紫萍提取物对过氧化氢诱导内皮细胞氧化损伤的保护作

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1、紫萍提取物对过氧化氢诱导内皮细胞氧化损伤的保护作【摘要】目的研究紫萍提取物是否具有保护内皮细胞免受过氧化氢损伤的作用。方法采用MTT比色法筛选紫萍提取物作用于内皮细胞的安全剂量，建立H2O2对内皮细胞的氧化损伤模型，并研究紫萍提取物的保护作用。最后采用检测试剂盒方法分析紫萍提取物作用后内皮细胞中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性变化。结果紫萍提取物的浓度<100μg/ml，作用时间为24h时，无明显细胞毒性。以1mmol/L的H2O2作用于ECV-304细胞1h造氧化损伤模型，10，25，50μg/ml的紫萍提取物具有预防

2、氧化损伤作用，可使细胞的存活率由21.98%分别上升至37.49%，51.71%和64.74%，其机理可能是紫萍提取物能够剂量依赖性的增强SOD，CAT和GSH-Px等酶的活性。但是紫萍提取物无治疗氧化损伤的作用。结论紫萍提取物可以有效保护内皮细胞免受氧化损伤。【关键词】紫萍氧化损伤过氧化氢超氧化物歧化酶过氧化氢酶谷胱甘肽过氧化物酶Abstract：ObjectiveTostudytheprotectiveeffectofSpirodelapolyrrhiza(L.)Schleidextract(SE)againstthedamagecausedbyhydrogenperoxide

3、(H2O2)inhumanvascularendothelialcells(ECV-304).MethodsNormalECV-304cellsfor24h-96h,orH2O20.125～10mmol/Lfor1～24h,thesurvivalrateofcellsinedbytetrazoliumassay(MTT).ToevaluatetheprotectiveeffectofSEonECV-304injuryinducedbyH2O2,ECV-304odel,andSEtreatmentgroups.InSEtreatmentgroup,ECV-304lfor24h，bef

4、oreorafterH2O21mmol/L(finalconcentration)odelgroupandtheSEtreatmentgroupfor1h.ThesurvivalconditionsofECV-304ore,theactivitiesofSOD,CATandGSH-PxinECV-304cellstreatedlSEinedbythecorrespondingassaykits.Results5，10，25，50μg/mlSEhadnosignificantcytotoxicityonECV-304at24h，but100μg/ml,200μg/ml,and400μ

5、g/mlSEmarkedlydecreasedthesurvivalrateat24h.TheviabilityofECV-304mol/LH2O2at1h.PretreatedlSE,thesurvivalrateandtheactivitiesofSOD,CATandGSH-Pxincellsanner.ButSEhadnoprotectiononECV-304injuryinducedbyH2O2.ConclusionSEhasdualeffectsonthesurvivalrateofECV-304invitro,entlSEcanprotectECV-304against

6、H2O2injury.Keywords：Spirodelapolyrrhiza(L.)Schleid；Hydrogenperoxide；SOD；CAT；GSH-Px血管内皮细胞(vascularendothelialcell,VEC)是介于血液与血管壁之间的屏障，在创伤修复、血管生成、止血、血栓形成、出血性疾病、动脉粥样硬化、糖尿病等一系列生理和病理过程中起着重要作用。一旦内皮细胞受到损伤，则会导致血管屏障功能的损害，从而引发动脉粥样硬化、高血压病等多种心血管疾病的发生。导致VEC受损的原因很多，生物体内各种氧化-还原反应产生的羟基自由基（·OH）、超氧阴离子（O-2·）、过氧化氢

7、（H2O2）等自由基(Reactiveoxygenspecies,ROS)的累积是其中之一［1～3］。血管内皮细胞功能性障碍的发生既可能是心脑血管疾病发病的始动环节，又可作为病情的观察指标和治疗学手段改进的突破口。因此，内皮细胞被认为是心、脑血管疾病基因治疗中最佳的靶细胞。选择血管内皮细胞作为研究的突破口既是可行的，亦符合未来发展方向，同时随着血管内皮细胞培养手段的成熟，内皮细胞为治疗心血管疾病药物的筛选和药理研究提供了新的实验材料，为在细胞水平进行心血管疾病相关药物