乙肝后肝癌发生过程中生长抑素受体演变及相关因素研究

乙肝后肝癌发生过程中生长抑素受体演变及相关因素研究

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时间:2018-10-30

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1、乙肝后肝癌发生过程中生长抑素受体演变及相关因素研究摘要:目的希望通过研究能够找到更好的治疗方案,遏制乙肝病毒的感染,进而提高患者的生活质量,增加患者的寿命。方法利用免疫组化法和放射免疫法来分别检测身体中的SSTR1-5蛋白表达以及SST含量,之后再利用统计学的方法来进行处理。结果研究的40例肝癌的患者的类型都是中-低分化,而且在癌旁组织中每个患者都有不一样的非典型增生的现象出现。结论通过研究发现,肝癌前之所以会产生病变主要是因为肝细胞出现了不典型增生的现象,而且不典型增生的现象主要出现在癌旁组织中,对患者影响非常大。关键词:乙肝;肝癌;生长抑素

2、受体演变;相关因素;研究原发性肝细胞癌,英文缩写为HCC,这种病症在我国肿瘤患者中比较普遍,而且发病率近些年来越来越高,早已引起了医学界的重视。在我国原发性肝细胞癌患者中将近九成是由于乙肝病毒引起的,再加之原发性肝细胞癌预防处理相对来说比较差,因此研究更好的治疗方法无论是对患者本身,还是对医学研究意义都十分重大。在乙肝后肝癌发生时,其生长抑素受体会发生演变,接下来,笔者就这种演变及其相关因素进行有效的研究。1资料与方法1.1一般资料根据研究目的选择出5名自愿参与研究的人员,其肝组织经过检查并没有任何病变;之后又选择出14例患者,其肝组织有些许病

3、变,属于慢性肝炎;然后再选择出40例患者,其肝组织病变相对严重,属于肝硬化,这40例患者中有4例属于良性肝病,已经做完手术;最后在选择80例患者,其肝病变主要属于肝癌癌旁组织以及肝癌组织,这些患者的年龄范围阔度比较大,21〜79岁。这些患者都是来自于一个医生,这样便于研究,因为医生比较清楚每位患者的情况。1.2主要试剂主要试剂有以下几种:①RNA样品储存液以及提取试剂;②特异性引物;③试剂盒,要准备很多种类的试剂盒,每一种类的试剂盒的作用不同,因此在研究时,要做好标签,以免发生事故,其中最主要的试剂盒有生长抑素放免试剂盒以及浓缩型DAB试剂盒。

4、上述选择的试剂一定要确保质量,无污染,要出自正规的企业,在试剂进入实验之前,就要做好全面的检测,确保不出现任何的意外情况,否则不仅影响研究结果,还会造成严重的后果。1.3方法1.3.1逆转录一聚合酶链反应检测SSTR1-5亚型mRNA的表迗取手术切除的新鲜标本组织存储于RNA储存液中,-20°C冻存备用。按试剂盒说明步骤,用TRIZOLReagent提取总RNA。2%琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整性。将提取的RNA溶于0.1%DEPC去离子水中,核酸蛋白定量仪(BloRADsmartSPec丁M3000)检测RNA纯度及定量,0D值)1.8的标本

5、进行实验。1.3.2免疫组化法检测SSTR1-5蛋白表达取手术切除的新鲜标本组织,以10%中性甲醛溶液固定,常规石蜡包埋,连续切片备用。组织切片经常规脱蜡水化后;高压锅中抗原修复3min;按内源性生物素阻断试剂盒说明操作阻断内源性生物素;3%水:阻断内源性过氧化氢酶15min;非免疫源性血清封闭IOmin;加一抗工作液(SSTR1-5浓度均为1:300)孵育4°C过夜;生物素化二抗37°C孵育15min;过氧化氢酶标记的亲和素孵育5min;现配DAB试剂,显影5〜lOmin,棕褐色染色为阳性,镜下观察终止反应;苏木精染色smin,盐酸一酒精分化

6、5s,碳酸银反蓝lmin;常规脱水透明,中性树胶封片;01五厂队USBX41仪器照相。实验以手术切除的人小肠组织为阳性对照,以PBS替代一抗为空白对照。阳性表达强度以阳性染色光密度值(I0D值)表示,在400倍放大条件下,每张切片随机取5个视野计数阳性细胞,Image-ProPlus4.5软件定量测定阳性染色I0D值,取均值为该标本的I0D值;每高倍镜(400X)视野3讨论从上述的试验中,我们可以总结出乙肝后肝癌发生过程中生长抑素受体演变的基本过程主要有5个步骤,第一是正常肝脏,但是如果没有保护好,肝脏会发生病变进而变成慢性肝炎,如果不及时治疗

7、最终会形成肝硬化,到达这一程度后,肝脏就会发生癌前病变,这一阶段已经非常危险,如果不能及时的救治,而是放任不管,就会形成HCC,也就是原发性肝癌。从这一演变过程中,我们可以知道,肝脏如果不是天生因素,发生病变的原因主要都是由于人们自身没有保护肝脏的意识。通过研究发现,当肝脏已经属于癌前病变时,最显著的特征就是干细胞出现了不典型增生的现象,而且这种不典型增生通常长在癌旁组织中,本文研究所选择的癌前病变患者中,其癌旁组织都存在着这种不典型增生的现象。通过大量的试验研究发现SST对很多种类的细胞的增值都有产生一种非常明显的抑制作用,如果肝细胞所处的环

8、境非常好,而且没有其他病理因素的影响,通常情况下是不会出现增生现象,但是从慢性肝炎一直到肝癌这几个阶段,肝细胞就会逐渐的出现增生的现象。SST之所以能

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