经带宁胶囊含量测定方法的改进

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1、经带宁胶囊含量测定方法的改进【关键词】囊含　　摘要：目的改进经带宁胶囊含量测定的方法。方法在原高效液相色谱(HPLC)法的基础上，采用流动相溶解对照品和提取样品以及提取方法的改变，并与原方法进行比较。结果采用20μl定量环进样，色谱峰峰形好，减少进样误差，使积分更准确，并且降低检验成本。结论改进后的方法操作简单，重现性好，测定结果准确可靠，更有利于产品质量的控制。　　关键词：经带宁胶囊；岩白菜素；高效液相色谱　　经带宁胶囊为苗族药，现已收载于《国家中成药标准汇编中成药地方标准上升国家标准部分》（外科、妇科分册）里，其所含的岩白菜素采用RPHPLC法进行测定。笔者

2、在测定该药含量时发现重现性小，且对色谱柱污染极大，故对此进行改进。通过实验，改用流动相稀释对照品、提取供试品且用20μl定量环进样，结果准确可靠，重现性好。现报道如下。　　1仪器与试剂　　美国ETTLERTOLEDO），台式离心机（上海手术器械厂）。经带宁胶囊由贵州世禧制药厂提供，岩白菜素对照品（批号：1532200001）由中国药品生物制品检定所提供；甲醇为色谱纯，水为纯净水（经减压过滤脱气）。　　2实验方法和结果　　2.1色谱条件［1］原方法实验条件不变。流动相：甲醇水（25∶75），流速1.0ml・min1，检测波长275nm，柱温：室温。　

3、　2.2　对照品溶液的制备精密称取岩白菜素对照品①0.01013g，②0.01006g，分别置100ml的容量瓶中，分别向①②两份对照品里加入流动相和甲醇使溶解，并稀释至刻度，即得对照品溶液①②。　　2.3供试品溶液的制备精密称取供试品分A，B，C，D四组，每组4份，每份约1g，分别置具塞三脚烧瓶中，精密加甲醇（A，B）和流动相(C，D)各25ml，称定重量。A，C超声2min，取出放冷，称定重量，分别用相应溶剂补足减失的重量，摇匀，用0.45μm的微孔滤膜过滤，即得；B，D超声30min，取出，放置过夜，称定重量，分别用相应溶剂补足减失的重量，离心3000r/

4、min，取上清液，用0.45μm的微孔滤膜过滤，即得。　　2.4对照品溶剂的考察分别精密吸取对照品溶液①②各5，10，20μl注入液相色谱仪。记录得色谱图，见图1～2。　　从色谱图可知：用流动相比用纯甲醇溶解对照品的色谱图更理想，定量更准确。同时其它色谱条件不便，改用不同的色谱柱也得到以上相同的结论。说明用流动相甲醇-水（25∶75）做溶媒比用纯甲醇做溶媒更理想。　　2.5线性关系的考察　　称取岩白菜素对照品适量，加流动相定量稀释得岩白菜素对照品浓度为：25，50，100，200，400μg・ml1系列浓度标准溶液，分别精密吸取以上标准溶液各20μ

5、l注入液相色谱仪分析，测定峰面积，以峰面积为纵坐标（Y），浓度为横坐标（X）作线性回归，得回归方程Y=28432X+7249（r=0.9998）。　　2.6供试品前处理方法的考察　　分别测定2.3项下的供试品溶液A，B，C，D测定。结果见表1。表1不同处理方法处理后的含量测定结果　　　从以上数据可看出用流动相做溶媒与用纯甲醇做溶媒提取，岩白菜素含量无明显差别，但是超声30min后放置过夜比只超声2h的岩白菜素含量稍高，因此采用流动相做溶媒,超声30min,静置过夜的方法不论是从定量的准确性，还是从成本节约上考虑，均比其它方法较优越。供试品溶液的制备方法采用“取装

6、量差异下的内容物，研细，取1g，精密称定，精密加流动相25ml，称定重量，超声30min，取出，放置过夜，称定重量，用流动相补足减失的重量，摇匀，离心（3000r/min），取上清液，用0.45μm的微孔滤膜过滤，即得”。　　2.7精密度和重复性实验　　精密吸取取线性关系考察项下的0.1mg・ml1的对照品溶液20μl注入液相色谱仪重复测定，岩白菜素含量的相对偏差为RSD=0.7%（n=6）。对同一样品重复进样20μl测定，岩白菜素含量的相对偏差为RSD=0.9%（n=6）。　　2.8回收率实验　　采用加样回收法，称取已知含量的经带宁胶囊供试品，加

7、入岩白菜素对照品，照2.6项下确定的供试品制备方法制备，HPLC法测定。结果见表2。表2　加样回收率结果（略）　　2.9稳定性取含量测定项的样品液，隔1.5h进样测定，连续考察9h，结果样品液9h内稳定，RSD=1.3%（n=7）。　　2.10样品含量测定样品含量测定。结果见表3。表3　样品含量结果（略）　　3讨论　　经带宁胶囊采用原方法测定含量时发现，样品对色谱柱污染较严重，一颗新的色谱柱最多对供试品溶液进样20次，且色谱柱柱效大大降低，并且每一次都比上一次有所降低，以至使定量的重复性很差；在对对照品进行测定时发现柱效与进样体积有关，并且影响特别大；样品超声时

8、间太长，不利于超声波清洗