不育患者精液中paf的变化及外周血pbmc上pafr的表达

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1、不育患者精液中PAF的变化及外周血PBMC上PAFR的表达：古衍，姚吉龙，姜向坤，张春晖，凌奕【摘要】目的：探讨男性不育患者精液血小板活化因子(PAF)、血小板活化因子乙酰水解酶(PAFAH)活性的变化,以及外周血中单个核细胞(PBMC)PAF受体(PAFR)的表达。方法:对10例男性不育患者(其中5例为精液异常组，5例为不明原因不育组)采用生物法检测精液中PAF含量,酶水解底物显色法测定PAFAH活性,流式细胞仪检测PBMC上PAFR的表达。并与5例有正常生育功能的男性健康体检者对照。结果:精液异常组PAF含量(1.87±0.76)μg/L,PAFAH活性(23.56±6.8

2、6)μmol/(min·L)、PBMC上PAFR的表达与健康体检者比较差异有非常显著性意义(P<0.01);不明原因不育组PAF含量(2.12±0.81)μg/L,PAFAH活性(21.65±5.13)μmol/(min·L)、PBMC上PAFR的表达与健康体检者比较差异也有非常显著性意义(P<0.01);精液异常组与不明原因不育组相比差异无显著性。结论:男性不育患者精浆PAF降低、PAFAH升高，PAF、PAFAH、PAFR三者在男性不育的发生中可能起重要作用。【关键词】不育，男(雄)性;精液;血小板;血小板活化因子;乙酰水解酶;血小板活化因子受体　　[ABSTR

3、ACT]Objective:Tostudytheconcentrationofplateletactivatingfactor(PAF)andtheactivationofPAFAcetylhydrolase(PAFAH)insemaofinfertilemanasen.Methods:Tenmenenalsemenandfivemenenalfertilityabilityeninedbytheinedbythechangesofsubstrateassay.TheexpressionofPAFRonPBMCinedbycytofloetry.Results:Theresult

4、sshoalsemenaresignificantlyloore,theexpressionofPAFRonPBMCinducedmarkedlyinperipheralbloodofmenenalsemenandthemenenenandtheexpressionofPAFRonPBMCareobviouslyreduced,arkedlyincreased.ThechangesofPAFandPAFAHandtheexpressionofPAFRinPBMCarerelatedtothemaleinfertility.　　[KEYale，infertility;Semen;Pl

5、atelet;Plateletactivatingfactor;Acetylhydrolase;Plateletactivatingfactorreceptor　　据不完全统计，在我国约10对夫妇中有1对存在不同程度的生育障碍，由男性因素及不明原因不孕导致的生育障碍约占30%。精子功能在男性生育中占据重要地位。大量的内源性因子可以调节精子生育的潜能，其中血小板活化因子(plateletactivatingfactor,PAF)是目前研究较活跃的细胞因子之一，本实验主要探讨男性不育患者精液PAF的变化及外周血单个核细胞PAF受体的表达,旨在为男性不育患者的辅助诊断及新的防治措施研究提供依

6、据。　　1材料与方法　　1.1研究对象　　2006年10月～2007年12月在深圳市妇幼保健院及深圳流花医院不孕不育门诊就诊的男性不育患者10例(精液异常5例，不明原因不育5例)，不育年限3～10年，年龄24～40岁。5例有正常生育功能的健康自愿者5例，年龄28～39岁。3组在年龄上的差异无统计学意义，且均无合并症。　　1.2实验方法　　1.2.1试剂与仪器PAF标准品(Sigma公司产品)，PAFAH检测试剂盒和鼠抗人PAFRIgG(Cay2man产品，晶美生物公司代理)，FITC标记的兔抗鼠IgG,流式细胞仪(BD)等。　　1.2.2PAF测定受试者禁欲3～5d，在室验室以手淫法取

7、精液，按文献[1,2]经双层纱布过滤后，取精液1mL，加无水吡啶和醋酐各10μL，加入4mL甲醇中，旋涡混合，离心后吸取上清液加入氯仿和双蒸水1mL，用生物法检测PAF含量。　　1.2.3血浆PAFAH活性检测取精浆2mL，浓缩为0.5mL，按试剂盒操作,酶标仪读取不同时间的A值，用PAFAH标准品对照，计算出各样本PAFAH的活性。　　1.2.4外周血PBMC上PAFR的表达　采静脉血1mL，分离出PBMC，取