维拉帕米对大鼠肠缺血再灌注损伤的作用及机制

维拉帕米对大鼠肠缺血再灌注损伤的作用及机制

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1、-福建医科大学硕士研究生毕业论文中文摘要目的:观察维拉帕米注射液对大鼠肠缺血-再灌注损伤后肠粘膜组织的作用,并探讨其作用机制。方法:实验将21只健康雄性SD大鼠随机分为3组(n=7):假手术组(A组)、缺血再灌注组(I/R组)(B组)和维拉帕米干预组(C组)。通过对大鼠肠系膜上动脉夹闭45min及开放2h复制肠缺血-再灌注损伤模型,维拉帕米干预组于再灌注前10min经尾静脉缓慢注射0.5g/L维拉帕米注射液1mg/kg,再灌注2h后处死动物,取各组小肠组织行HE染色进行小肠粘膜病理损伤Chiu氏评分,并行免疫组化(SP酶标法)检测TNF-α、Bax、

2、Bcl-2,进一步应用显微图像分析系统(ImageProPlus)检测其表达。结果:1.假手术组小肠粘膜绒毛上皮细胞排列整齐,无明显炎症细胞浸润及毛细血管扩张、淤血,病理损伤Chiu氏评分0.57±0.35,TNF-α、Bax和Bcl-2表达光密度(OD)值分别是0.084±0.008、0.112±0.013和0.297±0.012;缺血再灌注组小肠粘膜组织结构破坏严重,绒毛顶端部分破损,固有层炎症细胞浸润明显,病理损伤Chiu氏评分3.29±0.57,TNF-α、Bax和Bcl-2表达光密度(OD)值分别是0.219±0.012、0.290±0.0

3、13和0.106±0.008;且缺血再灌注组小肠粘膜组织病理损伤Chiu氏评分、TNF-α、Bax表达较假手术组明显增加(P<0.01),Bcl-2表达显著性减少(P<0.01)。2.维拉帕米干预组小肠粘膜毛细血管轻度扩张、淤血,部分上皮下间隙增大伴随上皮层同固有层中度分离,病理损伤Chiu氏评分2.05±1.23,TNF-α、Bax和Bcl-2表达光密度(OD)值分别是0.121±0.008、0.200±0.010和0.205±0.008,且与缺血再灌注组(I/R组)相比,---1---福建医科大学硕士研究生毕业论文其小肠粘膜组织结构破坏减轻,病理

4、损伤Chiu氏评分、TNF-α、Bax表达有显著性减少(P<0.01),Bcl-2表达显著性增加(P<0.01)。结论:1.缺血再灌注后可引起小肠粘膜明显损伤。2.钙通道阻滞药维拉帕米可以明显减轻大鼠肠缺血再灌注所致的小肠粘膜病理损伤程度。3.钙通道阻滞药维拉帕米对大鼠肠缺血-再灌注损伤保护的可能机制有:①抑制细胞促炎介质TNF-α的释放,阻止再灌注后细胞凋亡及坏死;②阻止细胞内钙超载,下调促凋亡蛋白Bax的表达,上调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,进而抑制小肠粘膜细胞凋亡。【关键词】再灌注损伤小肠维拉帕米TNF-αBcl-2Bax---2---福建医科

5、大学硕士研究生毕业论文AbstractObjective:ToinvestigatetheeffectofVerapamil,acalciumchannelblockers(CCBs),ongutinjuryfollowingintestinalischemiareperfusioninratsandthemechianismofaction.Methods:21maleSDratswererandomlydividedinto3groups(n=7):Sham-operationgroup(Agroup)、Ischemiareperfusiongr

6、oup(I/Rgroup)(Bgroup)andVerapamilgroup(Cgroup).Intestinalischemia-reperfusionwasinitiatedbyclampingthesuperiormesentericartery(SMA)45minfollowedbyreperfusion.TheanimalsinVerapamilgroupweregiven0.5g/Lverapamil1mg/kgat10minbeforereperfusionthroughthecaudalvein.2hourslater,termina

7、lileumwastakentoinvestigatehistologicalchangeandtheexpressionsofTNF-α、BaxandBcl-2inthesmallbowelcell.Results:1).IntestinalmucosaintheSham-operationgroupwasalmostnormal,inwhichhistopathologicinjuryscoreswere0.57±0.35,opticaldensity(OD)ofTNF-α,BaxandBcl-2were0.084±0.008、0.112±0.0

8、13and0.297±0.012;IntestinalmucosallesionsintheI/Rgroup

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