βcatenin， cyclind1及cmyc在肝细胞癌中的表达

《βcatenin， cyclind1及cmyc在肝细胞癌中的表达》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、βCatenin，cyclinD1及cmyc在肝细胞癌中的表达【摘要】目的探讨βCatenin、cyclinD1及cmyc蛋白的表达与肝癌临床病理参数的关系。方法采用EnVisionTMplus免疫组织化学方法研究βCatenin、cyclinD1及cmyc蛋白在52例HCC及癌旁肝组织中的表达情况。结果52例HCC中βCatenin、cyclinD1及cmyc蛋白染色阳性率分别为55.8%、48.1%及53.8%，癌旁肝组织的阳性率为36.5%、25.0%及32.7%，βCatenin、cyclinD1及cmyc在HCC及癌旁肝组织两者间有显着性差异(P&

2、lt;0.05)。在HCC中βCatenin的阳性表达与cyclinD1、cmyc的阳性表达密切相关（Ｐ=0.0108,r=0.3920；Ｐ=0.0295,r=0.3406）且呈正相关；βCatenin、cyclinD1及cmyc在人肝癌组织中的检出率与肝外转移、术后复发及肿瘤分化程度明显有关（Ｐ<0.05），cyclinD1的检出率与门静脉癌栓也明显有关（Ｐ<0.05），βCatenin的检出率与临床分期和门静脉癌栓也有显著性差异（Ｐ<0.05）。结论βCatenin、cyclinD1及cmyc蛋白的过表达可促使肝癌细胞增殖,使肝癌细胞具有更强

3、的侵袭力，与肝癌的发生发展关系密切。【关键词】肝细胞癌βCatenincyclinD1cmyc免疫组织化学　　0引言13　　β连环蛋白(βCatenin)是一种重要的胞内蛋白，是Wnt信号转导通路中致癌的关键分子，其降解障碍致使胞质内游离的βCatenin积累，通过与Tcf／lef结合进入胞核，激活下游靶基因cmyc和cyclinD1等的转录，引起细胞增殖和分化失控，导致肿瘤发生[1]。βCatenin也是构成粘附连接的Ecad／catenin复合体的胞内重要成分。其异常改变可导致的整个复合体结构破坏与功能障碍，在肿瘤浸润、转移过程中发挥重要作用[2]。我们用免

4、疫组织化学方法检测βCatenin、cyclinD1及cmyc基因在HCC及癌旁肝组织中的表达，探讨三者表达与其他临床病理参数之间的关系。　　1资料与方法　　1.1临床资料　　收集1999年6月～2003年2月广西医科大学附属肿瘤医院手术切除的肝癌及癌旁肝组织标本52例，患者男性35例，女性17例；年龄20～67岁，中位年龄46.5岁。患者术前均未进行任何抗癌治疗，每例均在术中取肝癌及癌旁肝组织。所有病例均经HE染色证实为HCC。病理分级为I级19例、II级17例、III级15例、IV级1例。术前检测AFP(+)29例(注：AFP≥400ng/ml为阳性)、AFP(-)23

5、例，HBsAg(+)50例、HBsAg(-)2例；TSGF(+)40例(注：TSGF≥64U/L为阳性)、TSGF(-)12例，临床分期Ⅰ、Ⅱ期者34例，Ⅲ13期18例。cyclinD1及cmyc单克隆抗体购自美国Zymed公司,βCatenin单克隆抗体购自美国LabVisionNeoMarkers公司；即用型非生物素免疫组化EliVisionTMplus检测试剂盒购自福州迈新生物技术有限公司。　　1.2方法　　1．2．1βCatenin、cyclinD1及cmyc的免疫组化检测　　标本常规用10%甲醛固定、石蜡包埋，制成4μm连续切片后，进行免疫组化EliVisi

6、onTMplus法染色，主要步骤如下：切片脱蜡至水，高压修复1.5min，阻断内源性过氧化物酶20min，正常非免疫血清封闭30min，滴加Ⅰ抗在室温孵育1h，滴加50μl聚合物增强剂A，室温孵育20min；滴加50μl酶标抗鼠/兔聚合物B，室温孵育30min；新鲜DABH2O2溶液显色，苏木精复染。以已知阳性反应片作阳性对照，阴性对照采用PBS替代Ⅰ抗进行同步染色。　　1．2．2临床随访观察13　　所有病例术后进行常规的放疗和（或）化疗，并进行追踪随访１年。每个月电话或信访，每月定期复查肝功能及AFP、TSGF，术后每隔3个月复查CT，了解有无复发，术后1年了解生存情况。5

7、2例患者中50例有随访资料，其中14例在随访半年出现复发，12例在随访1年死亡。　　1．2．3结果判定　　染色结果观察采用双盲法，由两位病理科医生在不知病理分级与临床资料的情况下读片，每个切片察五个视野（400倍）计算阳性细胞数，计算总细胞数不少于1000个，按阳性细胞所占百分数分为：阳性细胞率<5%为阴性（-）；5%～24%为弱阳性（+）；25%～50%为阳性（++）；>50%为强阳性（+++）。　　1.3统计学分析　　用SPSS10.0软件进行χ2检验；相关分析采用Pears