多重pcr检测在儿童肺炎细菌性病原中的临床应用

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1、多重PCR检测在儿童肺炎细菌性病原中的临床应用［摘要］目的探讨多重PCR检测在儿童肺炎细菌性病原中的临床应用价值。方法选取2015年1〜7月在我院就诊的300例肺炎患儿，收集患儿呼吸道分泌物，进行细菌培养并提取DNA，利用多重PCR扩增14种呼吸道病原菌靶基因，统计分析多重PCR检测儿童肺炎细菌性病原敏感性和特异性。结果从300例标本中，细菌培养出184株病原菌，阳性率为61.33%(184/300)。经多重PCR扩增检测118例样本呈阳性，阳性率为39.3%(118/300)。对14种病原菌多重PCR的敏感性为51.6%,特异性为68.6%，符合率为58.9%。多重PCR对S

2、PN检出率(15.7%,47/300)高于培养(5.7%，17/300)(P0.05)。5种细菌的多重PCR与细菌培养结果比较见表2。参考5种细菌培养，多重PCR的特异性和符合率均高于细菌培养结果，对SPN、PA的敏感性高于细菌培养的，相关指标见表3。2.3联合检测结果分析联合检测结果细菌性病原检出率为80.67%(242/300)，联合检测提高流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌检出例数。见表4。3讨论世界卫生组织(WHO)在2005年公告，5岁以下儿童的死亡原因中，肺炎仍居于第一位，全世界每年死于肺炎的儿童大约有200万，其主要病原为细菌性，

3、其次为病毒、支原体、衣原体等。在病原学诊断方法中，PCR扩增为目前应用最多的分子诊断技术，因其在敏感度、速度、安全性、准确性的优势，在难以常规培养的病原体如病毒、支原体、衣原体等的检测方面发挥了重要作用。单PCR—次只能检出一种病原或一类，在病原学的鉴别诊断方面存在缺陷，而多重PCR在一次检测中可以同时查出多种病原，已广泛应用于病原学诊断、耐药基因检测等研究领域。是病原学鉴别诊断未来发展方向，在病毒性肺炎病原学诊断方面，国内外均取得了比较满意结果。近些年，随着抗生素的早期广泛应用，增加了细菌培养检出率的难度，而采用多种方法进行联合检测可以相互补充，提高病原检出率。本研究显示，总

4、体看来多重PCR阳性率低于培养，可能因片段扩增的条件不一，难以均匀的对每种靶基因进行扩增，因此产物较少，从而导致敏感性的降低。而在肺炎链球菌的检测方面，多重PCR对SPN检出率明显高于培养，说明多重PCR对肺炎链球菌敏感性优于培养。联合检测细菌性病原检出率为80.67%(242/300),高于单独细菌培养的检出率，且联合检测提高流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、鲍曼不动杆菌检出例数和铜绿假单胞菌的检出率，可以体现联合检测的优势，这与国内外其他专家学者报道一致。综上，多重PCR技术对检测肺炎链球菌的敏感性较高，而对检测其他细菌性病原的敏感性还有待提高。多重PCR技术联合细

5、菌培养能提高儿童肺炎细菌性病原检出率。临床工作中可以综合考虑各种检测方法的优势，灵活运用，提高病原学诊断，促进治疗。