神经生长因子对新生大鼠hibd后海马区凋亡相关蛋白表达的影响论文

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1、神经生长因子对新生大鼠HIBD后海马区凋亡相关蛋白表达的影响论文胡伟，巩守平，李文妍，王岗，黄绍平【Abstract】AIM:Toinvestigatetheeffectsofnervegropusofneonatalratsfolloicbraindamage(HIBD),anditsmolecularbiologicalmechanism.METHODS:Seventytlydividedintocontrolgroup,HIBDgroupandNGFgroup.TheratmodelsofHIBDodifiedRICEmethod.ImmunohistochemistryandTUN

2、ELstainingployedrespectivelytodetecttheexpressionsofBcl2andBaxandthenumberofapoptotichippocampalneurons.RESULTS:MoreorlessapoptoticneuronscouldbeobservedinhippocampusinHIBDgroupandthelevelofBcl2expressioninistration,thenumberofapoptoticneuronsarkably(P0.01)asparedinistrationofNGFmayincreaseBcl2e

3、xpressionanddecreaseBaxexpressionafterHIBDinneonatalrats,thusinhibitingtheapoptosisinhippocampus.【Keyia,brain;braininjuries;hippocampus;apoptosisrelatedprotein【摘要】目的：应用新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）模型，观察神经生长因子对海马区细胞凋亡及相关蛋白Bcl2和Bax的影响，探讨其神经保护作用的分子生物学机制.方法：72只大鼠随机分为对照组、HIBD组和NGF治疗组.应用改良RICE法制作大鼠HIBD模型，TUNEL法检测

4、各组动物海马区细胞凋亡数.freelicbraindamage,HIBD)是由于宫内窘迫、新生儿窒息等引起的新生儿脑部严重损伤，有较高的发病率和死亡率,也是导致智能落后和脑性瘫痪等儿童伤残的主要原因［1］.HIBD发病机制复杂，涉及多个环节，而凋亡是后期神经细胞缺失和功能障碍的主要原因.细胞凋亡持续时间较长，适当的治疗可逆转凋亡的病理过程而改善预后.本实验应用新生大鼠HIBD模型，以神经生长因子(nervegroicencephalopathy,.freelAb，免疫组化染色SP试剂盒，细胞凋亡检测试剂盒（武汉博士得生物工程公司）.1.2方法1.2.1动物模型制备参照文献［2］制作HIBD模

5、型：大鼠乙醚麻醉后，游离左颈总动脉并永久结扎，术后水浴箱恢复1h，再置于37℃自制缺氧舱中，以3L/min速度持续输入含80ml/L氧气的氮氧混合气体2h，制成HIBD模型.1.2.2动物分组大鼠随机分为3组：①对照组：24只（假手术处理，仅游离左颈总动脉，不结扎亦不缺氧）；②HIBD组：24只，RICE法制备HIBD模型后腹腔注射生理盐水，间隔24h，连用7d；③NGF组：24只，HIBD模型后即刻以NGF1000U/kg腹腔注射，间隔24h，连用7d.1.2.3脑组织病理学测评HIBD后6,24,72h和7d时间点取脑，参照图谱，取含海马脑组织，行4μm连续冠状切片.HE染色，光镜下观察

6、海马区细胞层结构；取与HE相邻切片，TUNEL染色，计数海马区凋亡细胞数；每一标本取2张切片，每张切片取6个视野(CA1区3个视野，CA3区3个视野)，取两张切片的均值作为该标本结果，以该组6例样本均值作为该组实验结果.免疫组化染色检测海马区神经细胞bcl2，Bax蛋白表达.结果用Q550CercuriE,RicciD,Coicencephalopathycorrelationagicresonanceimaging［J］.Pediatrics,2000,106（2pal）:243-255.［2］VannucciRC,VannucciSJ.Amodelofperinatalhypoxic

7、ischemicbraindamage［J］.AnnNYAcadSci,1997,835:234-249.［3］Nijhaentanddisease［J］.AnnRevNeurosci,2000,23:73-78.［4］FelderhoffMueserU,SifringerM,PesditschekS,etal.Pathatothedevelopingratbrain［J］.NeurobiolDis,200