人参皂苷rg1对运动性疲劳大鼠骨骼肌结构及功能的影响

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1、人参皂苷Rgl对运动性疲劳大鼠骨骼肌结构及功能的影响作者：冯毅狲，徐志伟，潘华山，赵自明【摘要】【目的】观察人参皂苷Rgl对运动性疲劳大鼠骨骼肌结构及功能的影响［1/2］。【方法】选用SD大鼠，随机分为空白组、模型组和人参皂苷Rgl组（剂量为50mg-kg-1•d-1），后2组采用中等强度的跑台运动复制运动性疲劳大鼠模型。在给药后运动造模，连续2周，检测各组大鼠骨骼肌丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性，线粒体膜电位和游离钙离子含量，并观察各组大鼠骨骼肌超微结构。【结果】模型组大鼠

2、骨骼肌SOD活性、线粒体膜电位、游离钙离子含量均降低，MDA含量升高，与空白组比较差异均有显著性意义（P【关键词】人参皂甙Rg1/药理学;运动性疲劳/中药疗法;肌，骨骼/损伤;肌，骨骼/超微结构;疾病模型，动物;大鼠运动性疲劳是机体进行体育锻炼和运动训练中不可避免的现象，也是限制锻炼和训练效果的重要因素之一［1］。适度的疲劳然后施以合理的恢复手段可以促进人体机能水平的提高，而过度的运动性疲劳和疲劳不及时消除会引起运动疲劳的积累，不仅无助于提高人体的机能水平，而且有可能形成过度训练症候群，最终对健

3、康形成损害［2］。运动性疲劳属于中医“劳倦”和“虚劳”的范畴，具有气虚阳弱的主要病机，而中药人参则具有扶正固本、大补元气和补血生血的功效。本研究拟通过观察人参提取物人参皂苷Rgl对运动性疲劳大鼠骨骼肌结构和功能的影响，探讨其抗疲劳的效果和机制。现报道如下。1材料与方法11实验动物SPF级雄性SD大鼠，体质量180〜220g，由广州中医药大学实验动物中心提供，实验动物使用许可证号：SYXK(粤)XX0085,使用动物质量合格证明编号：0031686。于广州中医药大学实验动物中心SPF级实验室内进行

4、实验，常规分笼喂养，自由饮水进食，动物室内温度21°C〜24°C，相对湿度40%〜55%，室内空气流通，光照时间12h。12药品与试剂人参皂苷Rgl(由上海同田生物技术有限公司提供，批号：07120624)临用时用生理盐水按0lmL/kg配成合适浓度后给药，丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(S0D)活性、钙离子浓度测定试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。13主要仪器ZHPT动物实验跑台由淮北正华生物仪器设备有限公司提供，JJ1型组织研磨机由深圳天南海北公司提供，TDL5A型低速离心机，72

5、2分光光度计由上海精密科学仪器公司提供，420型FACS流式细胞仪由美国BD公司提供。14运动疲劳模型的复制［3-4］与分组方法将30只雄性SD大鼠，随机均分为人参皂苷Rgl组（Rgl组，剂量为50mg•kg-1•d-1）、模型组（等容积生理盐水）和空白组（等容积生理盐水），每天早上灌胃1h后将空白组放回笼中常规喂养,人参皂苷Rgl组和模型组大鼠则进行中等运动强度的水平跑台运动，速度为15m/min,坡度0°，跑台20min,间歇40min，再跑台20min，每天1次，连续14d。所有大鼠每2d

6、称体质量1次，按照新的体质量确定给药量。15检测方法151骨骼肌MDA含量和SOD活性测定于大鼠左后肢相同部位腓肠肌取2块骨骼肌，约6g左右，用4°C生理盐水清洗，滤纸吸干，立即放入清洁干燥密闭小瓶中，-20°C保存备用。分别称取上述冻存骨骼肌组织50mg，加适量生理盐水，于冰水中用电动匀浆机制备成10g/L骨骼肌细胞匀浆。骨骼肌MDA含量采用硫代巴比妥酸法，S0D活性采用黄嘌呤氧化酶法检测，均严格按试剂盒使用说明书进行操作。152骨骼肌线粒体膜电位测定采用荧光流式仪检测法［5］。取冻存的5Om

7、g左右的同一部位腓肠肌1块,磷酸盐缓冲液（PBS）冲洗，制备成骨骼肌单细胞悬液，300目尼龙网过滤，调样本细胞浓度为lX106/mL，400目尼龙膜过滤以除去细胞团块。取上述骨骼肌细胞悬液加入等体积的Rhodaminel23,使其最终浓度为25umol/L，37°C避光孵育30min,PBS洗2次，lOOOr/min离心lOmin,采用流式细胞仪(flowcytometry，FCM)对线粒体膜电位进行检测(在2h内完成)，以488nm激光激发，发射波长为534nm,每份样本获取106个细胞，Ce

8、llQuest软件分析。线粒体膜电位以阳性百分比(P阳性)表示。153骨骼肌线粒体游离钙离子含量测定取冻存骨骼肌05g左右，用眼科剪剪碎后，放入加有生理盐水的lOmL玻璃匀浆器内，于冰水浴中以组织研磨机研磨成100g/L组织匀浆液。取上述组织匀浆液，离心机4°C、100Or/min离心10min,弃沉淀，取上清液，以4°C、10000r/min离心15min,取沉淀物，于冰水浴中用匀浆机制备线粒体匀浆液备用。采用甲基百里香酚蓝(MTB)比色法，按钙离子测定盒使用说明书进操作。154骨骼肌超微结构