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1、薏苡仁酯对胃癌BGC823细胞侵袭迁移能力的影【摘要】 目的:研究不同浓度薏苡仁酯对胃癌BGC823细胞株的侵袭、迁移能力及CD44、CD133表达的影响。方法:以不同浓度薏苡仁酯作用于BGC823细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率,黏附试验、TransRNA表达水平。结果:薏苡仁酯可抑制BGC823细胞增殖,其抑制效应呈剂量时间依赖性;经薏苡仁酯作用后BGC823细胞的侵袭、迁移及黏附能力降低;CD44、CD133mRNA的表达与薏苡仁酯浓度亦呈负相关。结论:薏苡仁酯能降低胃癌BGC823细胞株的侵袭、迁移、黏附能力,其机制可
2、能与通过下调CD44、CD133表达有关。【关键词】薏苡仁酯;胃癌;侵袭;迁移;黏附;CD44;CD133 EffectsofcoixenolideoninvasionandmetastasiscapacityofgastriccarcinomaBGC823cellsinvitroanditsmechanism [Abstract]Objective:Toinvestigatetheeffectofcoixenolideonadhesion,invasionandmetastasisofgastriccarcinomaBGC823c
3、ellsinvitroanditsmechanism.Methods:MTTassayinetheeffectofcoixenolideonproliferationofBGC823cells.MatrigeladhesionassayandTransberedtodeterminetheadhesion,invasionandmigratorycapacityofthecells.RTPCRRNAinBGC823cells.Results:CoixenolidecouldinhibittheproliferationofBGC82
4、3cellsedependenteffects.Coixenolidesignificantlyinhibitedadhesion,invasionandmigratorycapacityofBGC823cellsinvitro.Aftercoixenolidetreatmentfor24h,theexpressionlevelofCD44andCD133mRNAigration,invasionandadhesioncapacityofBGC823cellsinvitro.Theinhibitioneffectmayberelate
5、dtodoetastasis;adhesion;CD44;CD133 薏苡仁酯注射液是一种从传统中药薏苡仁中提取的抗肿瘤新药,研究[1]证实,它对多种肿瘤细胞有抑制增殖、促进凋亡、抑制肿瘤血管生成等作用。目前有研究[2-3]提示,肿瘤干细胞表面标记物CD44、CD133与胃癌侵袭、转移等恶性生物学行为可能有密切相关。薏苡仁酯对CD44、CD133的影响尚未见报道。本研究旨在观察薏苡仁酯对胃癌细胞株BGC823黏附、侵袭、迁移等生物学行为及CD44、CD133表达的影响。 1材料与方法 1材料 1.1.1细胞株及培养液 胃癌细胞株
6、BGC823由中国科学院上海细胞生物学研究所引进,1640培养基购自GIBCO公司,胎牛血清购自杭州四季青公司。 1.1.2主要药品及试剂 薏苡仁酯注射液由浙江康莱特药业有限公司提供,四氮唑蓝、二甲基亚砜均为Sigma公司产品,Trans孔径),Trizol为美国Invitrogen公司产品,逆转录试剂盒为美国Promiga公司产品,Taq酶为日本Takara公司产品,引物合成由上海生工生物公司提供。PCR扩增仪型号为Eppendorf7501S,凝胶成像仪为北京天能公司产品。 1.2方法 1.2.1细胞培养 人胃癌细胞株BGC
7、823以含10%胎牛血清的RPMI1640在37℃、体积分数为5%的CO2培养箱中培养,每天换液1次,0.25%胰酶消化传代。 1.2.2MTT法检测薏苡仁酯对BGC823细胞增殖的影响 将对数生长期细胞稀释为5×104ml-1的密度,每孔200μl接种于96孔细胞培养板。薏苡仁酯组的终浓度均依次为5、10、15μl·ml-1,同时设立阴性对照组。分别培养24、48和72h后检测MTT值,实验终止4h前加入四氮唑蓝溶液20μl。弃去上清液,每孔加入DMSO150μl,在振荡器上振荡10min后用酶标仪检验A490nm值。抑制率=(平
8、均对照组A490nm-平均药物组A490nm)/平均对照组A490nm×100%。实验重复3遍。利用IC50计算器计算出IC50。 1.2.3细胞黏附试验 分别收集经5μl·