hcv感染者外周血t细胞pd

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1、HCV感染者外周血T细胞PD.L.编辑。【摘要】目的探讨HCV感染者外周血T细胞程序性死亡受体1(programmedcelldeath1,PD-1)表达情况及与血清学指标的相关性。方法应用流式细胞术检测43例HCV感染者外周血T淋巴细胞PD-1及其配体B7-H1水平，与29例正常健康人作比较；COBASAMPLICOR自动载量仪检测HCV感染者血清病毒载量，同时进行肝功能检测。结果HCV感染组T细胞PD-1/B7-H1表达水平明显高于对照组（P<0.01）；HCVRNA阳性组外周血T细胞PD-1表达水平与病毒载量存在统计学正相关关系(r=0.442，P<0.01)；HCV

2、感染组PD-1分子的表达水平与血清转氨酶成正相关(r=0.626，P<0.01)。结论HCV感染后外周血T细胞PD-1表达水平明显升高，从而抑制T细胞的免疫功能，导致病毒持续感染并造成肝细胞进一步损伤。【关键词】丙型肝炎病毒细胞程序性死亡受体1病毒载量【Abstract】0bjective:Toinvestigatetheexpressionofprogrammedcelldeath1inperipheralTlymphocytesinpatientsarkers.Methods:TechniquesoffloetryandCOBASAMPLICORphocytesandvira

3、lloadof43patientseasured.Results:1evelsofPD-1andB7-H1phocytesandviralloadinpositiveHCV-RNApatients(r=0.442，P<0.01).moreover,the1evelofPD-1inpatientsmunefunctionofTlymphocytesandthusleadstotheviruspersistentinfectionandfurtherdamageofhepaticcells.【Keypus生化分析仪检测。1.3　实验方法1.3.1密度梯度离心法分离外周血单个核细胞离心

4、管中加入Ficoll-Hypaque淋巴细胞分离液15ml，沿管壁缓慢加入用PBS稀释后的抗凝全血30ml，离心400g，30min。用毛细管吸取界面层的PBMC并加入5倍体积的PBS缓冲液，洗涤细胞2次。1.3.2外周血B7-H1/PD-1表达检测向3支流式管中各加入1x106密度梯度离心法分离的HCV感染者及健康人PBMC，每管加入荧光标记的单抗CD3-PerCP、10ul，CD3-PerCP、B7-H1-PE各10ul,CD3-PerCP、PD-1-PE各10ul，混匀后4℃避光染色30分钟，用PBS洗涤后加入含1%多聚甲醛的PBS重悬，FACSAria流式细胞仪Diva软件进行

5、分析。1.3.3病毒载量检测以200μl血浆采用标准版模板制备法提取RNA，采用Roche公司HIV-1Monitor1.5mercialkit在COBASAMPLICOR自动载量仪上以RT-PCR方法测定病毒载量。HIV-1感染者的病毒载量转化为以10为底的对数进行统计分析。1.3.4统计学方法统计学处理采用SPSS16.0统计软件，数据采用±s表示，健康人与患者B7-Hl和PD-1表达水平的比较经方差齐性检验，两组间比较采用配对t检验，Spearman法进行组间相关性分析。2结果2.1HCV感染者外周血T细胞PD-1及B7-H1的表达水平和健康对照相比，HCV感染者外周血T细胞PD

6、-1及B7-H1的表达水平显著增高（P值<0.01）2.2PD-1表达水平与病毒载量的相关性32例RNA阳性的HCV感染者病毒载量与外周血T细胞PD-1表达水平呈明显正相关（r=0.442，PP<0.01）2.3HCV感染组PD-1分子的表达与血清转氨酶水平的相关性进一步分析显示，HCV感染者外周血T细胞PD-1表达水平与血浆ALT水平呈明显正相关（r=0.626，P<0.01）。3讨论HCV感染的特点是外周血和肝脏中存在病毒特异性T细胞，但却缺乏功能强大、表型成熟的HCV特异性CD4+T细胞和CD8+T细胞[7]。HCV感染后导致特异性免疫应答水平快速下降，这可能是

7、病毒本身造成的特异性免疫应答削弱的结果。事实上，人类由于HCV造成的适应性免疫应答削弱方面已有关于树突状细胞和辅助性T细胞的报道。最近，一些研究表明，HCV感染后依赖CD4+T细胞的效应性CD8+T细胞功能减弱，这和在HIV感染者身上的发现类似。而要维持一个强有力的、持续的T细胞应答就必须传递给T细胞三个信号[8]:一是通过T细胞受体传递；二是通过表达在T细胞和抗原提呈细胞上的共刺激分子传递；三是通过应答T细胞释放的细胞因子传递。其中一个或多个