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时间:2018-11-15
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1、超声波辅助提取木棉花多糖超声波辅助提取木棉花多糖木棉.L.[Gossampinusmalabarica(Dc.)Merr.]为木棉科木棉属植物,是华南地区特有的植物资源,主要分布于广西、广东、四川、贵州和云南等省。其花性味甘、淡、凉,有清热利湿以及解暑的功能,可治肠炎、痢疾。民间多在初春时拾其落花,晒干煎水服用。用来祛风除湿,活血消肿,散结止痛,治疗胃癌、食管癌等消化道肿瘤[1]。近年来,植物、海洋生物及菌类等来源的多糖已作为有生物活性的天然产物中的一个重要类型出现。而在菌多糖得到广泛研究的背景下,越来越多的工作人员将目光投向植物多糖,
2、据 1.2.2木棉花多糖提取工艺流程采用超声波辅助提取木棉花多糖,根据试验设计,准确称取1.00g木棉花样品进行预处理(平行2份),放入碘量瓶中,按一定比例加入去离子水,在合适的提取温度和超声波功率下超声波辅助提取数小时,提取结束后趁热减压抽滤,收集滤液。相同条件下,再将滤渣洗入三角瓶中二次提取,提取数次后,合并滤液,浓缩至原溶液的1/4,加入溶液1/5体积的高岭土进行脱色,.L.抽滤。向滤液中加入4倍体积的体积分数为95%的乙醇溶液,放置过滤,离心,去除上清液,收集沉淀[5]。沉淀用体积分数为80%的乙醇溶液洗涤,如此重复数次,直到乙
3、醇溶液接近无色,得到的沉淀即为粗多糖。得到的粗多糖加50mL的去离子水使其重新溶解,加入Sevage试剂(正丁醇∶氯仿=1∶5,V/V),振荡30min,静置,脱去蛋白质,过滤,取其滤液,用去离子水溶解后定容于100mL容量瓶中,利用苯酚-硫酸法测其吸光度(A),根据回归方程可算出多糖得率[2]。多糖得率=VC/(1000m)100%,式中,C为标准曲线上查得的葡萄糖浓度(mg/mL),V为木棉花多糖溶液的体积(mL),m为木棉花质量(g)。 1.2.3单因素试验①料液比对木棉花多糖得率的影响。称取5份粉碎的干燥的木棉花样品各1.00
4、g,选择超声波功率为350W,提取温度为50℃,提取时间为20min,在料水质量比分别为1∶30、1∶40、1∶50、1∶60、1∶70下各提取1次,比较不同料液比对木棉花多糖得率的影响。②提取温度对木棉花多糖得率的影响。称取5份粉碎的干燥的木棉花样品各1.00g,选择料水质量比为1∶60,提取时间为20min、超声波功率为350W,在提取温度分别为30、40、50、60、70℃下各提取一次,比较不同提取温度对木棉花多糖得率的影响。③超声波功率对木棉花多糖得率的影响。称取5份粉碎的干燥的木棉花样品各1.00g,选择料水质量比为1∶60,
5、提取温度为50℃,提取时间为20min,在超声波功率分别为200、250、300、350、400W下各提取1次,比较不同超声波功率对木棉花多糖得率的影响。④提取时间对木棉花多糖得率的影响。称取5份粉碎的干燥的木棉花样品各1.00g,按照料水质量比为1∶60,超声波功率为250W,提取温度为50℃,在提取时间分别为10、20、30、40、50min下提取各1次,比较不同提取时间对木棉花多糖得率的影响。⑤提取次数对木棉花多糖得率的影响。称取3份粉碎的干燥的木棉花样品各1.00g,选择料水质量比为1∶60、提取温度为50℃、提取时间为20mi
6、n、超声波功率为250W,分别提取1~3次,研究多糖提取次数对木棉花多糖得率的影响。 1.2.4正交试验影响超声波辅助提取法的主要因素有超声波功率、提取时间、提取温度、提取次数、料水质量比等因素[9,10],通过单因素试验结果分析得出,提取次数虽然会对多糖得率有所影响,随着提取次数的增加多糖得率自然而然会增大,但考虑到回收转移较困难,加上浓缩的成本较高、操作时间过久,所以在单因素试验的基础上,选择超声波功率、料水质量比、提取温度、提取时间这4个因素作为考察对象,并结合生产实际,每因素选取3个水平(表2),以多糖得率为指标进行L9(34
7、)正交试验,优选最佳工艺。 2结果与分析 2.1单因素试验结果分析 2.1.1料水质量比对木棉花多糖得率的影响从图2可以看出,在料水质量比从1∶50变到1∶60时,木棉花的多糖得率增加比较快,在料水质量比为1∶60时木棉花的多糖得率达到最大。提取多糖时料水质量比太大,提取不完全;料水质量比太小,回收、过滤、转移困难,造成浪费,并且后期浓缩成本高。本试验结果显示,料水质量比为1∶60时提取多糖较为充分,效果较好。 2.1.2提取温度对木棉花多糖得率的影响由图3可以看出,当提取温度为50℃时,多糖得率最高。当提取温度小于50
8、℃时,因为其提取温度不够,导致多糖未能完全被提取出来,所以多糖得率随提取温度的升高而增加,当提取温度大于50℃时,由于提取温度较高,部分多糖被降解或破坏,因此多糖得率开始下降。 2.1.3超声波功率对
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