大豆异黄酮对过氧化氢及脂多糖诱导的血管内皮细胞损伤保护机制的实验研究-论文.pdf

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1、150中华心血管病杂志2014年2月第42卷第2期ChinJC⋯ardiolFeb坚_v：篁：．基础研究．大豆异黄酮对过氧化氢及脂多糖诱导的血管内皮细胞损伤保护机制的实验研究王燕补蔚萍谢宏曲爱华刘军【摘要】目的探讨大豆异黄酮(soybeanisoflavone，SI)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用及其机制。方法建立内皮细胞脂质过氧化损伤模型。然后实验分为9组：(1)正常对照组；(2)过氧化氢(H：O)氧化损伤组(HO组)：在培养基中加入2mmol／L的HO：诱导损伤4h；(3)脂多糖(LPS)氧化损伤组(LPS组)：在培养基中加入2mmol／L的L

2、PS诱导损伤4h；(4)H：O：加sI低剂量(1mg／m1)组(HO+SI低剂量组)、中剂量(2．5mg／m1)组(H：O+sI中剂量组)和高剂量(5mg／m1)组(H，O，+sI高剂量组)；(5)LPS加SI低剂量(1mg／m1)组(LPS+sI低剂量组)、中剂量(2．5mg／m1)组(LPS+sI低剂量组)和高剂量(5mm1)组(LPS+sI高剂量组)。M1Tr法观察sI对HUVEC活性的影响。双波长荧光分光光度法测定HUVEC细胞内游离ca浓度。检测各组内皮细胞匀浆中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)活性。EL

3、ISA法测定培养的细胞上清液中白细胞介素6(IL-6)表达的变化。测定细胞凋亡率。结果(1)H：0：组和LPS组较正常对照组血管内皮细胞损伤明显、细胞增殖少(P均<0．05)、内皮细胞内游离ca浓度高(P均<0．05)，细胞培养上清液和细胞匀浆中MDA含量和IL-6均高(P均<0．05)，SOD、GSH—Px活性均低(P均<0．05)，凋亡率均高，分别为(37．8±1．8)％和(38．9±1．1)％(P均<0．05)，上述指标HO组和LPS组组间比较差异均无统计学意义。(2)H：O+sI中剂量组和LPS+SI中剂量组SOD和GSH—Px分别明显高于HO组和LPS组

4、(P均<0．05)，MDA含量、细胞内游离ca“浓度和IL-6则分别明显低于H0组和LPS组(尸均<0．05)，凋亡细胞数量亦分别低于H：O：组和LPS组(P均<0．05)。结论sI可保护和修复H：O：或LPS引起的血管内皮细胞损伤，其机制可能与保护细胞的线粒体，提高细胞的抗氧化酶活性，降低细胞内游离ca“浓度有关。【关键词】内皮细胞；异黄酮类；过氧化氢；脂多糖类ProtectiveeffectsofsoybeanisoflavoneonhumanumbilicalveinendothelialcellinjuryinducedbyH2O2andlipopolys

5、accharideWangYah，BuWeiping，Xie舶，QAihua，LiuJun．InstituteforBiomedicalSciencesofPain，TangduHospitaZ，urthMilitaryMedicafUniversity．Xian710038，inaCorrespondingauthor：LiuJun，Email：tutuhe@corn【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheprotectiveeffectsandrelatedmechanismsofsoybeanisoflavone(SI)onhu

6、manumbilicalveinendothelialcells(HUVECs)iniuryinducedbyH，O，andlipopo1vsaccharide(LPS)．MethodsH，0，andLPSwereusedtoindueeHUVECsiniuryinvitro．Nineexperimentalgroupswereexamined：controlgroup，H2O2(2mmol／Lfor4h)，LPS(2mmol／Lfor4h)，H202+lowdoseSI(1mg／m1)，H2O2+moderatedoseSI(2．5mg／m1)，H2O2+hig

7、hdoseSI(5mg／m1)，LPS+lowdoseSI(1iTIg／m1)，LPS+moderatedoseSI(2．5mg／m1)，LPS+highdoseSI(5mm1)．ThesurvivalratioofHUVECswasdetectedwithMTYassay．TheculturedcellswereloadedbyFura一2／AMandthechangeoffCaIinHUVECswasmeasuredbyfluorospeetrophotometry．Thecontents0fmalondialdehvde(MDA)，superoxidedis

8、nmtas