地黄梓醇降糖作用的实验研究

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1、地黄梓醇降糖作用的实验研究赵素容卢兖伟陈金龙段海峰吴祖泽【摘要】　　目的研究地黄梓醇对四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖的影响。方法雄性KM小鼠尾静脉注射四氧嘧啶60mg/kg建立糖尿病动物模型。梓醇以200，100，50mg/kg剂量灌胃给药2周，观察其对糖尿病小鼠血糖、血脂和糖耐量的影响。结果梓醇能明显降低四氧嘧啶致糖尿病小鼠的血糖水平、改善糖耐量和血脂水平，并且呈剂量依赖关系。结论地黄梓醇对四氧嘧啶致糖尿病小鼠有显著的降血糖作用。【关键词】梓醇；降血糖作用；糖尿病　　Abstract：ObjectiveToinvestigatetheeffectsofcatalpolfrom

2、RehmanniaglutinosaLibosch.onbloodglucoseofalloxan-induceddiabeticmice.MethodsCatalpolinisteredfor2g/kgtoobserveitseffectsonbloodglucose,bloodlipidandglucosetoleranceinalloxan-induceddiabeticmice.ResultsCatalpolsignificantlydecreasedthebloodglucose,improvedtheoralglucosetoleranceandbloodli

3、pidlevelinalloxan-induceddiabeticmiceinadose-dependentmanner.ConclusionCatalpolhasobvioushypoglycemicactivityinalloxan-induceddiabeticmice.　　Keyicactivity;Diabetesmellitus　　中药地黄为玄参科植物地黄RehmanniaglutinosaLibosch.的新鲜或干燥块根，具有滋阴清热、补血止血等功效，临床应用极为广泛。地黄的主要化学成分为苷类，其中以环烯醚萜苷类为主，梓醇（化学结构式如图1）是其主要活性成分

4、之一，具有利尿、缓和泻下、降血糖、神经保护等生物活性〔1～4〕。但由于天然产物成分复杂多样，地黄中梓醇等环烯醚萜类化合物结构近似，极性较大，而且化学稳定性较差，增大了梓醇分离纯化的难度。因样品来源困难，限制了对梓醇生物活性的研究。本实验在解决了梓醇分离纯化工艺的基础上，首次在实验性糖尿病动物模型上观察了其降糖作用。　　图1梓醇的化学结构式（略）　　1材料与方法　　1.1样品梓醇样品由本实验室制备，其结构经ESI-MS，1H-NMR，13C-NMR鉴定，HPLC法测得样品的梓醇含量为96%。　　1.2动物KM小鼠，♂，(20±2)g，清洁级，由军事医学科学院实验动物中心提供

5、。合格证号：SCXK-(军)2002-001。　　1.3试剂盐酸二甲双胍购自天津中新药业股份有限公司新新制药厂；四氧嘧啶，Sigma产品；胆固醇试剂盒、高密度脂蛋白胆固醇试剂盒、甘油三酯试剂盒，南京建成生物工程研究所。　　1.4仪器GLUCOCARDII血糖仪，附加血糖试纸（ARKRAY，日本）；SABS-18型自动生化分析仪（意大利）。　　1.5方法　　1.5.1四氧嘧啶致糖尿病小鼠模型的制备取70只健康KM小鼠，随机分出8只为正常组动物。其余小鼠在禁食16h后（不禁水），尾静脉快速注射新鲜配制的2%四氧嘧啶生理盐水溶液，剂量为60mg/kg。正常对照组小鼠在禁食16h

6、后于尾静脉注射相应体积的生理盐水。上述小鼠经过72h的自由饮食后，于尾静脉取血用血糖仪测定血糖值，挑选血糖值大于16.7mmol/L的小鼠作为糖尿病小鼠。　　1.5.2动物分组与给药取40只造模成功的糖尿病小鼠按血糖值分层随机分为5组，每组8只：模型组，阳性药对照组（盐酸二甲双胍500mg/kg），梓醇高、中、低3个剂量组（200，100，50mg/kg）。从造模第4天开始给药，治疗组小鼠分别灌胃给予梓醇及盐酸二甲双胍，正常组和模型组小鼠灌胃给予相应体积的蒸馏水，1次/d，连续2周。　　1.5.3实验观测指标分别于给药前（0d）、给药第7天、给药第14天于尾静脉取血用血糖

7、仪测小鼠的血糖值。末次给药后小鼠禁食12h，口服葡萄糖2.5g/kg，尾静脉取血分别测定口服前（0h）、口服后0.5，1，2h的血糖值，并用梯形面积法计算糖耐量曲线下面积（AUC）。口服葡萄糖耐量实验后小鼠摘眼球取血，离心分离血清。用自动生化分析仪测定血清中甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）的含量。　　1.6统计学处理定量指标以±s的形式表示，对两组定量资料的结果分析，采用Student'st检验进行两组间均数的差异显著性检验。对单因素k（k＞2）水平设计实验结果，采用SPSS10.0统计软件