吡格列酮对游离脂肪酸作用下βtc3细胞gpr40表达的干预作用

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1、吡格列酮对游离脂肪酸作用下βTC3细胞GPR40表达的干预作用【摘要】目的探讨游离脂肪酸(FFA)作用下胰岛βTC3细胞G蛋白受体40（GPR40）mRNA表达的改变以及吡格列酮（Piog）对此改变的干预作用。方法以βTC3细胞为研究对象，分为对照组及FFA组（0.25，0.5及1mmol/L）。半定量RTPCR方法检测GPR40的表达。用不同浓度的Piog（0，0.1，1，10μmol/L）预孵育βTC3细胞6h，加入1mmol/LFFA继续孵育24h，半定量RTPCR方法检测GPR40的表达。结果(1)FFA孵育12h后，各组间GPR40的表达差

2、别无统计学意义。(2)FFA孵育24h后，与对照组比较，0.25mmol/LFFA组GPR40的表达无差异，但0.5mmol/L和1mmol/LFFA组GPR40表达下调（P<0.05）；0.5mmol/L与1mmol/LFFA组比较GPR40表达差别无统计学意义。(3)与1mmol/LFFA组比较，0.1μmol/LPiog+1mmol/LFFA组GPR40mRNA表达无差异，而1μmol/LPiog+1mmol/LFFA组和10μmol/L+1mmol/LFFA组GPR40表达升高（P<0.01）。结论长期高浓度FFA作用能够下调βTC3细胞G

3、PR40的表达，而Piog有助于保护或减轻FFA水平异常导致的βTC3细胞GPR40表达的损害。【关键词】噻唑烷二酮类；PPARγ；脂肪酸类；糖尿病，2型；受体，G蛋白偶联ofGPR40inβTC3cellsinducedbyfreefattyacids(FFA)andtheinterventioneffectofpioglitazone(Piog)onthoseexpressions.MethodsβTC3cellsstudiedintheexperimententsmol/L).SemiquantitativeRTPCRanalysisinet

4、heRNAexpressionlevelofGPR40inβTC3cellsafter12hoursand24hoursrespectively.Afterol/L）for6hours,and1mmol/LFFAinedbysemiquantitativeRTPCRatlast.Results(1)Afterthecellsongallthegroups.(2)Afterthe24hourincubation,nodifferencemol/LFFAandthecontrolgroup.Butparedtothecontrolgroupandthegro

5、upmol/LFFA,theexpressionofGPR40inβTC3cellsinbothgroupsmol/LFFAandthatmol/LFFAdecreasedafterthe24hourincubation(P<0.05).Theremol/LFFAandthatmol/LFFA.(3)Thoughnostatisticallysignificantdifferenceol/LPiog+1.0mmol/LFFAandthatmol/LFFA,theRNAexpressionlevelofGPR40inboththegroupol/LPio

6、g+1.0mmol/LFFAandthatol/LPiog+1.0mmol/LFFAincreasedparedtothegroupmol/LFFA(P<0.01).ConclusionTheexpressionofGPR40inβTC3cellsmaybeinhibitedbylongtermadministrationofFFAofhighconcentration,pairmentinβTC3cell.　　KEYEM培养基(美国GIBCO公司)，油酸和棕榈酸均(美国Sigma公司)，Piog(恒瑞集团江苏德源药业有限公司)。　　1.2方法　　1

7、.2.1FFA溶液的制备　　FFA贮备液中油酸与棕榈酸的比例为2∶1。溶解所需剂量的油酸和棕榈酸于10mL99%酒精中，振摇1h。每10mmol/LFFA加入40μL的NaOH（10mol/L），混匀，置于通风橱中过夜干燥。加入10mL蒸馏水，加热溶液至呈透明皂液样时，加入40mL冰冷的10%小牛血清白蛋白，混匀。经0.22μmCA过滤器过滤消毒后将FFA贮备液存于-20℃。　　1.2.2Piog溶液的制备　　量取Piog5mg，用DMSO溶液溶解稀释配制成1mmol/L的母液，过滤除菌，4℃保存，使用前用DMEM培养液稀释成所需浓度，并使培养液中DMSO的终浓

8、度不高于0.01％。