睾丸扭转对大鼠生精能力的影响及维拉帕米的保护作用

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1、睾丸扭转对大鼠生精能力的影响及维拉帕米的保护作用【摘要】目的:探讨钙离子通道拮抗剂(维拉帕米,verapamil)对大鼠睾丸扭转复位后睾丸细胞损伤的保护作用。方法:选用出生1个月左右的健康雄性ＳＤ大鼠30只,随机平均分成3组，手术制作幼鼠睾丸扭转模型（720°,2h）。对部分扭转组应用生理盐水或钙离子通道拮抗剂(维拉帕米)。术后6个月处死,取两侧睾丸标本，测定睾丸NO含量、NOS活性，并制备细胞悬液，检测记录每样本中单倍体细胞占细胞总数百分比。结果:B组（扭转组）单倍体细胞占细胞总数明显下降，而且睾丸组织NO含量、NOS活性升高，维拉帕米可减轻上述变化。结论:维拉帕米可以提高睾丸组织单倍

2、体细胞的百分比，在一定程度上可以减轻睾丸组织损伤，对睾丸的生精能力有明显的保护作用。.L.编辑。【关键词】睾丸扭转;维拉帕米;流式细胞术;一氧化氮【ABSTRACT】Objective:Toinvestigatetheprotectiveeffectofverapamilonthetestisaftertesticulartorsioninrats.Methods:30healthymaleSpragueDanleyrats(onemonthold)lydividedequallyintothreegroups.Amodeloftesticulartorsion(720degree

3、,2hours)alsalineorCa2+channalblocker(verapamil)inistratedintheinterventiongroups.Sixmonthslaters,nitricoxide(NO),nitricoxidesynthaseactivity(NOS)easuredinbothtestisoftherats.AndtheDNAcontenteasuredbyfloetry,thepercentageofmonoploidoreinthetorsiveside;Thepercentageofmonoploidsignificantlydecreased

4、intheBgroup(testiculartorsion),verapamilcouldreducetheextentofthesechanges.Conclusion:Theverapamilcouldraisethepercentageofmonoploidintestisandreducetheextentofdamages.【KEYedimachine及其配套产品制成单细胞悬液。用PBS分别洗涤三次标本，弃去上清液，用PBS调整细胞浓度到1.0×106细胞/ml。①分别取100μl样本，加入CycleTestTMPlusDNA试剂盒A液250μl，轻轻摇匀不要震荡，室温静置10

5、min，②分别加入200μlB液，轻轻摇匀不要震荡，室温静置10min，③分别加入200μlC液，轻轻摇匀不要震荡，低温（2～8℃）避光静置10min。加入C液2h内用流式细胞仪（FACScalibur)Cellquest软件测定。用ModFITLTformacv3.0软件分别进行数据分析,记录每样本中单倍体细胞占细胞总数百分比。1.3统计学分析按组别对流式细胞仪检测结果予以方差分析,各组结果两两比较,所有结果以SPSS统计软件包处理。2结果2.1维拉帕米对睾丸扭转NO含量及NOS活性影响B组NO含量、NOS活性，扭转侧和对侧分别与正常对照组比较，NO含量、NOS活性均显著升高（P＜0.

6、05）；扭转侧较对侧变化显著（P＜0.05）。C组与B组扭转侧和对侧分别比较，NO含量、NOS活性均降低（P＜0.05）(表1)。2.2维拉帕米对睾丸扭转单倍体细胞的作用表1各组NO含量、NOS活性比较注：*P＜0.05，**P＜0.01，vscontrol；△P＜0.05，vsB组对侧;#P＜0.05，vsB组扭转；+P＜0.05，vsB组对侧。A组、B组和C组单倍体细胞分别占细胞总数的(72.9±1.9)%、(50.6±2.2)%、和(68.1±1.6)%。各组结果两两比较,统计学上差异均有显著性意义,说明青春期前睾丸扭转影响大鼠性成熟后的生精能力,钙通道拮抗剂(维拉帕米)在一定程度

7、上可以减轻组织损伤。3讨论正常睾丸组织有防御氧自由基损伤的机制，如SOD、GSH等能迅速清除O2－、OH－等自由基，而在再灌注组织中SOD、GSH等由于大量消耗从而降低，而NO在缺血再灌注损伤中具有双重作用[2，3]。本实验表明，一侧睾丸扭转复位后（B组）扭转侧和对侧睾丸NO含量、NOS活性升高，扭转侧较对侧变化显著；说明对侧睾丸损伤是由于睾丸复位后再灌注损伤引起。NO过量产生是对侧睾丸损伤的重要原因,与王晓康报道一致[4]。应用维