叶绿素铜钠盐联合环孢菌素a对免疫介导再生障碍性贫血模型小鼠的

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1、叶绿素铜钠盐联合环孢菌素A对免疫介导再生障碍性贫血模型小鼠的巨君芳周平张如富魏克民【摘要】　　目的探讨叶绿素铜钠盐(SCC)联合环孢菌素A(CsA)治疗再生障碍性贫血(AA)的疗效。方法建立免疫介导AA模型小鼠，分别胃饲2种不同剂量SCC12.5mg/(kg·d)+CsA12.5mg/(kg·d),SCC25mg/(kg·d)+CsA12.5mg/(kg·d),以CsA，SCC［各25mg/(kg·d）］为阳性对照组,正常对照组及模型对照组胃饲生理盐水,每组灌胃0.5ml/d，分2次给药，连续14d，分别检测血象，另取股骨作骨髓病理切片。结果SCC+CsA小剂量组ethodsToestabli

2、shimmune-mediatedAAmodel,BALB/crats(equalnumberofmaleandfemale)lydividedintosixgroups:thenormalgroup,theAAmodelgroup,theCsAgroup,theSCCgroup,thebinationofSCCandCSAgroup,thebinationofSCCandCSAlog/(kg·d]］,SCC12.5mg/(kg·d)+CsA12.5mg/(kg·d),theSCC25mg/(kg·d)+CsA12.5mg/(kg·d),0.5mltogramurbonemarroberofI

3、-1640培养基，除去表面血污及粘附的结缔组织，再次清洗后，用手术刀、剪刀反复剪切组织，直到成糊状，再轻轻研磨，用200钢目网过滤，使之成为单细胞悬液,计数后配成5×106/ml浓度，其胸腺细胞：淋巴细胞为1：2。取1滴苔盼蓝滴入玻片上鉴定细胞活性应＞95%。在浙大农学院动物辐照中心，BALB/c小鼠经60coγ射线5.5Gy(1.1Gy/min×5min)作一次全身照射，亚致死剂量照射后2h内，立即尾静脉输入上述细胞悬液，每只小鼠输入0.2ml，制成AA动物模型。　　1.4实验分组　　将BALB/c小鼠随机分为6组，每组10只，即叶绿素铜钠盐组（SCC组A组），环孢菌素A组（CsA组B组），

4、叶绿素铜钠盐与环孢菌素A组［（SCC+CsA组1）C组］，叶绿素铜钠盐与环孢菌素A组小剂量组［（SCC+CsA组2）D组］，模型对照组(E组)，正常对照组(F组)。　　1.5给药方法　　每组灌胃0.5ml/d，分2次给药，连续14d。A组每只小鼠每天给予SCC0.25ml/10g的SCC溶液（相当与成人剂量的12.5倍），B组每只小鼠每天给予0.25ml/10g的SCC溶液（相当与成人剂量的5倍），C组1每只小鼠每天分别给予6mg/ml的SCC溶液0.25ml/10g、1mg/ml的CsA溶液0.25ml/10g。D组2每只小鼠每天分别给予3mg/ml的SCC溶液0.25ml/10g、1mg/

5、ml的CsA溶液0.25ml/10g，F组和E组每只小鼠每天给予0.25ml/10g的生理盐水。(责任编辑：)　　1.6指标检测　　观察满14d的小鼠，摘取右侧眼球，取血，EDTA抗凝，用法国HYLEL血细胞分析仪检测血常规。各组的BALB/c小鼠脱臼处死，取股骨，Bouin’s液固定，然后脱钙，常规石蜡切片，HE染色。　　1.7统计学处理　　数据以(x±s)表示，组间比较采用t检验。　　2结果　　2.1SCC+CsA对AA模型小鼠外周血血象的影响　　各组间的比较见表1。(1)对白细胞的影响：与F组比较，A组白细胞下降明显（P＜0.05），E组与D组白细胞组下降非常明显（P＜0.01）；与E组

6、比较，C组及B组白细胞升高明显（P＜0.05）；C、D治疗组白细胞与A、B组比较，无显著性差异（P＞0.05）。(2)对血红蛋白的影响：与F组比较，A组与D组血红蛋白下降明显（P＜0.05），其余各组血红蛋白下降非常明显（P＜0.01）；与E组比较，C组与A组血红蛋白升高明显（P＜0.05），D组血红蛋白升高非常明显（P＜0.01）；D组血红蛋白与A组、B组比较升高明显（P＜0.05）。（３）对血小板的影响：与F组比较，A组与D组血小板明显下降（P＜0.05），E组、B组与C下降非常明显（P＜0.01）；与E组比较，各组血小板明显上升（P＜0.05）；D组与B组比较，血小板明显上升（P＜0.0

7、5）。由此可见，叶绿素铜钠盐联合环孢菌素A对AA模型小鼠血三系的恢复有效，其中D组效果最明显，且疗效好于A、B组。表1AA模型小鼠各组外周血血象的比较（略）　　2.2叶绿素铜钠盐联合环孢菌素A对AA模型小鼠骨髓病理的影响　　观察满14d的小鼠骨髓病理变化见图1，发现E组小鼠增生极度低下(造血组织容量<34%），造血细胞减少，脂肪细胞增多，间质水肿，血窦扩张，无巨核细胞等改变。用药各组骨髓增生