βcatenin， cyclind1及cmyc在肝细胞癌中的表达

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1、βCatenin，cyclinD1及cmyc在肝细胞癌中的表达【摘要】目的探讨βCatenin、cyclinD1及cmyc蛋白的表达与肝癌临床病理参数的关系。方法采用EnVisionTMplus免疫组织化学方法研究βCatenin、cyclinD1及cmyc蛋白在52例HCC及癌旁肝组织中的表达情况。结果52例HCC中βCatenin、cyclinD1及cmyc蛋白染色阳性率分别为55.8%、48.1%及53.8%，癌旁肝组织的阳性率为36.5%、25.0%及32.7%，βCatenin、cyclinD1及cmyc在HCC及癌旁肝组织两者间有显着性差异(P<

2、0.05)。在HCC中βCatenin的阳性表达与cyclinD1、cmyc的阳性表达密切相关（Ｐ=0.0108,r=0.3920；Ｐ=0.0295,r=0.3406）且呈正相关；βCatenin、cyclinD1及cmyc在人肝癌组织中的检出率与肝外转移、术后复发及肿瘤分化程度明显有关（Ｐ<0.05），cyclinD1的检出率与门静脉癌栓也明显有关（Ｐ<0.05），βCatenin的检出率与临床分期和门静脉癌栓也有显著性差异（Ｐ<0.05）。结论βCatenin、cyclinD1及cmyc蛋白的过表达可促使肝癌细胞增殖,使肝癌细胞具有更强的侵袭力，与

3、肝癌的发生发展关系密切。【关键词】肝细胞癌βCatenincyclinD1cmyc免疫组织化学　　0引言　　β连环蛋白(βCatenin)是一种重要的胞内蛋白，是arkers公司；即用型非生物素免疫组化EliVisionTMplus检测试剂盒购自福州迈新生物技术有限公司。　　1.2方法　　1．2．1βCatenin、cyclinD1及cmyc的免疫组化检测　　标本常规用10%甲醛固定、石蜡包埋，制成4μm连续切片后，进行免疫组化EliVisionTMplus法染色，主要步骤如下：切片脱蜡至水，高压修复1.5min，阻断内源性过氧化物酶20min，正常非免疫血清封闭30mi

4、n，滴加Ⅰ抗在室温孵育1h，滴加50μl聚合物增强剂A，室温孵育20min；滴加50μl酶标抗鼠/兔聚合物B，室温孵育30min；新鲜DABH2O2溶液显色，苏木精复染。以已知阳性反应片作阳性对照，阴性对照采用PBS替代Ⅰ抗进行同步染色。　　1．2．2临床随访观察　　所有病例术后进行常规的放疗和（或）化疗，并进行追踪随访１年。每个月或信访，每月定期复查肝功能及AFP、TSGF，术后每隔3个月复查CT，了解有无复发，术后1年了解生存情况。52例患者中50例有随访资料，其中14例在随访半年出现复发，12例在随访1年死亡。　　1．2．3结果判定　　染色结果观察采用双盲法，由两位病理科医生

5、在不知病理分级与临床资料的情况下读片，每个切片察五个视野（400倍）计算阳性细胞数，计算总细胞数不少于1000个，按阳性细胞所占百分数分为：阳性细胞率<5%为阴性（-）；5%～24%为弱阳性（+）；25%～50%为阳性（++）；>50%为强阳性（+++）。　　1.3统计学分析　　用SPSS10.0软件进行χ2检验；相关分析采用Pearson法，P<0.05为有显著性差异。　　2结果　　2.1βCatenin、cyclinD1及cmyc蛋白的表达情况　　βCatenin蛋白表达在癌组织中表现为细胞质或核内沉积，而在癌旁组织主要表现为均匀分布于细胞膜，仅极个别标本

6、中有胞质极弱着色，细胞核无染色。肝癌标本βCatenin蛋白阳性染色占55.8%(29/52)，而癌旁肝组织阳性率为36.5%(20/52)，组间有统计学意义(P<0.05)，见表1、图1。　　cyclinD1阳性染色定位于细胞核中，阳性细胞染色呈散在或片状分布。HCC中48.1%(25/52)呈阳性表达，而癌旁组织中明显低，仅25.0%(13/52)，组间有明显差异(P<0.05)，见表1、图2。　　cmyc蛋白定位于细胞浆内,呈弥漫性分布。在HCC中53.8%(28/52)为阳性表达，癌旁组织中阳性为32.7%(17/52)，组间有显着性差异(Ｐ<0.05)

7、，见表1、图3。　　表1βCatenin、cyclinD1及cmyc蛋白在肝癌组织及其癌旁肝组织中的表达（略）　　*P<0.05　　2.2βCatenin、cyclinD1及cmyc在HCC表达间的相关性　　在肝癌组织中βCatenin的阳性表达与cyclinD1的阳性表达密切相关（P=0.0108,r=0.3920）,与cmyc的阳性表达也密切相关（Ｐ=0.0295,r=0.3406），呈正相关，见表2。　　2.3βCatenin、c