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1、CD59基因抗HeNe激光诱导凋亡的作用【摘要】目的探讨CD59基因抗IIe?Ne激光诱导凋亡的作用。方法将小鼠随机分成两组，小鼠背部脾区皮下分别接种HeLa细胞（I组）、转CD59基因HeLa细胞（II组），接种24h后采用24mW的He?Ne激光器照射小鼠脾区（瘤区），然后采用免疫组化方法检测凋亡相关基因Fas、B细胞淋巴瘤？白血病基因2（bcl?2）、细胞核因子？kB（NF?kB）的表达。结果I组瘤块质量及bcl?2、NF?kB表达明显低于II组，两组比较差异有显著性（t=，Z=—、一，P＜）。II组Fas的
2、表达与I组比较无显著差异（Z=_，P〉）。结论CD59基因可促进肿瘤细胞的生长及bcl?2、NF?kB的表达，具有抗He?Ne激光诱导凋亡的作用。【关键词】抗原CD95基因bcl?2NF?kB激光[ABSTRACT]0bjectiveTostudytheeffectofCD59geneonapoptosisofHeLacellinducedbyHe?NeLaser.MethodsHeLacellswereinjectedsubcutaneouslyintothebackofthemiceingroupI，andHe
3、LacellstransfectedwithCD59?geneintothebackofthemiceingroupII.After24hoftheinjection,themicereceivedHe?Nelaserradiation.ExpressionsofFas,bcl?2andNF?kBintumortissueweredemonstratedviaimmunohistochemistrytechnique.ResultsComparedwithgroupII，tumorweightandtheexpre
4、ssionsofbcl?2andNF?kBingroupIweresignificantlylower(t=;Z=—，一；P<),whiledifferenceintheFasexpressionbetweenthetwogroupswasnotsignificant(Z=—,P>).ConclusionCD59genemaypromotetheexpressionsofbcl?2andNF?kB,suggestingitsanti?apoptosiseffect.［KEYWORDS］antigens,CD95；g
5、enes,bcl?2；NF?kappaB:1asersCD59是补体终末段的一种调节蛋白，它具有抑制补体攻膜复合物的形成、保护正常组织免受补体溶解的作用。近年来对CD59与肿瘤关系的研究比较深入，发现其与肿瘤的生长失控及转移密切相关［1］。本研究采用He?Ne激光照射小鼠瘤区的方法，探讨CD59基因抗He?Ne激光诱导凋亡的作用。1材料与方法实验材料HeLa细胞、转CD59基因Hela细胞由本室保存［2］。凋亡相关基因Fas、B细胞淋巴瘤？白血病基因2(bcl?2)、细胞核因子？kB(NF?kB)免疫组化试剂盒购于
6、武汉博士德公司。HNZSQ?II型氦氖激光照射器为上海医用激光仪器厂产品。动物选择与分组取BALB/C纯系小鼠32只，体质量18〜22g，雌雄各半，随机分为2组。I组每只小鼠脾区皮下注射6X106的HeLa细胞，II组接种转CD59基因HeLa细胞，接种24h后分别进行激光照射。激光照射方法采用氦氖激光照射器，输出功率为24mW，能量密度为J/cm2,照射距离为50cm，光斑直径为cm,原束照射。照射部位为脾区（瘤区），每日照射激光1次，每次lOmin共15d,实验第16天处死小鼠。Fas、bcl?2、NF?kB蛋
7、白免疫组织化学检测检测步骤按试剂盒说明书操作。结果判定免疫组化染色胞浆或（和）胞膜呈棕黄色为阳性结果。参照文献［3，4］的方法，随机选取5个高倍视野（400倍），首先根据阳性细胞所占的百分比记分，阳性细胞数［2］李冰，张学成，高美华.藻蓝蛋白对Hela细胞CD59基因表达调控作用的研究［J］.高技术通讯，2017,16（2）:196?200.［31FR0MWITZFVB,VIOLAMV,CHAOS,etal•RasP21expressionintheprogressionofbreastcancer［J］.Huma
8、nPathol,1987,18:1268?1271.［4］姚济芬，郑伟，石一复，等.血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶丽P?2,丽P?9在子宫颈癌中的表达的免疫组化研究[J].中国实验诊断学，2002,6(2):72?75.[5]HERRI,DEBATINKM.Cellularstressresponseandapoptosisincancertherapy[
