锌alpha2糖蛋白对棕榈酸诱导的hepg2细胞内tg沉积的影响

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1、巧．＇公’Ｊ，＇＇於＊／．一－＼．－－．Ｉ．分类号民５８９．２密狂ｉ级公开、、么■…■．＇二：ＵＤＣ６１０学校代码１０５５５．ｒ沪ｒ，、．．！戀旅＃义索硕±学位论文＇■ｒ■。；（专业学位）辞ａｌｐｈａ］糖蛋白对掠桐酸诱导的ＨｅｐＧ２细胞内ＴＧ沉积的影响研究生姓名；刘革新指导教师、职称：肖新华教授学科专业；内科学（内分泌与代谢病学）研究方向：鹏胖及脂肪性肝病’一所

2、在学院；第临床学院二—０五年五月締痛考义拿ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＳＯＵＴＨＣＨＩＮＡ论文题目辞ａ１ｐｈａ２糖蛋白对掠桐酸诱导的ＨｅｐＧ２细胞内ＴＧ苑积的影响论义作者签名，巧：糾茸幸指导教师签名：＿＿輩一论文评阅人；１刘双全副教授硕导南华大学附属第医院评阅人２：凌宏艳教授硕导南华大学评阅人３：一答辩委员会主席：刘江华教授硕导南华大学附属第医院１委员：让蔚清教授硕导南华大学委员２；刘录山教授硕导南华大学一委员３：唐惠芳教授硕导南华大学附属第医院

3、委员４一；祖旭宇副教授硕导南华大学附属第医院委．员５；委员６：答辩日期：２０１５年０５月２３日南华大学学位论文原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加［＾标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使用社的材料。与我共同王作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。＇作者签名：辦

4、种２？功许Ｊ：月玉／曰南华大学学位论文版权使用授巧书－本学位论文是本人在南华大学攻读＾衣（博／硕）±学位期间在导．师指导下完成的学位论文。本论文的研究成果归南华大学所有，本论文的研究内容不得Ｗ其它单位的名义发表。本人同意南华大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位讫文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可Ｗ公布学位可论文的全部或部分内容，可ｔｉｌ采用复印、缩印或其它手段保留学位论文；学校根据国家或湖南省有关部口规定送交学位论文。同意学校将论文加入《中国优秀博硕±学位论文全文数据

5、库》，并按《中国优秀博硕±学位论文全文数据库出版章程》规定享受相关权益。同意授权中国科学信息技术研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。对于涉密的学位论文，解密后适用该授权。作者签名：卖巧抽从炸Ｊ月王］曰０导师签名：典Ｉ奸ｉ月日ｊ？勺第一部分过表达ZAG对棕榈酸诱导的HepG2细胞内TG沉积的影响刘革新(内分泌与代谢病学)导师：肖新华教授摘要：目的：观察棕榈酸（palmiticacid，PA）对HepG2和Hepa1-6细胞中锌alpha2糖蛋白（Zi

6、ncalpha2glycoprotein,ZAG）及法尼酯受体（FarnesoidXreceptor,FXR）表达的影响以及探讨HepG2细胞过表达ZAG后对棕榈酸诱导的TG沉积的影响。方法：1.体外培养HepG2和Hepa1-6细胞，用浓度分别为0mM、0.2mM、0.4mM、0.6mM的棕榈酸分别干预HepG2和Hepa1-6细胞24小时，Westernblot在蛋白水平检测ZAG及FXR表达。2.用六孔板体外培养HepG2细胞，用过表达ZAG质粒和空质粒经脂质体2000转染HepG2细胞24h后，0.4mM棕榈酸干预

7、24h，采用酶联免疫法检测细胞内甘油三酯的水平,油红O染色观察细胞内脂滴，Westernblot在蛋白水平检测代谢性核受体(FXR、PPARα、LXR和SREBP1c)、脂肪酸合成（FAS、ACC、SCD-1等）、脂肪酸摄取（FATP4）、脂肪酸β-氧化（CPT1A）、脂联素(Adiponectin)等基因表达。结果：1.随着棕榈酸浓度的增加，HepG2和Hepa1-6细胞ZAG蛋白表达水平逐渐减少（P<0.01），且PA浓度为0.6mM时，其表达水平最低；此外，FXR蛋白表达水平也均降低，PA浓度为0.4mM时，IHep

8、G2细胞FXR蛋白表达水平明显降低（P<0.01），PA浓度为0.6mM时，Hepa1-6细胞FXR蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。2.油红O染色显示，在棕榈酸干预下，与对照组相比较，过表达ZAG组的HepG2细胞内橘红色脂滴明显减少；细胞内甘油三酯测定显示，与对照组相比较，过表达ZAG组的Hep