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时间:2018-10-30
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1、IFS转基因大豆的鉴定及高异黄酮植株的筛选祁延萍刘雅婧许乐义王凌妍朴哲主崔光赫闫吉林大学植物科学学院摘要:大豆异黄酮是一种广泛应用的保健性活性物质,近年来已成为衡量大豆品质的重要指标之一。异黄酮合酶是大豆异黄酮合成途径中的关键酶基因之一,其在植物中的表达效率直接影响异黄酮含量。为进一步验证该基因的功能并获得高异黄酮稳定遗传转基因植株,本试验基于已有的IFS转基因材料开展研究。将其扩繁至T2代,考种分析植株农艺性状,发现转基因植株的性状指标未发生明显变化,PCR鉴定1FS转基因后代的结果显示:在125株转基因植株中,60株为阳性,占比48%,说明IFS在后代中可稳定遗传。选取IFS转基因
2、吉林35、Willimas82品种T2代的41株,利用改良后的三波长法测定籽粒中大豆异黄酮的含量,结果显示:IFS转基因植株的平均异黄酮含量为1.2mg^g1;其屮15株的异黄酮含量高于非转基因植株,占比达到36.6%,说明从转入IFS基因转基因大豆能够筛选出高异黄酮植株。本研究获得了稳定遗传的高异黄酮植株,为大豆遗传育种提供优异的种质资源;改良后的三波长法较原有方法更为精准、快速。关键词:大豆;IFS;异黄酮含量;三波长法;作者简介:祁延萍(1995-),女,学士,主要从事大豆分子育种研宂。E-mail:qiyp@mails.jlu.edu.cn。作者简介:王庆钰(1963-),女,
3、博士,教授,主要从事基因工程在育种上的应用与植物杂种优势的理论及其应用研究。E-mail:qywang@jlu.edu.cno收稿日期:2017-04-27基金:吉林大学大学生创新创业训练计划(2015821253)IdentificationofIFSTransgenicSoybeanandSelectionofPlantwithHighIsoflavonesQIYan-pingLIUYa-jingXULe-yiWANGLing-yanPIAOZhe-zhuCUIGuang-heYAN-FanWANGQing-yuCollegeofPlantScience,JilinUniversi
4、ty;Abstract:Asahealthyactivesubstances,soybeanisoflavoneshaveobviouseffectsinthepreventionofcancer,osteoporosis,cardiovasculardiseaseandwomen’sclimactericsyndrome-IFSisoneofthekeyenzymesinthepathwayofisoflavonebiosynthesisandithadapositiveeffectonthecontentofisoflavonesinsoybeanseeds,butwestillh
5、aven’tgetstableandefficienttransforms.Therefore,itisveryimportanttoimprovethecontentofsoybeanisoflavonesbystudyingisoflavonesynthasepathway.Inthisstudy,afterpropagatingIFStransgenicplantstoT2generation,physiologicalindexesintransgenicplantshadnoobviouslychangesbyagronomictraitsanalyzing.Afteride
6、ntifyingIFStransgenicsoybeansbyRT-PCRanalysis,therewere60TFStransgenicsoybeansin125plants,accountingfor48%.ThisresultindicatedthatIFSwasstablilyinheritedinoffspring.Wcusedthemodifiedthreewavelengthmethodtomeasuretheisoflavonecontentandresultsshowedthattheaverageisoflavonecontentwas1.2mg•g1inIFSt
7、ransgenicplants.Amongthe41IFSpositiveplants,isoflavonecontentof15individualplantswerehigherthanthatofthenon-geneticallymodifiedplants,whichaccountedfor36.6%.TheIFShadacertaineffectontheimprovementofisoflavonecontentanditispo
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