解毒化瘀方对脓毒症大鼠蛋白c mrna表达及血浆

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1、解毒化瘀方对脓毒症大鼠蛋白CmRNA表达及血浆【摘要】目的观察解毒化瘀方对脓毒症大鼠凝血调节蛋白CmRNA(PCmRNA)表达及血浆蛋白C(PC)活性的影响，并探讨中药解毒化瘀方治疗脓毒症的作用机制。方法将大鼠分为正常组、对照组（假手术处理）、模型组（脓毒症）、中药组（造脓毒症模型前后用解毒化瘀方治疗），动态观察术后12、24、48?h及正常组肝脏组织PCmRNA表达及血浆PC活性、内毒素（LPS）水平。采用盲肠结扎穿刺法复制脓毒症模型、实时荧光定量PCR法检测PCmRNA表达、血凝仪法检测血浆PC活性，动态浊度鲎试验法检测LPS水平。且动态观察解毒化瘀方对脓毒症大鼠

2、生存率的影响。结果在脓毒症形成过程中，模型组PCmRNA表达水平和血浆PC活性均显著低于正常组及对照组（P＜0.01），而血浆LPS水平则显著高于正常组与对照组（P＜0.01）；经解毒化瘀方治疗的脓毒症大鼠，其PCmRNA表达及血浆PC活性均显著高于模型组（P＜0.01），血浆LPS水平则显著低于模型组（P＜0.01）；经解毒化瘀方治疗的脓毒症大鼠，其生存率亦高于未治疗的脓毒症大鼠（P＜0.05）。结论解毒化瘀方能增强脓毒症大鼠PCmRNA表达，提高血浆PC活性，降低血浆LPS水平，提高了脓毒症大鼠的生存率。【关键词】脓毒症；解毒化瘀方；蛋白C；大鼠，P)andthe

3、traditionalChinesemedicinetreatedgroup(TCMP).TheexpressionofProteinCmRNAandtheactivityofplasmaPCandLPSicallydeterminedat12?h,24?h,and48?hafterthesepsisoperationsbyrealtimequantitativeRTPCRandbytheautomatedcoagulationanalyzerandLimulustest.TheeffectofJHRonthesurvivalrateicallyobserved.

4、ResultsInthecourseofsepsis,theexpressionofproteinCmRNAandtheactivityofplasmaPCintheMPgroupRNAandtheactivityofplasmaPCintheTCMPgroupent（P＜0.05）.　ConclusionJHRcouldimprovetheexpressionofproteinCmRNAandtheactivityofplasmaPCandreducetheplasmaLPSlevelofsepticrats,provesthesurvivalrateofsepti

5、crats.ThismaybeoneofthemoleculebasesofJHRintreatingsepsis.　　KeyRNA的表达入手，揭示脓毒症广泛性毛细血管内凝血发生的病理生理学机制，从而为脓毒症的中西医结合防治提供新的切入点。　　1材料与方法　　1.1动物及分组　　雄性ega公司。ExScriptKit(反转录反应试剂盒)，SYBRPremixExTaqKit（荧光定量PCR专用试剂盒），DNAFragmentPurificationKit，均为日本TaKaRa公司产品。高速冷冻离心机，上海科学仪器厂。PC活性检测试剂盒,美国Biopool公司。pact

6、XR全自动血凝仪，德国BE公司。DS99细菌内毒素检测系统,湛江正杰科学仪器有限公司。　　1.3解毒化瘀方制备　　本着清热解毒、活血化瘀、凉血开窍原则制定，选择醒脑静注射液和中药煎剂共同组成，醒脑静注射液，10?mL/支，含麝香75?mg、栀子300?mg、郁金300?mg、冰片100?mg，大理药业有限公司生产，批号：051012。每剂中药煎剂由地龙5?g、生水蛭5?g、土元5?g、板兰根20?g、生大黄5?g、丹皮10?g、赤芍10?g、丹参20?g、川芎10?g、生地10?g、生石膏10?g、金银花10?g、红花10?g、连翘10?g、枳实10?g、蒲公英10

7、?g组成，购自济南建联中药公司，水煎2遍，浓缩至120?mL，生大黄于浓缩后期放入。　　1.4模型制作与取材　　正常组：正常饲养，不做手术处理，1周后取材。模型组：造模前7?d开始给于生理盐水灌胃，1.5?mL/100?g体重,12?h1次；生理盐水腹腔注射，0.39?mL/100?g体重，12?h1次，按照Hubbarded,2001,344(10):699709.　　［2］VanderPollT,LeviM,NickJA,etal.ActivatedProteinCInhibitsLocalCoagulationafterIntrapulmon