骨碎补总黄酮对实验性兔膝骨性关节炎软骨及滑膜的影

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1、骨碎补总黄酮对实验性兔膝骨性关节炎软骨及滑膜的影【摘要】目的研究骨碎补总黄酮对兔膝骨性关节炎的治疗效果，探讨其防治骨性关节炎的可行性。方法32只新西兰大白兔随机分为正常对照组、模型对照组、骨碎补总黄酮组和维固力组。以关节制动法建立兔膝骨性关节炎模型。成模后灌胃给药，8周后镜下观察骨碎补总黄酮对动物模型关节软骨、滑膜组织形态学及基质金属蛋白酶-3表达的影响。结果骨碎补总黄酮组与模型对照组比较滑膜及软骨组织形态学改变明显较轻（P<0.01），滑膜、软骨组织中基质金属蛋白酶-3表达减少（P<0.01）；骨碎补总黄酮组与维固力

2、组相比，各指标间差异无统计学意义（P>0.05）。结论骨碎补总黄酮能够减轻兔膝骨性关节炎的软骨退行性变和滑膜炎症，其作用机制可能与调节基质金属蛋白酶-3表达有关。【关键词】骨性关节炎；骨碎补总黄酮；软骨；滑膜；基质金属蛋白酶-3；兔Abstract:ObjectiveToobservetheeffectsofosteopractictotalflavone(OTF)ontreatmentofosteoarthritisinexperimentalrabbitsandtoexplorethefeasibilityofusing

3、OTFinthepreventionandtreatmentofosteoarthritis.Methods32rabbitslydividedintonormalgroup,modelcontrolgroup,OTFgroupandGlucosamineSulfateCapsulesgroup.Therabbitosteoarthritismodelmobilizingthekneesofrabbit,folloatrixmetalloproproteinases(MMP)-3incartilageandsynovialodel

4、group(Ｐ<0.01).ThelevelsofMMP-3incartilageandsynoviadecreased.Thereodelgroup(Ｐ<0.01),ineSulfateCapsulesgroupodel,ofechanismisrelatedtotheadjustmentofthelevelsofMMP-3.Keyetalloproteinases-3;rabbit骨性关节炎(osteoarthritis,OA)是一种慢性退行性关节疾病，以关节软骨退变及继发性骨质增生和滑膜改变为主要特征。目前，我国

5、已进入老龄化社会，OA的发生也日益增多。骨碎补总黄酮是水龙骨科植物干燥根茎中提取的黄酮类化合物，研究发现骨碎补总黄酮可以抑制巨噬细胞分泌细胞因子［1］。本研究通过观察骨碎补总黄酮对实验性兔膝骨关节炎软骨、滑膜组织形态变化的影响，同时采用免疫组化法对关节软骨及滑膜中金属蛋白酶-3（MMP-3）的表达进行检测，探讨骨碎补总黄酮治疗骨性关节炎的机制，为今后临床应用骨碎补总黄酮治疗骨性关节炎提供实验依据。1材料和方法1.1实验动物6月龄新西兰大白兔32只，雌雄不限，平均体重（2.0±0.2）kg，由徐州医学院实验动物中心提供。室温下饲养，

6、自由摄食、饮水。1.2主要试剂和设备骨碎补总黄酮胶囊(北京歧黄制药公司，0.25g/粒),维固力(爱尔兰罗达药厂，0.25g/粒)，光学显微镜(OLYMPUS)，自动包埋机及石蜡切片机(LEICA)，MMP-3免疫组化检测试剂盒(武汉博士德)。1.3动物OA模型制备采用膝关节伸直位制动法制作兔膝骨关节炎动物模型，将实验动物的左膝用石膏固定于伸直位，6周后去除石膏。建模成功标准：造模侧膝关节间隙较健侧变窄，患膝关节主、被动活动受限；大体解剖可见关节滑膜充血，关节表面失去光泽、粗糙、溃疡形成；镜下滑膜细胞增生、滑膜下层纤维增生。此动物

7、OA模型的病理学变化与人类OA相似。1.4动物分组及处理32只新西兰大白兔随机分为正常对照组、模型对照组、骨碎补总黄酮组和维固力组，每组8只。模型动物去除石膏即日开始灌胃给药，每日1次，共计8周。骨碎补总黄酮与维固力2种药物制成溶液，每日用量根据Meeh-Rubner公式A=K×Ｗ2/3×10-4计算，按成人（60kg）体表面积与家兔体表面积换算。正常对照组每日以生理盐水6ml·kg-1灌胃；模型对照组每日以生理盐水6ml·kg-1灌胃；骨碎补总黄酮组每日按35mg·kg-1剂量给予骨碎补总黄酮溶液(6g·L-1)灌胃，相当于成人

8、剂量0.75g·d-1；维固力组每日按69mg·kg-1剂量给予维固力溶液（12g·L-1）灌胃，相当于成人剂量1.5g·d-1。灌胃给药8周后，耳缘静脉栓塞法处死动物。取膝关节股骨髁及部分滑车部位的软骨和滑膜制作光镜标本，常规苏木精-伊红染色，中