，补填丹田，活血驻颜，长生不老”［1］。现代研究发现枸杞多糖是枸杞子中的重要活性成分,具有调节机体免疫力［2］,延缓衰老［3］和降血糖［4］等药理作用

4、。黄精具有增强免疫、降低血脂、血糖和延缓衰老等多种药理作用，其中黄精多糖是黄精重要的有效成分，具有极其重要的生物功能［5］。笔者经研究发现，二精丸多糖具有较好的降血糖作用。本实验采用正交实验法，以二精丸多糖含量为指标成分，对二精丸多糖的提取工艺进行研究，筛选最佳提取工艺。　　1仪器与试药　　1.1仪器722分光光度计、数显恒温水浴锅、电子天平、循环水真空泵、真空干燥箱、离心机、双极旋片式真空泵、高速药物粉碎机。　　1.2试药葡萄糖对照品（中国药品生物制品检定所）；95%乙醇、浓硫酸、苯酚（重蒸）均为分析纯；水为双蒸水。枸杞、黄精购自唐山医药公司，经我院喇

5、万英教授鉴定分别为宁夏枸杞Lycium7barbarumL.的干燥成熟果实，百合科植物黄精PolygomatumsibiricumRed.的干燥根茎。　　2方法与结果　　　2.1水提工艺条件的优选　　2.1.1正交实验设计根据二精丸组方功效和生产实际要求，拟定影响浸出效果的3个主要因素A(水浸时间)，B（水浴温度），C（提取次数）为优选因素，每个因素3个水平进行L9(34)正交实验。正交设计见表1。以处方比例称取烘干后粉碎的药材20g，混匀，脱脂。室温下加95%乙醇100ml浸泡0.5h，加热回流1h，过滤，残渣加100ml80%乙醇回流1h，过滤。按表

6、1设计的工艺条件，加入10倍量水于水浴中温浸，离心(3000r·min-1)20min，残渣继续加10倍量水于水浴中温浸，离心，合并上清液。表1正交实验因素水平（略）　　2.1.2浸膏得率测定精密吸取水提液10ml置于已称重的蒸发皿中，水浴蒸干，105℃真空干燥3h，置干燥器中，冷却至室温后，迅速精密称重，计算浸膏得率。结果见表2。表2二精丸多糖正交实验结果（略）　　2.1.3多糖含量测定7　　对照品溶液的配制：精密称取经105℃干燥至恒重的无水葡萄糖对照品3mg，置10ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，配制成每毫升中含无水葡萄糖0.3mg的对照品

7、溶液。　　标准曲线的制备：精密量取对照品溶液0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1ml，分别置10ml具塞刻度试管中，各加水至2.0ml，摇匀，在冰水浴中缓慢滴加0.2%蒽酮-硫酸溶液至刻度，摇匀，冷却后置沸水浴中保温10min，取出，立即置冰水浴中冷却10min，取出，以相应试剂为空白。照紫外-可见分光光度法，在490nm波长处测定吸光度。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，Y=3.9287X+0.0723，r=0.9991。结果表明无水葡萄糖在0.036～0.36g·L-1范围内，其质量浓度与吸收度线性关系良好。　　供试品溶液的制备：取干燥后的二精丸

8、多糖0.01g，加蒸馏水溶解，定容于250ml量瓶中，摇匀。即得供试品溶液。