锌alpha2糖蛋白通过法尼酯X受体改善肝脏脂肪沉积的研究

《锌alpha2糖蛋白通过法尼酯X受体改善肝脏脂肪沉积的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号Ｒ５８密级公开ＵＤＣ６１０￥樹獨１０５５５⑩名梦硕士学位论文（专业学位）辞ａ丨ｐｈａ２糖蛋白通过法尼醋Ｘ受体改善肝脏脂肪沉积的研究研宂生姓名：钟海燕指导教师、职称：肖新华教授专业学位类别：（领域）临床医学研％方向：内科学（内分泌与代谢病学）所在学院一：第临床学院二〇一七年五月锌alpha2糖蛋白通过法尼酯X受体改善肝脏脂肪沉积的研究摘要目的：探讨锌alpha2糖蛋白(Zinc-α2-glycoprotein,ZAG)是否通过法尼酯X受体(F

2、arnesoidXreceptor,FXR)改善肝脏脂肪沉积。方法：用胶原酶灌注法分离8周龄C57BL/6野生型（WT）和同窝出生FXR敲除杂合子(WT/KO)雄性小鼠原代肝细胞，原代肝细胞均用棕榈酸处理造成肝细胞脂质沉积，棕榈酸干预24小时后用Ad-ZAG转染细胞，并分为4组，即:①野生型组(WT);②野生型加过表达ZAG组(WT+Ad-ZAG);③FXR敲除杂合子组（WT/KO）;④FXR敲除杂合子加过表达ZAG组（WT/KO+Ad-ZAG），其中WT+Ad-ZAG及WT/KO+ZAG两组行Ad-ZAG转染。细胞转染48

3、小时后用油红O染色观察原代肝细胞内脂滴，酶法检测细胞内甘油三酯的水平，通过Westernblot检测ZAG、代谢性核受体固醇调节元件结合蛋白（Sterolregulatoryelementbindingprotein-1c，SREBP-1c）及脂肪酸合成酶（Fattyacidsynthase，FAS）蛋白表达水平。结果：1.在棕榈酸干预下，油红O染色显示与WT组比较，WT+Ad-ZAG组的原代肝细胞内橘红色脂滴明显减少；与WT/KO组相比，WT/KO+Ad-ZAG组原代肝细胞内橘红色脂滴无明显改变。细胞内甘油三酯测定显示，与

4、WT组比较，WT+Ad-ZAG组的原代肝细胞内甘油三酯含量减少(P<0.01)；与WT/KO组相比，WT/KO+Ad-ZAG组原代肝细胞内甘油三酯无明显改变(P>0.05)。I2.与WT组相比，WT+Ad-ZAG组ZAG蛋白表达增加（P<0.01），SREBP-1c、FAS蛋白表达降低（P<0.05）;与WT/KO组相比，WT/KO+Ad-ZAG组ZAG蛋白表达增加（P<0.01），而SREBP-1c、FAS蛋白表达无明显改变（P>0.05）。结论：ZAG可能通过FXR改善肝脏脂肪沉积。关键词：非酒精性脂肪肝病；锌alpha

5、2糖蛋白；法尼酯X受体IITHEINVESTIGATIONSOFZINC-α2-GLYCOPROTEININTHEIMPROVEMENTOFHEPATICTGACCUMULATIONTHROUGHFARNESOIDXRECEPTORHai-yanZhong(EndocrinologyandMetabolism)DirectedbyProfessorXin-HuaXiaoAbstractObjective:ToinvestigatewhetherZincα2glycoprotein(ZAG)canimprovehepaticT

6、GaccumulationbyactivatingFarnesoidXreceptor(FXR).Methods:Aged8weeksWildtype(WT)andFXRheterozygotemaleC57BL/6mice(WT/KO)Withlitterbornprimaryhepatocyteswereisolatedwithcollagenaseperfusion.Theprimaryhepatocytesweretreatedwithpalmiticacidfor24hinordertoestablishthemo

7、deloffatdepositioninthehepatocytes.Thentheprimaryhepatocytesweredividedinto4groupsaftertransfectedbyAd-ZAG,whichwere①WT;②WT+Ad-ZAG;WT/KO;③WT/KO+④Ad-ZAGgroup.ThehepatocytesinWT+Ad-ZAGandWT/KO+Ad-ZAGgroupweretransfectedwithAd-ZAG.After48hours,OilRedOstainingwasusedto

8、observetheintracellularlipiddroplets,andintracellulartriglyceridecontentwasdetectedbyEnzymaticmethod.TheproteinexpressiomlevelIIIofZAG,metabolicn