补肾化瘀祛痰方对雄激素致不孕大鼠卵巢局部调控因子

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1、补肾化瘀祛痰方对雄激素致不孕大鼠卵巢局部调控因子【摘要】目的:观察补肾化瘀祛痰方(BushenHuayuQutanRecipe,BHQR)对雄激素致不孕大鼠(androgensterilizedrat,ASR)卵巢局部调控因子的影响。方法:选择9日龄幼年SD雌性大鼠105只,随机分为病理模型组(90只)和溶媒对照组(15只),丙酸睾丸酮诱导形成ASR。造模成功的30只大鼠随机分为中药干预组和模型对照组。中药干预组用BHQR灌胃干预,模型对照组及溶媒对照组给予蒸馏水灌胃处理,疗程30d。疗程结束后

2、观察大鼠性周期情况,用放射免疫方法检测血睾酮和胰岛素(insulin,INS)含量,用免疫组织化学方法检测卵巢组织抑制素(inhibin,INH)、胰岛素样生长因子Ⅰ(insulinlikegroedicine,onlocalovarianfactorsinandrogensterilizedrats(ASR).Methods:Onehundredandfive9dayoldSDratslydividedintonormalcontrolgroup(15rats)andASRgroup(

3、90rats).ASRodelofASRlydividedintountreatedgroupandBHQRtreatedgroup.Thereinisteredalcontrolanduntreatedgroupsinisteredtestosteroneandinsulin(INS)easuredbyradioimmunoassay.Theinhibin(INH)level,andtheexpressionsofinsulinlikegroinedbyimmunohistochemical

4、method.Results:NoneoftheASRovulatedandalltheratsinthenormalcontrolgroupovulated.TherateofovulationinBHQRtreatedgroupconcentrationsoftestosteroneandINSintheuntreatedgroupalcontrolgroup(P<0.05),andtheserumconcentrationsoftestosteroneandINSinBHQRtre

5、atedgroupalcontrolgroup(P<0.01),andthelevelsofovarianINH,IGFⅠandVEGFinBHQRtreatedgroupotingovulation,andtheeffectsofBHQRonbalancingtheinternalenvironmentofovarymaybeduetothereductionofserumINSlevelanddecreaseintheexpressionsofovarianINH,IGFⅠandV

6、EGF.  Keye,PCOS),又称SteinLeventhal综合征,是一种发病多因性、临床表现多态性疾病,以长期无排卵和持续高雄激素为主要特征[1]。目前关于PCOS的发病机制学说众多,但确切病因仍不明确,且缺乏理想的治疗方法。西医主要有手术和药物等治疗方法,但由于手术创伤较大,而西药长期服用毒副作用较大,故临床应用受到一定的限制。中医古籍并无PCOS这一病名,根据临床表现,应归属于月经后期、闭经和不孕症等范畴,目前中医在治疗PCOS方面已显示一定优势。补肾化瘀祛痰方(BushenHuay

7、uQutanRecipe,BHQR)是临床总结的治疗PCOS的有效方剂[2],本研究拟从血睾酮、胰岛素(insulin,INS)、卵巢局部调节因子抑制素(inhibin,INH)、胰岛素样生长因子Ⅰ(insulinlikegrol的溶液;大鼠胰岛素试剂盒(美国LINCOResearch公司);睾酮试剂盒(天津九鼎医学生物工程有限公司);兔抗鼠IGFⅠ多克隆抗体(LabvisionNeoMarkers公司);兔抗鼠抑制素α多克隆抗体(武汉博士德生物工程有限公司);兔抗鼠VEGF多克隆抗体(福

8、州迈新生物技术开发公司)。  1.3BHQR水煎浓缩剂的制备  取BHQR饮片置煎煮容器内,加相当于药材量5~7倍的冷水浸泡30min,煮沸40min,过滤。药渣加3~5倍量水继续煎煮,煮沸30min,过滤。合并两次滤液,于水浴上浓缩成相当于生药量2.56g/ml的药液,冷却装入灭菌药瓶,置4℃冰箱备用。  1.4动物模型制备  按随机数字表法将105只9日龄雌性幼鼠分为病理模型组和溶媒对照组,其中90只病理模型组幼鼠于分组当日在颈背部皮下一次性注射丙酸睾丸酮注射液0.05ml(l

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