奥曲肽联合特异性cox.2抑制剂对肝癌细胞的抑制作用

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1、奥曲肽联合特异性COX.2抑制剂对肝癌细胞的抑制作用作者：俞谦，孙为豪，刘顺英，欧希龙，曹大中，苏菡，江洁，俞婷【关键词】肝癌　　Abstract:ObjectiveToinvestigatetheexpressionofsubstancePinrats'intestinaltissueandstudytherelationbe-tucosapermeabilityinacutenecrotizingpancreatitis（ANP）.Methods80adultSprague-Dalydividedintocontrolgroup（n=40）andANPgroup（n=

2、40）.Sacrificesadein8，12，16and20hlaterineverygroupafterANPmodeltaurocholateintopancreaticductrespectively.Thein-testinalmucosalpermeabilityandtheexpressionofsubstancePucosalper-meabilityandtheexpressionofsubstancePucosalpermeabilityinANP（r=0.66，P<0.01）.ConclusionTheexpressionofsubstance

3、PandthepermeabilityinintestineofratsareincreasedsignificantlyinANP.Thereexistsapossi-tivecorrelationbeteability.　　Keyucosalpermeability;rats［摘要］目的:研究特异性环氧化酶.2（COX.2）抑制剂NS.398和生长抑素类似物奥曲肽联合使用对人肝癌细胞系SMMC.7721增殖、凋亡的影响。方法:采用四氮唑盐比色法（MTT法）观察细胞增殖活力改变，流式细胞仪检测细胞凋亡百分率。结果:（1）MTT法显示NS.398和奥曲肽均在一定范围内呈浓

4、度和时间依赖性地抑制SMMC.7721细胞的增殖;联合用药组抑制率显著高于单用NS.398或奥曲肽组（P<0.01），金正均方法显示q>1.15，提示两药联合应用有协同抑制肝癌细胞增殖效应，并随着作用时间延长而增强。（2）流式细胞仪测定显示，NS.398、奥曲肽和两药联合作用于SMMC.7721细胞24h后，联合用药组细胞凋亡率显著高于单一用药组（P<0.01）。结论:NS.398和奥曲肽呈剂量、时间依赖性地抑制SMMC.7721细胞增殖，促进SMMC.7721细胞凋亡，两者联合应用具有协同作用。　　［关键词］NS.398;奥曲肽;肝癌;细胞增殖;凋亡　

5、　对失去手术机会根治无望的原发性肝癌（primaryhepaticcarcinoma，PHC）目前尚缺乏有效的治疗手段。近年来国内外研究表明，非细胞毒性药物可抑制肿瘤的生长甚至转移，不良反应较轻。这类药物主要包括生长因子、激素、激素拮抗剂及环氧化酶.2（COX.2）抑制剂等［1～3］。鉴于肝癌的发生和发展的多因素性和多环节性［4］，联合用药方案成为大多数学者的选择。由于生长抑素类似物奥曲肽和特异性COX.2抑制剂的抗肿瘤机制不同，因此本研究通过肝癌细胞体外培养，采用四氮唑盐（MTT）比色法（MTT法）、流式细胞仪检测等方法，来观察奥曲肽联合特异性COX.2抑制剂NS.39

6、8对肝癌细胞生长有无协同抑制作用，为联合应用NS.398和奥曲肽治疗肝癌提供实验依据。　　1材料与方法　　1.1材料　　1.1.1细胞系来源　　SMMC.7721人肝癌细胞系为东南大学遗传中心实验室所赠。　　1.1.2主要试剂　　NS.398（美国Cayman公司），奥曲肽（瑞士诺华公司），RPMIMedium1640（美国Gibco公司），HEPES、小牛血清、胰蛋白酶、MTT（Amresco公司），AnnexinⅤ.FITC试剂盒（Gender公司）。　　1.2实验方法　　1.2.1细胞培养　　肝癌SMMC.7721细胞常规培养于含有10%小牛血清、100U}

7、39;ml-1青霉素、100U・ml-1链霉素的RPMI1640培养液中，吹打细胞使之悬浮并接种到培养瓶中，37℃、CO2体积分数为0.05、饱和湿度条件下培养。每2～3d用0.25%胰蛋白酶消化传代。　　1.2.2MTT法　　实验先设空白组［仅含培养液和等体积的二甲亚砜（DMSO）］、对照组（SMMC.7721细胞的单细胞悬液200μl加等体积的DMSO）及实验组（SMMC.7721细胞的单细胞悬液200μl加药物100μl）。实验组又分为NS.398、奥曲肽的不同浓度梯度组，其中NS.398为5个浓度梯度（1